抗人血管内皮生长因子（VEGF）单克隆抗体重链可变区基 …

克隆并分析人血管内皮生长因子单克隆抗体重链可变区基因。方法从分泌抗人ＶＥＧＦ单抗的杂交瘤细胞株中提取总ＲＮＡ,利用逆转录－ＰＣＲ方法,克隆抗人ＶＥＧＦ单克隆抗体重链可变区基因,将其重组ｐＥＧＭ＾Ｒ－ＴＶｅｃｔｏｒ测序载体测序。     

Fas相关死亡域蛋白在增生性瘢痕组织中原位表达及意义

目的探讨Fas相关死亡域蛋白(FADD)在增生性瘢痕(HS)各个时期的表达变化以及与HS演变的关系。方法采用原位杂交与图像分析系统相结合的方法,定量观察FADD在HS各个时期的表达变化。结果FADD在HS成熟期的表达量是增殖期的2倍,是消退期的5倍;FADD阳性信号主要见于表皮棘层、真皮网状层,以及部分血管。结论FADD表达与增生性瘢痕演变密切相关。     

抗人血管内皮生长因子单克隆抗体抑癌作用的形态学观察及作用机制探讨

目的 :研究抗人血管内皮生长因子 (VEGF)单抗E1 1 抑制颊癌组织的形态学改变 ,并探讨E1 1 抑癌效应的机制。方法 :接种人颊鳞癌的BALB c裸小鼠分别通过腹腔或瘤周皮下注射抗人VEGF单抗或生理盐水。接种后第 18天处死 ,取颊癌组织进行光镜及透射电镜观察。结果 :E1 1 组颊癌组织中血管分布稀少、存在囊性变坏死区及癌细胞坏死、凋亡等。此外还有血管内皮细胞变性、凋亡及血管壁受破坏、管腔变窄和堵塞等血管系统的异常改变。而生理盐水组癌组织血管丰富 ,颊癌组织结构完整。结论 :抗人VEGF单抗是通过抑制颊癌的血管生成而产生抑癌效应     

人血管内皮生长因子合成肽的设计与合成

预测血管内皮生长因子连续性表位,利用ＶＥＧＦ合成肽制备抗ＶＥＧＦ合成肽单克隆抗体。方法根据ＶＥＧＦ１８９氨基酸序列,采用抗原指数方案及Ｇｏｌｄｋｅｙ软件,预测ＶＥＧＦ表位,确定合成肽序列,在４３０Ａ固相自动肽合成仪上合成。结果ＶＥＧＦ氨基端１－２６残基被确定为合成肽序列并合成。     

抗人血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体重链可变区基因的克隆和序列分析

目的：克隆并分析人血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）单克隆抗体重链可变区基因。方法：从分泌抗人ＶＥＧＦ单抗的杂交瘤细胞株（Ｅｌ）中提取总ＲＮＡ,利用逆转录－ＰＣＲ方法,克隆抗人ＶＥＧＦ单克隆抗体（ＭＡＢ）重链可变区基因（ＶＨ）,将其重组入ｐＥＧＭＲ－ＴＶｅｃｔｏｒ测序载体测序。结果：ＶＨ基因序列全长３６９个碱基对,编码１２３个氨基酸,通过国际联机检索及Ｋａｂａｔ库扫描证实,该ＶＨ基因符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征,同源性最高达８７％。结论：ＶＨ基因全长３６９ｂｐ,根据Ｋａｂａｔ分类,归属小鼠重链可变区基因第Ⅱ（Ａ）亚组,由ＶＨ－Ｄ－ＪＨ４重排产生。     

紫外光诱导的细胞凋亡与神经酰胺的相关性

神经酰胺（ceramide)是一种脂质信号分子，它调节细胞分化，增殖和凋亡，神经酰胺不仅参与TNF，Fas等细胞因子对细胞的多样性刺激，而且介导紫外光等环境应激因子所诱导的细胞凋亡，本介绍了神经酰胺代谢，神经酰胺介导紫外光诱导的凋亡信号途径及其调控机制。     

抗人血管内皮生长因子单克隆抗体对荷人颊癌裸鼠血清中血管内皮生长因子水平的影响

目的　定量测定抗人血管内皮生长因子(VEGF)单抗E11组、生理盐水组荷人颊癌裸鼠血清中VEGF含量并进行比较,以观察E11对体内可溶性VEGF水平的影响。方法　接种人颊鳞癌的BALB/c裸小鼠分别通过腹腔或瘤周皮下注射E11或生理盐水。接种后第18天处死,收集裸鼠血清,采用改进的间接ELISA法定量测定VEGF含量。结果　E11组裸鼠血清中VEGF含量均显著低于生理盐水组,其中E11瘤周皮下组VEGF水平最低,仅(1·17± 0·13)μg/L。结论　抗人VEGF单抗是通过中和VEGF而阻断其发挥促肿瘤血管生成的作用,从而产生抑瘤效应。荷人颊癌裸鼠血清中VEGF的水平与其荷瘤的瘤重呈正相关关系,提示恶性肿瘤患者血清中的VEGF是新的肿瘤标志物。     

抗人VEGF单链抗体基因的克隆及突变校正

目的:回复基因克隆过程中的异常点突变,重新表达抗人血管内皮生长因子(VEGF)单链抗体基因(V11),恢复其抗原结合能力.方法:通过逆转录及多聚酶链式反应(RT-PCR),扩增抗人VEGF单克隆抗体(E11)的可变区基因片段,构建表达载体pET-15b(含E-tag).将V11轻、重链可变区基因序列(V11L、V11H)与其所属亚组共同序列和一致序列进行联配比较,发现异常氨基酸并分析其性质,确定异常突变点.PCR定点回复突变,重新表达单链抗体基因(V11m), ELISA检测表达产物与VEGF165的结合.结果:V11存在四个异常突变点:V11L第7、23、36位,V11H第113位.回复突变后的表达产物与VEGF165的结合能力显著提高.结论:利用抗体残基位置序列保守性及氨基酸侧链性质分析,可以推定并有助于回复异常点突变,该方法简便易行.获得的抗人VEGF单链抗体对恶性肿瘤的诊治具有潜在的应用价值.     

He-Ne激光重复照射抑制培养增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的实验研究

Hypertrophicscar（HS），atypeoffibrosisdiseaseofskinwhichischaracterizedbyhyperproductionanddepositionofcolla－genmatrix．So，inhibitionofcollagensynthesisanddepositionofcollageninfibroblastsareimportantforpreventionofHS犤１犦．Inthecurrentstudy，He－NelaserofvariouspowerdensitywasusedtoirradiateculturedfibroblastsderivedfromHStostudythepre－ventingeffectsofHe－NelaseronHS．１Materialsandmethod１．１Cellcultureandgrouping５casesofHSwereincludedinthisstudyaged１２～３１yearsold（２males，…