低剂量CT联合血清P16甲基化检测在肺癌早期诊断中的研究

目的研究在无症状的肺癌高危人群中低剂量CT(LDCT)联合血清P16基因甲基化检测对肺癌早期诊断的可行性。方法405例受试者随机分入LDCT P16甲基化检测组(221例)和前后位胸片(CXR)组(184例)。入选标准为男性,55~75岁,吸烟指数≥200年支。结果LDCT P16甲基化组97.7%(216例)和CXR组93.5%(173例)的受试者完成检测。LDCT P16甲基化组与CXR组分别有22例(10.2%)和13例(7.5%)可疑肺癌,3例及1例确诊肺癌。结论LDCT联合P16基因甲基化检测比CXR检查发现更多的肺癌。     

HIV-1型病毒蛋白R基因表达载体的构建及其在前列腺癌细胞系PC-3中的表达

目的：利用AdEasy腺病毒载体系统构建含HIV-1病毒蛋白R（viral protein R,Vpr）基因的重组腺病毒,使之有效感染靶细胞前列腺癌细胞系PC-3,并在其中表达Vpr。方法：自表达载体pCI—neo—Vpr中扩增出Vpr基因,插入到pAdTrack—CMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdTrack—Vpr,经限制性内切酶Pme I酶切线性化后,利用磷酸钙介导法将其与腺病毒骨架质粒pAdEasy共同转化到BJ5183大肠埃希菌。挑选同源重组质粒,经Pac I酶切后回收大片段,并将其转染包装细胞AD293。利用荧光显微镜观察AD293细胞中绿色荧光蛋白（GFP）表达。收集第一代重组病毒上清,使之感染AD293细胞得到第二代病毒,如此反复感染AD293细胞3—4轮,使病毒大量扩增。梯度稀释法测定病毒滴度后,分别以感染复数（MOI）为1、5、10的病毒量感染靶细胞PC-3,荧光显微镜观察细胞中GFP表达,并利用RT＋PCR和蛋白质印迹技术分别从mRNA和蛋白水平检测目的基因的转录与表达情况。结果：经限制性内切酶检测、GFP表达和病毒上清液PCR证实成功构建了携带Vpr基因的重组腺病毒,滴度为3．0×10^8efu／ml。以MOI为5的重组腺病毒感染24h后,80％以上的靶细胞能够表达GFP,RT—PCR和蛋白质印迹能够同时检测到目的基因Vpr的转录与表达。结论：成功构建含Vpr基因重组腺病毒,并且病毒能够有效感染PC-3细胞,使得目的基因在其中获得大量表达,为进一步研究Vpr蛋白对PC-3肿瘤细胞的影响及其可能涉及的信号通路奠定了基础。     

树突状细胞瘤苗对老年非小细胞肺癌自体癌细胞的杀伤作用

目的研究老年非小细胞肺癌（NSCLC）患者的树突状细胞（dendritic cell,DC）瘤苗对细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokines-induced killers,CIK）的促生长作用,及CIK在体外对患者自身肿瘤细胞的杀伤作用。方法提取老年NSCLC患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）,分别培养成DC与CIK;将患者自身的肿瘤组织分离,培养出肿瘤细胞,制备肿瘤细胞冻融物作为抗原,用于负载DC,制备成Ag-DC,同时以单纯DC作为对照,各组DC经OK-432激活后,流式细胞仪检测DC表面分子的表达;将DC与CIK共培养,制备成DC-CIK、Ag-DC-CIK,同时以单纯CIK作为对照,四氮唑盐（MTT）法测定各组CIK对自身肿瘤细胞的杀伤力。结果负载肿瘤细胞冻融抗原的Ag-DC其表面CD1a、CD80、CD86、CD83、人类主要组织相容性抗原（HLA-DR）的表达上调,明显高于未负载肿瘤抗原的DC（P〈0.05）。各组DC与CIK共培养后,Ag-DC-CIK的增殖速度明显加快,其中CD3＋CD56＋细胞的含量增加,对自身肿瘤细胞的杀伤力亦明显加强,其作用均强于其他各组DC-CIK及CIK（P〈0.05）。结论老年NSCLC患者PBMC来源的DC在负载自身肿瘤细胞冻融抗原后,可分化为成熟DC,该DC可促进CIK的增殖,提高CIK对自身肿瘤细胞的杀伤力。     

螺旋CT低剂量扫描联合血清p16基因甲基化检测进行肺癌筛查的可行性研究

目的:探讨在无症状的肺癌高危人群中,利用低剂量CT(low-radiation-dose spiral CT,LDCT)联合血清p16基因甲基化检测进行肺癌早期诊断的可行性.方法:523名受检者被随机分为2组.LDCT-p16组262名,进行LDCT联合血清p16基因甲基化检测;胸部X射线组261名,接受后前位胸部X射线检查.受检者入组标准包括:男,年龄55～75岁;吸烟指数≥20包/年,目前仍在吸烟或戒烟≤10年.结果:LDCT-p16组与胸部X射线组分别有96.6%(253/262)和93.5%(244/261)的受检者完成了检查.LDCT-p16组中10.7%(27/253)患者可疑为肺癌,胸部X射线组中为6.6%(16/244).其中LDCT-p16组中有4名,胸部X射线组中有1名确诊为肺癌.结论:低剂量CT联合血清p16基因甲基化检测是一种敏感、安全与可行的筛查早期肺癌的方法,能够取代胸部X射线筛查早期肺癌.     

stathmin基因的表达与长春瑞滨治疗非小细胞肺癌疗效关系

背景与目的: 化疗是晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的主要治疗手段,但是NSCLC常对化疗耐药,导致治疗失败.因此,针对不同分子生物学特点的NSCLC进行化疗疗效预测,成为提高疗效的重要方法.本研究通过研究晚期NSCLC患者肿瘤组织中Stathmin基因的表达与患者对长春碱类药物的化疗敏感性的关系,为患者选择适当的药物治疗提供依据.方法:2005年5月-2007年12月,共78例晚期NSCLC患者入组,随机分ANP方案[长春瑞滨(NVB)联合顺铂(DDP)或卡铂(CBP)]化疗组或GP方案[吉西他滨(GEM)联合DDP或CBP]化疗组,观察两组对化疗的反应;同时以RT-PCR法检测患者病理组织中Stathmin mRNA的表达,以Western印迹法检测Stathmin的蛋白含量.结果: NP组41N,GP组37例,两组患者的性别、年龄、病理类型及肿瘤分期等临床特点无显著性差异(P>0.05),对化疗总的有效率分别为46.3%(19/41)和48.6%(18/37),两者之间亦未见显著差异(P>0.05);在NP组内,有效19例,无效22例,有效患者的肿瘤组织中stathmin mRNA测量值为1.9±1.1,而无效患者为7.5±2.8,两者之间差异有显著性(P=0.003).有效患者的Stathmin蛋白测量值为1.5±0.7.无效组为4.3±1.6,两者之间差异有显著性(P=0.002).GP组18例有效,19例无效,有效与无效患者肿瘤组织中stathmin mRNA及Stathmin蛋白无明显差异(P>0.05). 结论: NSCLC患者肿瘤组织中stathmin基因的表达与患者对长春碱药物的敏感性有关,stathmin基因高表达,对长春碱药物的敏感性低,宜换用其他药物治疗.     

吉非替尼治疗老年晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的 探讨表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼治疗老年晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及不良反应. 方法 选择46例≥65岁老年晚期NSCLC患者,吉非替尼250 mg,口服,每日1次,服用至病情进展(PD)或出现不可耐受的不良反应.患者在治疗后每月进行复查. 结果 本组46例均可评价疗效,其中部分缓解(PR)12例(26.09%)、稳定(SD)20例(43.48%)、PD 14例(30.43%).疾病控制率(PR+SD)为69.57%.中位疾病进展时间(TTP)为3.8月,1年生存率为28.26%,肿瘤相关症状改善率为63.33%.常见不良反应为皮疹和腹泻,大部分为Ⅰ、Ⅱ度. 结论 吉非替尼单药治疗老年晚期NSCLC疗效明确,不良反应相对较小,患者耐受性好.     

老年肿瘤病人腋静脉植入式静脉输液港的临床应用研究

目的探讨老年肿瘤化疗病人使用一切口无隧道经腋静脉穿刺完全植入式静脉输液港(TIVAP)技术的可行性及安全性。方法回顾性分析20例2018年1～12月在南京医科大学附属老年医院和南京医科大学附属肿瘤医院采用腋静脉穿刺一切口TIVAP老年肿瘤病人的临床资料(腋静脉组)。另选取同期20例采用右侧颈内静脉穿刺TIVAP的病人为颈内静脉组。分析2组病人的手术成功率、手术时间、术中情况、术后远期并发症及带港生存时间。结果腋静脉组植入TIVAP的成功率为100%,颈内静脉组为95%。腋静脉组的手术时间显著短于颈内静脉组[(22±3)min比(35±4)min,P005]。2组穿刺次数≤2次者的例数及术中动脉损伤、导管走形异常、术后伤口渗血、术后气胸发生率比较,差异无统计学意义(P005)。2组远期并发症发生率及带港生存时间比较,差异无统计学意义(P005)。结论经腋静脉穿刺一切口无隧道植入TIVAP成功率高,节省时间,病人舒适度佳,可作为老年肿瘤病人临床输液港植入的一个重要选择。     

薏苡仁油注射液联合培美曲塞一线治疗老年晚期非小细胞肺癌的疗效分析

目的 比较单药一线培美曲塞联合或不联合薏苡仁油注射液治疗老年晚期非小细胞肺癌( NSCLC)患者的疗效和不良反应. 方法 老年晚期NSCLC患者共47例,随机分为治疗组和对照组.治疗组24例,培美曲塞500 mg/m2,第1天静脉滴注,每3～4周为1周期;同时给予薏苡仁油注射液10 g,第1天至第15天静脉滴注;对照组23例,单药培美曲塞化疗. 结果 治疗组和对照组有效率(RR)分别为41.6％、39.1％,肿瘤控制率(TGCR)分别为70.8％、69.6％,差异无统计学意义(P＞0.05).2组患者对不良反应均可耐受,治疗组耐受性及生存质量均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 老年晚期NSCLC患者可从单药一线培美曲塞中获益;培美曲塞联合薏苡仁油注射液可减轻化疗相关不良反应,改善患者生存质量.     

艾迪注射液对晚期老年非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响

目的：探讨晚期老年非小细胞肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的数量变化,并探讨艾迪注射液对于其CD4＋CD25＋调节性T细胞的影响。方法：采用流式细胞术检测肺癌患者艾迪治疗前后外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞的数量,并与非艾迪治疗组肺癌患者相比较,同时设非肿瘤患者为空白对照。结果：肺癌患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞的数量明显高于非肿瘤患者（P〈0.01）,艾迪注射液治疗后肺癌患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞的数量可明显下降（P〈0.01）。结论：艾迪注射液能降低老年非小细胞肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的数量,可能对改善其细胞免疫状态有较好的作用。