腺病毒介导转化生长因子β1基因阻逆兔椎间盘退行性变的实验

目的:观察腺病毒载体搭载的人转化生长因子基因对兔椎间盘退行性变模型的治疗作用。方法:实验于2003-03/2004-09在协和医院骨科实验室进行。取4个月龄健康雌性日本大白兔30只,于协和医院骨科实验室行L4～5,L5～6前外侧纤维环损伤手术以构建椎间盘退行性变模型。术后8周将动物随机分入3组。治疗组14只,注射20μL(10×106pfu)腺病毒载体介导人转化生长因子β1基因;对照组8只,注射20μL(10×106pfu)腺病毒载体介导标志基因(Ad/CMV-LacZ);空白组6只,注射20μL生理盐水。另取2只同类的健康白兔作为正常对照,不予任何手术或治疗。注射后3周取各组椎间盘组织行苏木精-伊红染色、T2加权磁共振成像、蛋白免疫印迹、转化生长因子β1免疫组织化学观察。结果:①兔椎间盘组织切片观察结果:注射3周后,治疗组切口已基本愈合,髓核细胞大量增生;空白组纤维环外侧内2/3部分仍未愈合,部分髓核细胞坏死、凋亡;对照组较空白组改善不明显。②MRI扫描结果:治疗组椎间盘信号较对照组及空白组有所恢复,但并未完全达到正常椎间盘水平。③蛋白质免疫印迹分析结果:治疗组转化生长因子β1含量较对照组和空白组有显著上升(P<0.01)。④转化生长因子β1免疫组织分析结果:治疗组转化生长因子β1为强阳性表达(>50%),空白组几乎没有转化生长因子β1表达,对照组与空白组相似。治疗组显著高于对照组(χ2=20.563,P=0.00)。结论:腺病毒载体介导人转化生长因子β1基因转染退行性变的椎间盘细胞能够有效提高髓核细胞内转化生长因子β1含量,阻逆椎间盘退行性变。     

CT图像三维重建在骨肿瘤诊治中的应用探讨

目的探讨螺旋CTN学图像三维重建在骨肿瘤诊断中的价值及其对手术的指导意义。方法对128例骨肿瘤患者采用螺旋CT进行薄层扫描和三维重建进行诊断。CT扫描全部采用SiemensSOMATOMSensation16型多排高速螺旋CT机，1．0mm层厚。扫描所得断层资料通过网络传送至计算机工作站进行处理。采用Window．NT3．51平合上Insight三维重建软件进行三维重建。结果三维CT图像能够围绕X轴和Z轴任意旋转、切割以从不同角度观察，能够清晰显示骨肿瘤与周围组织结构的解剖形态特点。结论三维CT重建在骨肿瘤的诊断及手术方案的制订方面具有很大的临床应用价值，有助于骨肿瘤的立体定位和肿瘤破坏范围的正确评估，并为手术入路的设计、重建和内固定选择提供客观依据。     

手法治疗颈痛的研究

颈痛是临床常见多发病 ,它给患者带来难以忍受的痛苦 ,影响生活质量。应用手法治疗本类疾病的方法甚多 ,合理应用手法治疗无损伤 ,无痛苦 ,安全方便 ,适应于大多数颈椎病例 ,疗效可靠 ,深受患者欢迎 ,近年来各位专家对颈痛均有独特方法。本文就数家手法治疗颈痛的有关文献作一概述。祖国医学用手法治疗骨伤科类疾患在秦、汉以前已广泛使用。唐代蔺道人对此类手法加以整理 ,丰富了“相度”、“揣摸”、“拨伸”、“捺正”、“撙正”、“屈伸”等手法。以后历代陆续不断的实践充实 ,积累了丰富的内容。清代《医宗金鉴·正骨心法要旨》吸取了前…     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与骨肉瘤

寻找新方法,提高骨肉瘤(OS)治愈率,已成为骨科研究的重点.多个基因参与OS的发生发展,基质金属蛋白酶(MMP)与MMP组织抑制剂(TIMP)平衡紊乱在OS中起重要作用.MMP表达与肿瘤分级或侵袭性相关,且与复发或转移风险相关;TIMP表达与较弱的肿瘤侵袭行为及良好预后相关,其中以明胶酶(MMP-2、MMP-9)及TIMP-2、TIMP-1与OS关系最密切.明胶酶和MT1-MMP过表达多提示OS预后不良.尽管MMP-9、TIMP-1有不同作用,对疾病不同时期有重要意义,但都可作为OS不良预后的标记物,对高危病人更好地划分亚型有意义.抑制MMP治疗OS有潜在可行性.该文就MMP及TIMP在OS研究中的进展作一综述.     

寰椎侧块解剖学观测及其在侧块螺钉固定中的应用

目的通过对寰椎解剖学特征进行观测,为临床寰椎侧块螺钉内固定手术提供解剖学依据。方法收集10例成年尸体寰椎标本,使用游标卡尺进行线性测量;角度测量则先用钨丝取模,再用常规量角器检测。测量指标包括后弓内侧半距、后弓外侧半距、后弓高度、后弓宽距、侧块外侧高度、侧块内侧高度、侧块横径、侧块前后径、侧块内倾角。两例患者依据测量的解剖学数据,选在寰椎后结节中点旁20 mm与后弓下缘以上3 mm的交点处进钉,置入侧块螺钉后行X线检查,观察螺钉在寰椎侧块中的长度及与矢状面的角度。结果后弓外侧半距为(20.8±3.3)mm,后弓高度为(7.2±1.7)mm。两例患者X线片显示螺钉均在寰椎侧块内,螺钉长度25 mm,与矢状面保持(8~14)°。结论寰椎侧块螺钉的进钉点选在寰椎后结节中点旁20 mm与后弓下缘以上3 mm的交点处,与矢状面保持(8~14)°。     

Up-regulation of Niacinamide in Intervertebral Disc Aggrecan in vitro

The regulatory effects of niacinamide （Nia） on intervertebral disc （IVD） aggrecan in vitro was investigated. Chiba＇s 10 ng/mL interleukin-1 （IL-1）-induced rabbit IVD degeneration model in vitro was established. 0.5, 0. 25 and 0.05 mg/mL Nia was added to normal and degenerated IVDs for intervention. On the first and second week after intervention, safranin O-fast green staining intensity and glycosaminoglycan （GS） content were measured. The expression of aggrecan core protein was detected by RT-PCR. The results showed： （1） After treatment with 0. 5 mg/mL Nia for one week, the GS content in nucleus pulposus （NP） was increased by 44.80% as compared with control group （P〈0. 01） ; The GS content in IL-1 induction groups was increased with the increase of Nia concentrations： After treatment with 0. 5 mg/mL for one week, the GS content in NP was increased by 68.30% as compared with control group （P〈0. 01）. After two weeks, GS content in NP and fibrous rings was still higher than in control group at the same period （P〈0. 01） and untreated group （P〈0.01）. （2） Safranin O-fast green staining revealed that with the increase of Nia concentrations, staining density in NP and fibrous rings was increased and histological structure damage to IVDs by IL-1β was alleviated. （3） RT-PCR showed that the expression of core protein gene in IL-1β-induced degenerated IVDS was increased with the increase of Nia concentrations. It was concluded that under conditions in vitro, Nia could up-regulate the expression of aggrecan in IVDs and protect IVDs from IL-1β-induced degeneration at least partially, which offers a potential choice for IVD degeneration clinical therapy.     

腺病毒介导转化生长因子β1基因阻逆兔椎间盘退行性变的实验

目的：观察腺病毒载体搭载的人转化生长因子基因对兔椎间盘退行性变模型的治疗作用。方法：实验于2003-03／2004-09在协和医院骨科实验室进行。取4个月龄健康雌性日本大白兔30只，于协和医院骨科实验室行L4-5,L5-6前外侧纤维环损伤手术以构建椎间盘退行性变模型。术后8周将动物随机分人3组。治疗组14只，注射20μL（10&;#215;10^6pfu）腺病毒载体介导人转化生长因子β1基因；对照组8只，注射20μL（10&;#215;10^6pfu）腺病毒载体介导标志基因（Ad／CMV-LacZ）；空白组6只，注射20μL生理盐水。另取2只同类的健康白兔作为正常对照，不予任何手术或治疗。注射后3周取各组椎间盘组织行苏木精一伊红染色、T2加权磁共振成像、蛋白免疫印迹、转化生长因子β1免疫组织化学观察。结果：①兔椎间盘组织切片观察结果：注射3周后，治疗组切口已基本愈合，髓核细胞大量增生；空白组纤维环外侧内2／3部分仍未愈合，部分髓核细胞坏死、凋亡；对照组较空白组改善不明显。②MRI扫描结果：治疗组椎间盘信号较对照组及空白组有所恢复，但并未完全达到正常椎间盘水平。③蛋白质免疫印迹分析结果：治疗组转化生长因子β1含量较对照组和空白组有显著上升（P〈0．01）。④转化生长因子Bl免疫组织分析结果：治疗组转化生长因子β1为强阳性表达（〉50％），空白组几乎没有转化生长因子β1表达，对照组与空白组相似。治疗组显著高于对照组（χ^2=20．563，肚0．00）。结论：腺病毒载体介导人转化生长因子β1基因转染退行性变的椎间盘细胞能够有效提高髓核细胞内转化生长因子β1含量，阻逆椎间盘退行性变。     

TRAIL联合阿霉素和IFN-γ对人骨肉瘤细胞凋亡的影响

 目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合阿霉素和IFN-γ应用对人骨肉瘤细胞生长抑制和诱导凋亡的作用。 方法 用MTT测定TRAIL、阿霉素、IFN-γ单独或联合应用对人骨肉瘤细胞MG-63的体外增殖抑制作用,并检测各组细胞凋亡 率。 结果 TRAIL、阿霉素、IFN-γ三者联合作用于MG-63细胞后,能显著增强对MG-63的杀伤、抑制增殖及诱导凋亡作用，明显高于单独应用TRAIL组或阿霉素组(P<0.05)。 结论 TRAIL、阿霉素、IFN-γ三者联用能显著提高骨肉瘤细胞MG-63生长抑制和诱导凋亡作用。     

葡萄糖转运蛋白-1在不同骨肿瘤中的表达

目的研究葡萄糖转运蛋白-1（GLUT-1）在正常骨组织及不同骨肿瘤标本中的表达情况。方法收集我院临床骨肉瘤标本30例，骨巨细胞瘤标本15例，骨样骨瘤标本10例及正常骨组织标本10例，采用免疫组化染色检测GLUT-1的分布。体外培养骨肉瘤细胞系MG63、临床骨肉瘤细胞、临床骨巨细胞瘤细胞及成骨细胞，RT-PCR检测GLUT-1基因的表达。结果免疫组化显示，骨肉瘤标本GLUT-1染色强阳性占总例数的53％；骨巨细胞瘤切片GLUT-1染色，阳性占总例数的60％；骨样骨瘤标本多为阴性，阴性占总例数的80％；正常骨组织中未见GLUT-1阳性表达。骨肉瘤明显高于与其余3组标本（χ^2=1．622，P=0．009；χ^2=34．667，P〈0．001，χ^2=40．000，P〈0．001）。RT-PCR显示，GLUT-1基因表达存在于MG63细胞、临床骨肉瘤细胞及骨巨细胞瘤中，而正常成骨细胞内并无GLUT-1表达。结论骨肿瘤中存在GLUT-1表达，且GLUT—1与骨肿瘤的恶性程度有较密切的关系。GLUT-1有可能作为判断骨肿瘤恶性程度参考指标及骨肿瘤治疗的新靶点。