参与式实验教学促进学生实践能力培养

目的:探讨学生参与实验准备工作对于学生实践能力的影响。方法:将河南省某高校2006年级部分学生分为实验组与对照组,实验组课前跟随教师参与实验准备工作,而对照组不参加,只按常规模式上实验课,课程结束后,在同一时间内以相同的方法一同进行实验考核。结果:实验组在20个骨髓细胞的辨认、肠杆菌科分离及生化鉴定、肥达反应效价判断、质粒的提取与纯化、不规则抗体的筛选与鉴定、白细胞分类计数等6项内容的考核结果与对照组相比较,有显著性差异(P<0.05);而回收试验实验组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:医学检验专业是医学院校各专业中实践性较强的一个专业,学生利用课余时间参与实验准备工作,能够增强专业学习兴趣,提高实践动手能力。     

长链非编码RNA HOTAIR通过调控PIK3R3促进肝癌HepG2细胞的转移和侵袭

目的:探讨长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)对肝癌Hep G2细胞转移和侵袭的影响。方法:运用免疫组化技术检测磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基3(phosphoinositide-3-kinase regulatory subunit 3,PIK3R3)在正常肝脏组织和肝癌组织的表达;运用q PCR和Western blot检测慢病毒LV3-sh HOTAIR和LV3-sh PIK3R3对HOTAIR和PIK3R3基因的沉默效率;Transwell侵袭实验检测HOTAIR和PIK3R3的表达对肝癌细胞Hep G2侵袭能力的影响;划痕实验检测HOTAIR和PIK3R3的表达对肝癌细胞Hep G2迁移能力的影响;q PCR检测沉默HOTAIR和PIK3R3后miR-214的表达;q PCR检测转染miR-214 mimics和miR-214 inhibitor后HOTAIR和PIK3R3的表达;双萤光素酶报告基因系统检测miR-214对HOTAIR和PIK3R3转录活性的影响。结果:和正常肝组织比较,PIK3R3在肝癌组织中的表达明显增加;沉默HOTAIR和PIK3R3基因后,肝癌细胞株Hep G2的侵袭和转移能力明显降低;沉默HOTAIR和PIK3R3基因后,miR-214表达上调;转染miR-214 mimics后,HOTAIR和PIK3R3的表达降低;转染miR-214 inhibitor后,HOTAIR和PIK3R3的表达上调;双萤光素酶报告基因系统检测结果显示miR-214可以直接调控HOTAIR和PIK3R3的转录活性。结论:HOTAIR可以通过miR-214调控PIK3R3的表达,从而促进肝癌细胞的侵袭和迁移能力     

参与实验教学准备 促进实践能力培养

目的 探讨学生参与实验准备工作对于学生实践能力的影响.方法 将河南省某高校2006级部分五年制医学检验专业学生分为实验组与对照组,实验组课前跟随教师参与实验准备工作,而对照组不参加,只按常规方式上实验课,课程结束后,在同一时间内采用相同方法进行实验考核.结果 实验组在20个骨髓细胞的辨认、肠杆菌科分离及生化鉴定、肥达氏反应效价判断、质粒的提取与纯化、不规则抗体的筛选与鉴定、白细胞分类计数等6项内容的考核结果与对照组相比较,差异具有统计学意义;而回收试验实验组与对照组比较差异无统计学意义.结论 学生利用课余时间参与实验准备工作,能够增强专业学习兴趣,提高实践动手能力.     

以应用型人才培养为导向完善实验教学管理

目的探讨以应用性人才培养为导向的高等医学院校教学实验室仪器设备标准化管理的重要性。方法将仪器设备标准化管理理念应用到高等医学院校教学实验室管理中。比较引入仪器设备标准化管理理念管理前后仪器完好率和操作合格率。结果实施仪器设备标准化管理后,仪器的完好率由实施前的82.91%提高至91.77%,差异有统计学意义(χ~2=5.61,P0.05);操作合格率由62.50%提高至87.50%,差异有统计学意义(χ~2=5.33,P0.05)。结论应用仪器设备标准化管理理念管理高等医学院校教学实验室仪器设备,提高了仪器设备的完好率,提升了实验教师的制度化素养和业务素养。     

手术对腹部肿瘤患者凝血功能的影响

目的探讨手术对腹部肿瘤患者凝血功能的影响。方法检测63例腹部肿瘤患者手术前后血浆血小板(PLT)计数、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)和D-二聚体(D-D),并比较手术前后各项指标的差异。结果与术前比较,术后血浆PLT降低(P<0.05),PT、TT、APTT缩短(P<0.05),FIB、D-D明显增高(P<0.01)。结论腹部肿瘤患者手术可增加血栓或出血风险,应在手术期间及时采取预防措施。     

人TLR4胞外段的克隆、表达及功能活性分析

目的:获得高纯度、高活性的人TLR4胞外段蛋白。方法:采用PCR方法从含人TLR4 cDNA的质粒pCDNA3-TLR4中扩增人TLR4胞外段基因片段,将其插入载体pET32a并导入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化融合蛋白。SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的相对分子质量和抗原性,ELISA和FCM鉴定其功能活性。结果:获得1 911 bp的人TLR4胞外段基因片段,构建成重组表达载体pET32a-TLR4并在大肠杆菌中表达。TLR4-Trx融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的12%,其纯度较高。ELISA和FCM检测显示,TLR4-TrX融合蛋白不仅与配体LPS结合,还能竞争性抑制LPS与THP1细胞结合。结论:所获TLR4-Trx融合蛋白纯度高,功能活性好,为进一步研究TLR相关的免疫调节机制提供物质基础。     

胃癌患者血清炎性因子水平检测的临床意义

目的观察胃癌患者血清炎性因子表达水平,并探讨其临床意义。方法通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫比浊法检测108例胃癌患者血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,并与85例胃良性病变患者和120例健康体检者对应指标进行比较。结果胃癌组患者HMGB1、CRP、IL-6、IL-8和TNF-α表达水平明显高于胃良性病变组和健康对照组(P<0.05,P<0.01)。胃癌组患者血清炎性因子水平与肿瘤淋巴结转移分期密切相关,随着胃癌病情加重,HMGB1、CRP、IL-6、IL-8和TNF-α水平逐渐升高,Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者各炎性因子水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05,P<0.01)。结论血清炎性因子与胃癌的发生发展密切相关,可作为反映胃癌进展的标志物。     

医学检验专业授课教师对后进生转化的有效方法探讨

怎样促进后进生转化是教学过程中普遍存在的问题。在医学院校，负责检验专业学生工作的主要是辅导员，但笔者认为授课教师可通过适当改变教学方法、以身示范、给予学生充分的自信、提升教师的人格魅力等来有效促进后进生的转化。本文对以上内容进行了简要的探讨和阐述。     

MBL抑制白假丝酵母菌刺激THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-8

目的 探讨甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)对白假丝酵母菌(Candida albicans)刺激的THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-8的影响.方法 以不同浓度人MBL预处理THP1/CD14细胞2 h后,再用热灭活的酵母相C.albicans和/或菌丝相C. albicans刺激细胞24 h,收集培养上清,以ELISA从蛋白水平分析其TNF-α和IL-8的产生.收集细胞提取总RNA,以RT-PCR从转录水平评估TNF-α和IL-8的表达,Western blot分析NF-KB的细胞核移位.结果 ELISA检测发现,两种相态的C. albicans均可刺激各组细胞分泌TNF-α和IL-8,酵母相C.albicans刺激细胞产生细胞因子水平稍高;高浓度MBL(10～20 mg/L)均可抑制两种相态的C. albicans诱导细胞分泌TNF-α和IL-8,低浓度MBL(1 mg/L)则几乎无影响;RT-PCR分析亦显示,与相应只用C. albicans刺激的实验组相比,高浓度MBL(20 mg/L)对两种相态的C. albicans诱导的TNF-α、IL-B的mRNA表达均有不同程度的抑制作用;Western blot分析显示,高浓度MBL(20 mg/L)对两种相态的C. albicans诱导的NF-KB细胞核移位有显著的抑制作用.结论 MBL可抑制C.albicans诱导的THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-8,提示MBL能够在抗C.albicans 免疫中起调控作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of mannan-binding lectin (MBL) on IL-8 and TNF-α production induced by Candida albicans ( C. albicans) in human THP1/CD14 monocytes. Methods The THP1/CD14 cells were stimulated for 24 h with heat-inactivated yeast form or hyphal form cells of C. albicans strain at the indicated ratios after pretreated with human natural MBL at concentrations ranging from 1 to 20 mg/L for 2 h. The content of IL-8 and TNF-α in culture supernatants were detected by ELISA,and the levels of IL-8 and TNF-α mRNA expressions in these cells were determined by RT-PCR. Western blot was used to detect C. albicans-induced NF-κB translocation in THP1/CDI4 cells. Results ELISA showed that secretion of IL-8 and TNF-α from THP1/CD14 cells could be induced by both yeast cells and hyphal cells. Hyphal cells proved to be much less efficient than yeast cells in stimulating production of IL-8and TNF-α by THP1/CD14 cells. The productions of IL-8 and TNF-α by THP1/CD14 cells induced with C.albicans were profoundly inhibited by MBL at higher concentrations ( 10-20 mg/L) but not MBL at lower concentrations ( 1 mg/L). RT-PCR analysis also indicated that the mRNA expressions of IL-8 and TNF-αt in THP1/CD14 cells were decreased to various extents by MBL at higher concentration, compared to the corresponding THP1/CD14 cells stimulated with C. albicans only. Similarly, MBL at higher concentration ( 20mg/L) decreased the NF-κB translocation in THP1/CD14 cells. Conclusion MBL may inhibit IL-8 and TNF-α production induced by dimorphism C. albicans in THP1/CD14 cells, suggesting that MBL can play some roles on the regulation of C. albicans immune response.