HSP90β干扰和过表达慢病毒载体的构建及其在骨肉瘤细胞Saos-2中的表达

目的:获得热休克蛋白90β(HSP90β)基因干扰和过表达慢病毒表达系统，并检测其在人骨肉瘤细胞株Saos-2中的表达水平。方法:设计合成shRNA，以慢病毒表达质粒构建HSP90β干扰和过表达载体，酶切电泳、测序技术鉴定载体构建是否成功。重组病毒转染H1299细胞，以嘌呤霉素筛选稳定转染的Saos-2细胞，通过荧光显微镜观察计数获得转染效率。将感染好的细胞分为干扰NC组（NEG-shRNA）、干扰组（shRNA-HSP90β）、过表达NC对照组（NEG-pEZ）及过表达组（pEZ-HSP90β）。通过qRT-PCR 与Western blotting 分别从mRNA 和蛋白表达水平验证目的基因的干扰和过表达水平。结果:插入慢病毒表达载体的基因片段与目的基因的碱基序列完全一致。病毒包装成功后，嘌呤霉素最小致死浓度1 μg/ml，感染复数200，感染人Saos-2的感染效率达80%，其中shRNA-HSP90β组干扰效率为86.35%，pEZ-HSP90β组的mRNA相对表达量增加2.8倍。进一步研究发现，shRNA-HSP90β组较NEG-shRNA组中HSP90β蛋白表达明显降低，pEZ-HSP90β组较NEG-pEZ组HSP90β蛋白表达增加。结论:HSP90β基因干扰和过表达慢病毒载体构建成功，并能够在Saos-2中稳定表达。     

妊娠期附件包块的诊断策略

妊娠期附件包块包括生理性包块、炎性包块、良性肿瘤、恶性肿瘤等，近年来发生率有上升趋势。妊娠期卵巢生理性包块多在妊娠中、晚期或产后自行消失；卵巢良性肿瘤若无并发症出现，未阻塞产道，妊娠期可密切观察；而妊娠期卵巢恶性肿瘤危及母胎安全，需积极干预处理。因此，孕期对于卵巢恶性肿瘤的诊断和鉴别诊断具有重要的意义。在诊断过程中，影像学检查及肿瘤标志物的结果需考虑妊娠本身的影响。文章主要阐述妊娠期附件包块的诊断方法及特点。     

青霉素杂质谱分析方法的优化与转换

目的建立青霉素杂质谱HPLC分析方法,并将其转换成UPLC/UHPLC方法。方法以青霉素混合降解溶液为样品;首先分析《中国药典》(2010年版,ChP2010)方法甲醇-缓冲盐二元流动相色谱系统的缺陷;再利用实验设计理念,以响应曲面法(response surface methodology,RSM)的中心组合设计(central composition design,CCD)对色谱系统进行优化,满意度函数法确定最优色谱条件,并优化梯度洗脱条件;最后,利用软件对HPLC方法的流速、进样体积和梯度时间进行几何缩放,并通过色谱柱的选择,将其分别转换为UPLC方法和UHPLC方法。结果新HPLC方法:色谱柱为Capcell Pak C18 MGII(4.6mm×250mm,5μm),流速:1.0m L/min,进样体积:20μL;UPLC方法:色谱柱为Cortecs C18(2.1mm×100mm,1.6μm),流速:0.35m L/min,进样体积:2.0μL;UHPLC方法:Cortecs C18(4.6mm×150mm,2.76μm),流速:0.8mL/min,进样体积:10μL。3种方法的检测波长均为225nm,柱温均为34℃;流动相A均为磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾10.6g,加水至1000mL,用磷酸调pH至3.4)-甲醇(72:14,V/V),流动相B均为乙腈;均为梯度洗脱,但梯度洗脱表不同。结论 3个色谱系统的分离效果(出峰顺序和个数)相似。新HPLC方法可以分离出更多的降解杂质,并明显改善了青霉素峰的拖尾,缩短了分析时间。     

持续负压封闭引流技术在心脏外科手术后纵隔感染中的应用

目的探讨持续负压封闭引流技术在心脏外科手术后纵隔感染中的治疗效果。 方法收集2013年4月至2017年4月期间在新疆维吾尔自治区人民医院心脏外科接受心脏外科手术后发生纵隔感染的42例患者临床资料，按照随机数字表法将患者分为2组，负压引流组和常规换药组，每组21例。负压引流组采用持续负压封闭引流技术治疗；常规换药组采用传统创面换药方法治疗。观察2组患者平均住院时间、抗生素应用时间、治愈率及治疗效果。数据比较采用t检验和χ²检验。 结果负压引流组平均住院时间为(17.0±7.8) d，常规换药组平均住院时间为(26.0±9.3) d，2组比较差异有统计学意义(t＝3.446，P＝0.002)；负压引流组抗生素应用时间为(8.0±2.9) d，常规换药组抗生素应用时间为(12.0±5.3) d，2组比较差异有统计学意义(t＝3.833，P＝0.001)；负压引流组患者经过持续负压引流，20例患者感染得到有效控制，切口完全愈合，治愈率为95.2%，明显高于常规换药组(71.4%)，差异有统计学意义(χ²＝4.286，P＝0.038)。 结论持续负压封闭引流技术对心脏外科术后纵隔感染有很好的控制作用，有利于创面愈合，是一种简单、安全有效的治疗方法。     

慢性瘙痒患者生活行为方式与皮肤生理功能的相关性

  目的   调查慢性瘙痒患者生活行为方式对皮肤生理功能的影响，为瘙痒患者健康管理提供依据及措施方案。   方法   对慢性瘙痒患者进行生活行为方式调查，包括饮酒、吸烟、饮水、饮食，膳食平衡指数（dietary balance index，DBI）、锻炼5种常见因素；完成经表皮水分流失、表皮含水量、表皮脂质、皮损红斑指数检测，评估患者瘙痒程度，并分析患者生活行为方式与其皮肤生理状况的相关性。   结果   吸烟者91例（44.4%），饮酒者18例（8.78%）；日均饮水量（1211.90±520.28） mL，显著低于健康标准（P < 0.05）；DBI负端分显著高于正端分，膳食质量距显著偏移标准值（ P < 0.05），196例（95.6%）锻炼不充分。吸烟可增加患者瘙痒体验程度，生活方式与皮肤生理功能指标相关（ P < 0.05）。膳食结构和质量在疾病中呈现出复杂性影响。   结论   瘙痒患者的多种生活行为方式偏离健康要求，而生活方式也对皮肤生理功能产生影响。因此在瘙痒患者的管理中，对生活行为方式的个体化指导、干预与管理，应列为瘙痒预防和诊治的重要措施。      

脓毒症液体复苏的临床评估指标

脓毒症是临床常见疾病，可导致脓毒症休克，住院死亡率超过40%。尽管《拯救脓毒症运动：2016脓毒症和脓毒性休克国际指南》推荐将平均动脉压控制在65 mmHg以上和乳酸正常化作为复苏目标，但并不能完全反映休克状态下的组织灌注情况，临床医生可通过结合其他大循环和微循环复苏指标来优化脓毒症患者的液体治疗策略，从而更充分地反映组织灌注情况。本文将总结可用于指导脓毒症患者早期液体复苏的大循环血流动力学参数和微循环灌注指标。     

植入物乳房重建一步法和二步法临床对比研究

目的:探讨即刻乳房假体重建（一步法）和应用扩张器的假体重建（二步法）两种不同手术方式在术后并发症、美容效果和成本效益的差异。方法:回顾性分析我院乳腺外科2015年5月至2018年5月收治的285例乳腺癌植入物重建患者，依据手术方式不同分为一步法组（145例）和二步法组（140例），比较两组患者临床资料的差异。结果:一步法组术后出血发生率（6.8%）高于二步法组（1.4%），差异有统计学意义（P=0.021）。一步法组术后伤口皮瓣坏死率（6.2%）高于二步法组（1.4%），差异有统计学意义（P=0.036）。二步法组乳房满意度评分（81.5±7.1）分高于1步法组（78.6±6.2）分，差异有统计学意义（P=0.035）。二步法组住院总花费（80 334.8±6 149.8）元高于一步法组（60 966.5±5 544.9）元，差异有统计学意义（P=0.049）。二步法组住院天数（34.3±3.2）天多于一步法组（17.5±3.9）天，差异有统计学意义（P=0.014）。结论:在植入物乳房重建两种手术方式中，二步法相较于一步法，其并发症少，美容效果好，但在成本效益上并不优于一步法。     

从骨免疫学到骨微生物学：肠道微生物如何调节骨骼

肠道微生物群被称为人体的第二个基因库,在维持人体平衡中起主要作用。不良饮食习惯、抗生素滥用、病理状态和生活环境改变会对肠道菌群产生负面影响,以引起多种疾病。最新研究发现肠道微生物群与骨质疏松症之间有着密切的联系,同时引入了一个新术语"骨微生物学",该研究领域旨在弥合骨骼生理学、胃肠病学、免疫学和微生物学之间的差距。本文简要介绍了肠道菌群通过免疫系统、新陈代谢和内分泌环境以及其他因素影响骨代谢的潜在机制,通过研究肠道菌群与骨骼健康之间的关系,不仅对于维持骨骼健康和最大程度地减少骨质疏松症很重要,而且对于肠道微生物群是否可作为骨质疏松症新型治疗靶标以及是否可用作骨折预测的生物标志物方面具有重要意义。