非促有丝分裂型人酸性成纤维细胞生长因子的受体结合特性及对MAPK信号通路的影响

目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖活性;采用受体放射性配基结合法,测定haFGF和nm- haFGF与其受体结合的亲和力及受体总结合位点数RT ;利用Western印迹检测haFGF和nm- haFGF分别作用于NIH3T3细胞后MAPK信号通路中ERK信号分子的表达。结果:与haFGF比较,nm- haFGF对NIH3T3细胞的促增殖活性降低,nm -haFGF与NIH3T3细胞胞膜上aFGF受体结合的亲和力下降,但与受体结合的总位点数不变。Western半定量检测结果显示,nm -haFGF组信号蛋白ERK的表达水平明显低于haFGF组。结论:nm -haFGF与受体结合能力下降,下调MAPK信号通路是导致nm haFGF的促分裂活性降低的主要原因之一。     

haFGF突变体促细胞增殖活性降低及其机制

目的：观察N端缺失27个氨基酸残基的人酸性成纤维细胞生长因子突变体（mhaFGF）对肝癌细胞增殖活性和信号转导的影响。方法： 用不同浓度（0.01-100 μg/L）的人酸性成纤维细胞生长因子（haFGF）及mhaFGF分别处理肝癌细胞，15 min后用半定量Western blotting检测信号蛋白Grb2、Erk1/2在肝癌细胞中的表达，48 h后用MTT法检测细胞增殖活性，并用流式细胞仪分析细胞周期。结果： haFGF组G1期细胞比例显著低于和S期显著高于mhaFGF组和对照组，而mhaFGF组与对照组间无差别; mhaFGF组的Grb2和MAPK-ERk1/2信号分子表达水平低于haFGF组。结论： mhaFGF促分裂活性的下降可能是通过下调MAPK信号通路中的MAPK-ERK1/2和Grb2信号分子的表达来实现的。     

非促有丝分裂型人酸性成纤维细胞生长因子对细胞增殖活性的影响

目的研究观察人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和N端缺失27个氨基酸残基的非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfactor,nm-haFGF)对鼻咽癌细胞及血管内皮细胞增殖活性的影响。方法用不同浓度(0.01～100ng/ml)的人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)及nm-haFGF分别刺激鼻咽癌细胞及血管内皮细胞,作用48h后采用MTT法测定haFGF和nm-haFGF对两种细胞的增殖活性。结果在各浓度(>0.01ng/ml)下,nm-haFGF组对鼻咽癌细胞(除浓度为50ng/ml外)和血管内皮细胞的促增殖作用都显著低于haFGF组。结论nm-haFGF对鼻咽癌细胞及血管内皮细胞的促分裂活性下降。