B超与X线检查对病毒性肝炎门脉高压对照研究

Ｂ超与Ｘ线检查对病毒性肝炎门脉高压对照研究河北省保定市传染病医院邓吉顺，巩荣芬，耿建华，杨红宇，王宝珍邮政编码０７１０００本文报道了我院应用Ｂ超与Ｘ线检查，对经过临床确诊的１６９例慢性活动性肝炎及肝炎后肝硬化患者进行了对照观察。男１２１例，女４８例，...     

伊马替尼耐药CML患者ABL基因激酶区突变检测

目的 研究伊马替尼(imatinib,IM)治疗慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)耐药患者ABL酪氨酸激酶区突变情况.方法 用巢式PCR扩增对IM治疗耐药的56例CML患者骨髓样本ABL基因激酶区序列,通过测序和序列同源性检索分析ABL激酶区突变情况.结果 56例患者检出突变1...     

骨髓间充质干细胞治疗实验性肺动脉高压后肺组织结构的变化

目的： 探讨骨髓间充质干细胞(MMSCs）移植治疗肺动脉高压(PAH)后肺组织超微结构的变化。方法: 取SD大鼠的骨髓,经贴壁筛选法体外培养并纯化MMSCs,用Hoechst 33342荧光染料标记。实验动物随机分为3组: MMSCs移植治疗组（M组）、肺动脉高压模型组 (H组)和正常对照组 (C组)。M组采用野百合碱(50 mg·kg-1) 注射复制PAH模型成功后3周经舌下静脉移植5×109 cells/L MMSCs细胞悬液1 mL;H组复制PAH模型后3周移植 1 mL L-DMEM细胞培养液,C组在同时间注射等量L-DMEM液。饲养4周,观察各组动物一般情况、生存率、右心室收缩压、右心指数及肺小动脉的微观结构和超微结构的改变。结果: 实验动物移植MMSCs后,生存状况明显改善,食欲及活动增加,毛色顺滑、光亮,动物存活率为100％;而模型组动物活动明显减少、食欲下降,消瘦,体重下降或不增,在1月内相继死亡,死亡率为100％。各项指标检测结果显示,MMSCs移植组（M组）大鼠较单纯肺动脉高压组 (H组)右心室收缩压明显降低［移植组为(32.20±2.32)mmHg,而模型组为(48.30±1.56)mmHg,两者相比差异显著,P<0.05］,右心指数下降［移植组为(38.80±3.24)%,模型组为(45.10±3.43)%, 二者相比差异显著,P<0.05］,肺小动脉的重建和超微结构的血气屏障、线粒体、板层小体等改变均有明显改善,其结果接近正常对照组。结论: MMSCs移植后可通过形成新生血管建立侧枝循环,有效减轻野百合碱诱导的肺动脉高压和肺组织病变程度。     

抗重组人bFGF单克隆抗体可变区基因克隆及单链抗体的构建和表达

目的：从分泌抗重组人碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）单克隆抗体（mAb）杂交瘤细胞株B2F3中克隆抗体可变区（V）基因，构建bFGF单链抗体（scFv），并进行可溶性表达。方法：从分泌bFGF mAb杂交瘤细胞株B2F3提取总RNA，用RT-PCR方法扩增抗体重链可变区基因（VH）和轻链的可变区基因（VL）；再通过重叠延伸拼接（SOE）PCR方法，在VH和VL基因之间引入linker（Gly4Ser）3，构建bFGF scFv。将测序正确的scFv基因克隆到表达载体pCANTAB 5E中，选择非抑制型菌株E.coli HB2151进行可溶性表达；经SDS—PAGE检测抗体表达水平，ELISA鉴定其抗原结合活性。结果：测序分析结果显示，VH基因序列全长375碱基对，编码125个氨基酸，VL基因序列全长399碱基对，编码133个氨基酸，二者均符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征，含有4个框架区（FR）、3个抗原互补决定区（CDR）及抗体特征性的2个半胱氨酸残基；构建的scFv全长789碱基对，编码263个氨基酸，连接结构为VH-linker-VL。SDS-PAGE分析表明scFv基因在大肠杆菌为可溶性表达，表达产物主要位于周质腔中，表达产物的Mr为27000，与理论预期值相符；间接ELISA检测结果显示原核表达的scFv具有与bFGF特异性结合的活性。结论：成功地克隆bFGF mAb可变区基因，并构建表达bFGF scFv，为下一步研究bFGF抗体人源化改造奠定实验基础。     

人工合成VEGF表位模拟7肽的生物学功能研究

目的: 检测人工合成血管内皮细胞生长因子(VEGF)表位模拟 7肽特异抑制VEGF促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长的活性。方法: 通过噬菌体展示技术, 筛选获得了表达模拟肽的阳性噬菌体克隆, 经测序得到VEGF表位模拟肽序列: GWYYDAX。人工合成该短肽, 用体外细胞培养的方法检测其对HUVEC的生长抑制作用。结果: 表位模拟肽GWYYDAX可剂量依赖性抑制VEGF促进HUVEC生长的活性。结论: VEGF表位模拟肽可能模拟了VEGF的部分结构, 竞争结合HUVEC细胞VEGF受体 (KDR), 阻断了VEGF VEGFR的信号传递而抑制细胞生长, 具有潜在的应用前景。     

突出“趣味”教学理念的实验动物学课程教学改革

根据《实验动物学》教学现状,围绕着“趣味”这一教学理念对本校开设的《趣味实验动物学》本科选修课教学进行了一系列的教学改革与探讨,以期在本科生的认知中初步构建实验动物学的知识框架,夯实实验动物学的理论基础,更多调动学生对实验动物学的兴趣,提高学习主动性,加强医学科研思维的训练,为以后的教学实践提供指导.     

妊娠犬板蓝根过敏一例报道

妊娠犬板蓝根过敏一例报道杨萍，杨红宇（贵阳医学院实验动物中心）犬对板蓝根过敏尚未见报道，我们在１９９３年８月治疗犬病时，曾遇到一例，现报道如下。哈巴犬种，雌性，１．５岁，体重６．８ｋｇ，妊娠３５天，因感冒就诊。查体：精神沉郁，反应迟钝，眼睛半闭，结膜...     

河虾主要过敏组分的分离、纯化、鉴定及其致敏性分析

目的:鉴定河虾中的过敏原组分,对主要过敏原组分进行纯化并分析其致敏性强弱。方法:用磷酸盐缓冲液(PBS)制备河虾蛋白粗提液,将其与11例虾过敏症患者血清IgE进行Westernblot,鉴定各种分子量的河虾过敏原组分;河虾蛋白粗提液用硫酸铵沉淀、G-50凝胶层析和阴离子交换层析等方法纯化其主要过敏原组分,再用虾过敏患者血清IgE进行Westernblot鉴定;并将纯化的相对分子质量(Mr)为21000、36000、800003种主要过敏原组分与虾过敏症患者血清IgE做间接ELISA,以分析其致敏性强弱。结果:West-ernblot结果显示,河虾蛋白粗提液出现9个阳性条带;其中3种主要过敏原组分21000、36000、80000与患者血清的反应率为36.4%,63.6%,45.5%;将这3种Mr的蛋白组分分别做间接ELISA,结果显示21000、36000、80000过敏原组分与11例虾过敏症患者的混合血清IgE结合的吸光值都显著高于河虾蛋白粗提液。结论:河虾中至少存在9个过敏原组分;21000、36000、8000等3种蛋白组分为河虾的主要过敏原组分,其中以36000过敏原组分致敏率和致敏性最强。进一步研究将探明21000、36000、80000等3种河虾过敏原组分的共同抗原表位,以期为明确食物过敏原检测、临床诊断和虾过敏原疫苗设计提供基础。     

碱性成纤维细胞生长因子与肿瘤

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作为一种细胞丝裂原和促血管生成因子,在许多肿瘤的生长中起着重要的作用.许多实验研究提示肿瘤组织或患者体液中的bFGF水平能作为诊断或判断预后的指标.目前,阻止bFGF产生及抑制其生物学活性的发挥,作为一种有效的抗肿瘤策略已得到广泛的发展,具有良好的应用前景.     

噬菌体展示技术筛选bFGF抗原表位

目的：以抗—bFGF单克隆抗体GF22为目标，用噬菌体随机七肽库进行筛选。经三轮筛选后的噬菌体阳性克隆能特异地抑制bFGF与CF22结合。测序结果表明与CF22结合的序列高度保守，为LP(P／L)GH(F／1)K，LPPGHFK与bFGF分子(155氨基酸)上22—27位氨基酸一致，表明该序列在bFGF上是一个主要的抗原表位。用此序列的阳性噬菌体克隆免疫小鼠，发现此序列模拟肽能诱导抗bFGF抗体反应，且序列LPLGHIK诱导的抗体反应比IPPGHFK序列强三倍，序列IPLGHIK可能作为一种有价值的肽疫苗诱导抗bFGF抗体的产生。