肺结核患者血清IL-17A和IL-17F检测及临床意义

目的研究肺结核（PTB）患者血清IL-17A和IL-17F含量并分析其临床意义。方法ELISA检测47例PTB患者和26名健康志愿者外周血血清IL-17A和IL-17F含量,并分析其相关性。结果PTB患者血清IL-17A含量显著高于健康志愿者。PTB患者和健康志愿者两组之间血清IL-17F含量无显著性差异。常规化疗药物治疗前PTB患者血清IL-17A含量显著高于治疗后。痰涂结核菌反应阳性PTB患者血清IL-17A和IL-17F含量显著高于阴性PTB患者。PTB患者血清IL-17A含量与患者性别、年龄均无关。血清IL-17F含量与患者治疗情况、患者性别及年龄均无明显相关。Pearson相关性分析显示,血清IL-17A和IL-17F含量之间无显著相关性。结论IL-17A和IL-17F均在抗结核免疫过程中发挥重要作用。     

白细胞介素17A和白细胞介素23在肺结核合并糖尿病患者外周血中的表达及意义

目的：探讨肺结核合并糖尿病(PPTDM)患者外周血血清白细胞介素17A(IL-17A)和白细胞介素23(IL-23)含量并分析其临床意义。方法 ELISA检测30例PPTDM 患者、30例肺结核(PTB)患者、30例糖尿病(DM)患者和26例健康志愿者(HV)外周血血清IL-17A和IL-23含量,并分析其相关性。结果 PPTDM组血清IL-17A均显著高于PTB组、DM组和HV组,而血清IL-23含量均显著低于PTB组、DM组和HV组(P<0.05)。 PTB组血清IL-17A含量均显著高于DM组和HV组,而血清IL-23含量均显著低于DM组和HV组(P<0.05)。 DM组和HV组血清IL-17A和IL-23含量差异均无统计学意义(P>0.05)。不同临床起病形式PPTDM患者中血清IL-17A和IL-23含量存在差异,DM-PTB组血清IL-17A含量显著高于PTB-DM组,而血清IL-23含量显著低于PTB-DM组(P<0.05)。 PPTDM患者组血清IL-17A含量和IL-23含量无明显相关性(P>0.05)。结论 IL-17A和IL-23在PPTDM疾病进展中可能具有重要的作用。     

GLP-1与糖尿病基因治疗

胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是由肠道L细胞分泌的一种肽类激素, 综合的降糖作用使它在治疗糖尿病方面具有巨大的潜力.但由于二肽酰基肽酶Ⅳ(DPP Ⅳ)的降解,GLP-1血浆半寿期仅有几分钟,重复多次的给药方式降低了患者的依从性从而限制了它的临床应用.而基因治疗以抵抗DPP Ⅳ的GLP-1突变基因为基础,通过载体介导,旨在体内达到持续高效表达和延长半寿期的双重疗效.这一方法已成为目前关注的焦点.文章介绍了GLP-1分泌及降解,着重阐述近年来GLP-1在糖尿病基因治疗方面所取得的成果及存在的问题.     

结核菌及其耐药性不同检测方法的临床应用评价

目的 对目前临床上用于检测结核分枝杆菌(MTB)及其耐药性的传统及分子生物学方法进行系统评价,为设计合理的诊断路径提供指导意义.方法 对标准菌株(H37 Rv)、敏感、单耐及耐多药MTB进行梯度浓度稀释后,作为评估的实验样本,从检测结果的准确性、检测周期、最低检出限方面对不同方法进行评价.结果MTB检测方面,XpertMTB/RIF检测MTB的检出下限(3×102cfu)与培养法相当,比基因芯片和GenoType(R)MTB-DRplus的检出下限低;耐药性检测方面,在MTB含量不足(≤3×102 cfu)的情况下XpertMTB/RIF对利福平(RFP)的检测存在假阳性结果,GenoType(R)MTBDRplus检测3×104cfu链霉素耐药MTB时出现RFP和异烟肼(INH)耐药的假阳性结果;检测周期方面,XpertMTB/RIF在2 h内可完成报告,基因芯片和GenoType(R)MTBDRplus在当天8 h内可完成报告,培养及比例法药敏需4~8周可报告结果.结论 目前不同的MTB及耐药检测方法各有优缺点,在临床应用方面应综合考虑患者的病情、经济状况等选取合理的诊断路径.     

2010年至2012年东莞地区支原体感染及耐药情况分析

目的 了解东莞地区2010年至2012年非淋菌性尿道炎（NGU）患者中支原体感染情况及其耐药性分析,为临床合理用药提供依据.方法 利用支原体培养、鉴定、药敏一体化试剂盒,对1590例NGU患者的尿道（宫颈）分泌物进行解脲脲原体（Uu）和人型支原体（Mh）培养鉴定及药敏检测.结果 1590名患者中,支原体培养阳性496例,阳性率为31.1％.其中2010年阳性率为25.9％,2011年阳性率为32.6％,2012年阳性率为37.6％.12种抗生素中,Uu和Mh对美满霉素、强力霉素,交沙霉素和四环素仍保持高敏感性,但对其他多种抗生素产生了不同程度的耐药性.结论 NGU患者中支原体感染率呈逐年增高趋势,且支原体已对多种抗生素产生耐药性,因此,对NGU患者必须加强支原体培养和药敏试验,以指导临床用药.     

H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定

目的获取H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白的多克隆抗血清,制备NS1蛋白的多克隆抗体。方法利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白GST-NS1,采用Glutathione-sepharose 4B亲和层析纯化融合蛋白。纯化的GST-NS1蛋白以不同剂量皮下注射免疫BALB/c小鼠,收集抗血清,采用Protein A-sepharose和CNBr-sepharose 4B亲和层析从抗血清中纯化抗NS1蛋白的多克隆抗体。Western blot和免疫荧光法鉴定多克隆抗体的特异性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗体的效价。结果 SDS-PAGE结果表明,融合蛋白GST-NS1以可溶形式表达,诱导4 h的表达量占细菌可溶性蛋白的32.6%,融合蛋白的纯度达到90%以上。Western blot分析显示,亲和层析制备的多克隆抗体对NS1蛋白具有高度特异性。ELISA结果表明,皮下注射25、50、100μg GST-NS1融合蛋白的BALB/c小鼠血清光密度D(450)值均明显增高(P<0.01),其滴度达到1∶3 200。免疫荧光观察到病毒感染的A549细胞中,有内源性NS1蛋白的表达。结论成功地从抗血清中制备出NS1蛋白的多克隆抗体,制备的抗体具有高度特异性。     

肺结核合并糖尿病患者外周血辅助性T 细胞17和白细胞介素-17A 检测及临床意义

目的研究肺结核合并糖尿病（PPTDM）患者外周血辅助性 T 细胞17（TH17）亚群及血清白细胞介素（IL）-17A 含量并分析其临床意义。方法收集肺结核合并糖尿病患者（PPTDM）、肺结核患者（PTB）及糖尿病（DM）患者、健康志愿者（HV）各30例,其中 PPTDM患者又分为先患肺结核后患糖尿病（PTB －DM）和先患糖尿病后患肺结核（DM－PTB）患者两组,各15例。流式细胞术检测 Th17细胞亚群,酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血清 IL-17A 含量,并分析其相关性。结果PPTDM组 Th17细胞亚群和血清 IL-17A 含量均显著高于 PTB 组、DM组和 HV 组（P ＜0．05）。DM-PTB 组 Th17细胞亚群和血清 IL-17A 含量均显著高于 PTB-DM组（P ＜0．05）。PTB 组、DM组和 HV 组之间 Th17细胞亚群含量差异无统计学意义（P ＞0．05）。PTB 组血清 IL-17A 含量显著高于 DM组和 HV 组（P ＜0．01）。DM组和 HV 组之间血清 IL-17A 含量差异无统计学意义（P ＞0．05）。PPTDM患者 Th17细胞亚群与血清中 IL-17A 呈正相关（P ＜0．05）。结论Th17细胞亚群和IL-17A在 PPTDM疾病进展中可能具有重要的作用。