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PSMA-IRES-FCY1-TK真核表达载体的构建及在前列腺癌细胞中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的: 构建前列腺特异性膜抗原(PSMA)启动子调控表达的FCY1/TK双自杀基因表达载体,并观察单、双自杀基因对前列腺癌细胞LNCaP的杀伤作用.方法: 通过PCR方法扩增出基因组DNA中PSMA启动子,利用基因重组的方法,替换真核表达载体pIRES中的CMV启动子.测序正确后,再将自杀基因FCY1和HSV-TK分别克隆于载体pIRES的两个多克隆位点,构建真核表达载体pPSMA-IRES-FCY1-TK.将该载体转染LNCaP细胞,用RT-PCR的方法检测其转录,用MTT法检测前体药物5-氟胞嘧啶、丙氧鸟苷单一或联合使用对转染后的LNCaP细胞的杀伤作用.结果: PCR扩增出长1400 bp的PSMA启动子片段,经克隆至pIRES后酶切鉴定证实,并测序表明序列与GenBank(Accession Number AF007544)报道的一致.pPSMA-IRES-FCY1-TK经脂质体转染LNCaP细胞后,RT-PCR检测到FCY1和TK基因在该细胞中均有转录.MTT法检测表明5-FC与GCV联合使用,其细胞生长抑制率明显高于单独使用5-FC,GCV(P<0.05). 结论: pPSMA-IRES-FCY1-TK的双自杀基因体系对前列腺癌细胞LNCaP细胞的杀伤作用,明显优于单自杀基因体系. 相似文献
2.
流式细胞术在胸腔积液及腹水细胞诊断中的价值 总被引:8,自引:0,他引:8
目的:探讨DNA异倍体对于伴有胸腔积液及腹水肿瘤的诊断价值。方法;将临床上出现中等量以上胸腔积液或腹水的55例患者,抽取胸腔积液或腹水,分离其中的细胞,制备单细胞悬液,用流式细胞仪分析DNA异倍体,并探讨其与病诊断及临床诊断的关系。结果:DNA异倍体在肿瘤细胞中出现率显著高于非肿瘤细胞,统计学检验表明两者差异有显著性。结论:流式细胞术分析胸腔积液及腹水细胞的DNA异倍体,对于恶性肿瘤的细胞学诊断有较大的意义,可在临床推广应用。 相似文献
3.
原发性肝癌患者红细胞免疫和T细胞亚群的变化及相关性分析 总被引:5,自引:2,他引:3
80年代初,Siegel[1]提出红细胞免疫的概念,引起国内外有关学者的关注。红细胞不仅参与呼吸功能,而且具有清除循环免疫复合物,增强T细胞反应等多种免疫功能。此外,红细胞在肿瘤患者免疫方面亦发挥着重要的作用[2]。我们测定了59例原发性肝癌患者红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR)及T细胞亚群,以探讨患者红细胞免疫功能和淋巴细胞免疫功能的变化以及两者间的相互关系。1材料和方法1.1材料59例原发性肝癌病例均为本院住院患者,其中男49例,女10例,… 相似文献
4.
目的探讨一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)在脑梗死患者发病过程中的含量变化及其意义.方法检测53例脑梗死急性期患者和40例健康对照组血清中的NO、NOS和HDL-c的含量,并进行显著性检验和相关性分析.结果与对照组比较,脑梗死患者NO和NOS含量显著高于对照组(P<0.01,P<0.05),其中皮层动脉梗死组高于腔隙性梗死组(P<0.01,P<0.05).而脑梗死组HDL-c显著低于对照组,其中皮层动脉梗死组低于腔隙性梗死组(P<0.01),NO与HDL-c呈现负相关关系(r=-0.556,P<0.01).结论脑梗死患者体内自由基反应及HDL-c合成失去平衡,观察NO、NOS及HDL-c值的变化具有重要意义. 相似文献
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流式细胞仪检测重组合异种骨移植患者外周血T淋巴细胞亚群?… 总被引:1,自引:0,他引:1
观察重组合异种骨移植患者外周血T淋巴细胞亚群的变化。方法:患者空腹采血,与莹光抗体反应,上流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群。结果;RBX移植患者术后7d14d和28d淋巴细胞亚群。结果;RBX移植患者术后7d,14d和28dT淋巴细胞亚群与术前相比无明显变化。 相似文献
6.
为了研究乳腺癌的发展过程中雌二醇的作用机制及参与因素,我们使用流式细胞仪观察了人乳腺癌细胞株SK-BR-3在雌二醇(E2)作用下的生长特征及P185蛋白、EGF受体的表达与癌细胞生长的关系。研究方法:对人乳腺癌SK-BR-3细胞培养增殖后分别加入10nmol/L雌二醇、7nmol/L Tamoxifen以及不用药对照共三组分别作细胞周期分析, 相似文献
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前体药物甲氨喋呤-α-肽对前列腺癌动物模型治疗的研究 总被引:3,自引:1,他引:2
目的:研究前列腺癌的导向酶-前体药物疗法(ADEPT),在体内观察前体药物甲氨喋呤-α-肽对前列腺癌的作用。方法:用前体药物甲氨喋呤-α-苯丙氨酸(MTX-α-Phe)和甲氨喋呤-α-精氨酸(MTX-α-Arg)对前列腺癌荷瘤裸鼠模型行肿瘤生长抑制及药物动力学的观察。结果:经抗人精浆蛋白单克隆抗体导向的羧肽酶-A-MTX-α-Phe动物模型体内试验,ADEPT治疗组肿瘤生长明显抑制,裸鼠生存时间延 相似文献
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恶性肿瘤患者T细胞亚群与红细胞免疫功能的变化及其相关性分析 总被引:21,自引:0,他引:21
目的:为了提供有意义的免疫治疗,观察恶性肿瘤患者T细胞亚群和红细胞免疫功能变化,并探讨了2系统的相关性。方法采用直接免疫荧光法的流式细胞分析术检测108例恶性肿瘤患者细胞亚群(CD^ 4,CD^ 8_,采用免疫粘附酶母菌花环法检测红细胞免疫功能(C3bRR,ICR)。结果恶性肿瘤患者表现为CD^ 4百分率降低,CD^ 8百分率升高,CD^ 4/CD^ 8比值降低;RBC-C3bRR降低,RBC-ICR升高,以上指标与正常对照组比较均有非常显著性差异,差异(P<0.01)。各肿瘤组中CD^ 4/CD^ 8与RBC-C3bRR均呈明显正相关(γ=0.65,P<0.05)。结论恶性肿瘤患者T细胞亚群和红细胞免疫功能变化明显,两者又有明显相关性。 相似文献
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0 引言 有关人体内微量元素、一氧化氮变化与疾病之间关系曾有许多报道 ,但对恶性骨肿瘤疾病与微量元素及一氧化氮之间的关系尚未引起人们的重视 .作者对 2 9例恶性骨肿瘤病人血清铜、锌、NO与正常人相比较 ,现报告如下 .1 材料和方法1.1 材料 标本收集于 1998年 7月 - 1999年 12月西京医院的 2 9(男 16 ,女 13)例住院患者 ,年龄 16~ 72岁 ,平均年龄5 9.3岁 .其中 ,软骨肉瘤 3例 ,骨肉瘤 5例 ,骨巨细胞瘤 ( ~ 级 ) 6例 ,骨髓瘤 4例 ,骨淋巴肉瘤 3例 ,滑膜肉瘤 2例 ,转移性骨肿瘤 6例 .对照组 2 5 (男 11,女 14)例 ,系骨质增生患者 .… 相似文献
10.
随着自杀基因治疗成为治疗恶性肿瘤的重要方法,其中组织特异性启动子是目前研究的热门之一.前列腺癌自杀基因治疗常用的组织特异性启动子有PSA及Probasin等,其中PSA,Probasin为雄激素依赖性,对于未经雄激素去势治疗的前列腺癌治疗效果较好;而PSMA为雄激素非依赖性,对于是否经过雄激素去势治疗的前列腺癌均有良好疗效,适用范围广. 相似文献