CCN1对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的:研究细胞外基质蛋白CCN1(cysteine-rich protein 61,Cyr61)在小鼠的缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)损伤中的表达变化和作用?方法:建立小鼠70%肝脏IR模型?肝脏缺血60 min后再灌注,于不同时间点通过qRT-PCR和Western blot检测CCN1的mRNA和蛋白表达水平?部分实验中,在IR前给予小鼠尾静脉注射CCN1重组蛋白或生理盐水,通过转氨酶和病理学检测,比较两组小鼠肝脏IR损伤情况;收集肝脏组织,用qRT-PCR检测炎症因子的表达水平?结果:与sham组相比,肝缺血60 min再灌注3?6?18 h后CCN1的表达明显升高;注射CCN1蛋白的小鼠肝IR 6 h后,与生理盐水组相比,血清丙氨酸氨基转移酶?天门冬氨酸氨基转移酶水平升高,病理改变更严重?注射CCN1小鼠的肝组织中白介素-6?CXCL-10的表达水平也显著升高?结论:CCN1在小鼠肝IR损伤中表达显著增加,并可能通过诱导炎症因子的表达对IR损伤起促进作用?     

短期生酮饮食对小鼠代谢的影响

目的:探讨短期生酮饮食对小鼠能量代谢的影响?方法:将Balb/c 小鼠随机分成2组,分别给予普通饮食或生酮饮食4 d,每天称量体重并检测血糖变化?在第4天,取血检测甘油三酯(TG)?总胆固醇(TC)?游离脂肪酸(FFA)?丙氨酸氨基转移酶(ALT)?天门冬氨酸氨基转移酶(AST)?β-羟丁酸(β-HB)水平;称量肝脏重量,测定肝脏中TG?胆固醇以及糖原含量;real-time PCR检测肝脏组织中代谢相关基因的表达水平;制作肝脏HE染色切片,显微镜下观察肝脏病理学改变?结果:短期生酮饮食使小鼠体重明显减轻,血糖明显下降,血TC?β-HB?FFA高于普通饮食小鼠?生酮饮食小鼠肝重/体重比增加,肝组织中的TG增多,糖原减少?real-time PCR显示生酮饮食组小鼠脂肪酸氧化?氧化磷酸化以及酮体生成相关基因增加?显微镜下可见生酮饮食小鼠肝脏脂质蓄积明显增加?结论:生酮饮食可快速促进小鼠脂肪酸氧化和酮体生成?与长期生酮饮食不同的是,短期生酮饮食引起血TC显著增加和脂质合成基因FAS表达增多,而对肝脏无明显损伤作用?     

重组腺病毒对小鼠肝脏能量代谢的影响

目的:探讨重组腺病毒感染小鼠肝脏后,对肝脏的能量代谢和氧化应激水平的影响?方法:将Balb/c小鼠随机分为正常组及重组腺病毒感染组,通过小鼠尾静脉注射含编码绿色荧光蛋白(GFP)外源基因的重组腺病毒,利用荧光显微镜观察GFP在肝脏的表达水平;检测血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)?天门冬氨酸氨基转移酶(AST)?葡萄糖?胆固醇?甘油三酯?β-羟丁酸(β-HB)?成纤维细胞生长因子(FGF-21)?丙二醛(MDA)等水平;测定肝脏糖原含量;检测肝脏组织中参与糖异生?脂质合成?脂肪酸氧化等基因的表达水平?结果:重组腺病毒主要在小鼠肝脏表达,并于注射后第5天表达最高?与对照组小鼠比较,重组腺病毒感染小鼠的血浆中ALT?AST明显升高,β-HB和FGF-21呈升高趋势?Real-time PCR检测发现,重组腺病毒感染小鼠的肝脏组织中,参与糖异生及脂质合成的基因mRNA水平明显降低,而脂肪酸氧化相关基因的mRNA水平明显升高?此外,重组腺病毒感染后,小鼠血浆MDA及肝脏中氧自由基产生基因的表达水平明显增高?结论:小鼠肝脏在感染重组腺病毒后,糖异生及脂质合成能力下降,而脂肪酸氧化增强?这种能量代谢的改变可能与重组腺病毒感染引起的氧化应激有关?