大鼠骨髓来源树突状细胞外泌体的提取及功能研究

目的:探讨在不同成熟状态下树突状细胞(dendritic cell,DC)分泌的外泌体(exosomes,Dex)的制备、提取及体外功能鉴定。方法:F344大鼠骨髓来源DC培养6后分为2组,一组为未成熟树突状细胞组(immature DC,imDC):直接收集上清;一组为成熟树突状细胞组(mature DC,mDC):每孔加入终浓度为1μg/ml的LPS培养48h后,收集上清。然后用多步离心法分离得到Dex,流式细胞术检测两组Dex的表型,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测两组Dex与Wistar大鼠骨髓来源的imDC共培养上清的白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素12(IL-12p70)的含量,混合淋巴细胞实验(MLR)检测共培养DCs刺激T细胞增殖能力。结果:与mDC分泌的exosomes相比,imDC分泌的exosomes表面中度表达MHC-Ⅱ类分子、低表达CD80、CD86、CD40共刺激分子,而且与Wistar大鼠骨髓来源的imDC共培养后刺激IL-12p70分泌能力较低(P<0.05),刺激T淋巴细胞增殖的能力也较mDC分泌的exosomes组弱(P<0.05)。结论:不同成熟状态下的DC分泌...     

骨髓来源半成熟树突状细胞诱导大鼠小肠移植免疫耐受

Objective To study MyD88 silent semi-mature DC (simDC) inducing immune tolerance in rat small bowel transplantation model. Methods All rats were randomly divided into three groups (n=6). Seven days before transplantation of intestine from F344 donors, Wistar recipient rats were injected with simDC (group A) , imDC (group B) and saline ( group C) through the penile dorsal vein respectively.Small bowel transplantation was performed and the survival time of recipients was observed. Serum IL-2 and IFN-γ levels were assayed. Results The survival time of recipients in group A was ( 13.7±1.2) days, which was significantly longer than that in groups B [(8.0±1.0) days,P<0. 05] and C [(6. 0±0. 8) days P<0. 05]. The serum levels of IL-2 and IFN-γ in group A were lower than in groups B and C (P<0. 05). Conclusion Depending on the unique phenotypic and functional features of sem-DC,they can induce the transplantation tolerance and prolong the survival of intestinal allografts after transplantatin.     

超声引导技术在术中冷冻消融治疗局部进展期胰腺癌中的应用

目的评估超声引导技术在局部进展期胰腺癌术中冷冻消融治疗中应用的可行性和安全性。方法回顾性分析我院胰腺中心接受超声引导的术中冷冻消融治疗局部进展期胰腺癌患者38例,收集一般临床资料、观察术中冷冻消融的超声表现以及记录不同布针方案中冷冻冰球大小,并观察术后并发症,评估超声引导技术在胰腺癌术中冷冻消融中的有效性和安全性。结果所有患者均安全完成手术,单针方案和双针方案冷冻消融时冰球最大直径分别为(3.17±0.57)cm和(4.50±1.39)cm。围手术期内无患者死亡,术后发生胰瘘(POPF)9例(23.7%),主要为A级生化漏7例,B级瘘仅2例;发生腹腔出血(PPH)1例(2.63%);发生胃排空障碍(DGE)7例(18.4%)。术后3个月复查CT按RECIST标准达到部分缓解(PR)的17例(44.74%),肿瘤稳定(SD)的20例(52.6%),肿瘤进展(PD)1例(2.63%),所有患者均观察到病灶部位均匀密度的坏死区域。结论超声引导的术中冷冻消融治疗局部进展期胰腺癌具有准确、适形、安全等特点,为临床不可手术切除的胰腺癌治疗提供了新的技术手段,值得推广。     

实验室内分泌项目测量不确定度的评定研究

目的 采用“自上而下”的方法评定内分泌试验检验项目的测量不确定度。方法 采用CNAS-CL01-G003: 2021《医学实验室—测量不确定度的评定与表达》技术报告中的“自上而下”的方法，收集实验室的室内质控数据和2019—2021年北京市临床检验中心的室间质评结果，评定游离三碘甲状腺原氨酸（free triiodothyronine，FT3）、总三碘甲状腺原氨酸（total triiodothyronine，TT3）和游离甲状腺素（free thyroxine，FT4）等11项内分泌试验检测指标的测量不确定度。结果 11项内分泌试验检测项目在低浓度水平时的相对扩展不确定度分别为FT3：12.658%、TT3：13.372%、FT4：10.468%、总甲状腺素（total thyroxine，TT4）：32.382%、促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）：8.594%、雌二醇（estradiol，E2）：18.656%、卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，FSH）：14.650%、促黄体生成素（luteinizing hormone，LH）：29.384%、孕酮（progesterone，PRO）：28.806%、催乳素（prolactin，PRL）：13.810%、睾酮（testosterone，TESTO）：31.610%；在正常浓度水平时的相对扩展不确定度分别为FT3：12.424%、TT3：12.462%、FT4：8.606%、TT4：14.130%、TSH：12.536%、E2：19.586%、FSH：14.382%、LH：23.400%、PRO：38.346%、PRL：16.014%、TESTO：39.352%；在高浓度水平时的相对扩展不确定度分别为FT3：13.882%、TT3：14.096%、FT4：11.040%、TT4：8.614%、TSH：7.782%、E2：14.366%、FSH：13.436%、LH：14.804%、PRO：11.574%、PRL：17.742%、TESTO：39.322%。TT4、LH在低浓度水平附近时、PRO在低浓度和正常浓度水平附近时、TESTO在3种浓度水平附近时的相对扩展测量不确定度高于目标不确定度（25%），其余项目均小于目标不确定度。结论 利用实验室的质控数据，可评定美国雅培i2000SR全自动化学发光免疫分析仪对FT3、TT3、FT4等11个内分泌检测项目的测量不确定度，具有一定的临床应用价值。     

内蒙古地区医学类与其他专业在校本科生“慕课”学习现状的调查与比较分析

目的以内蒙古地区高校在校大学生为主要调查对象,调查分析医学类与其他专业在校本科生的慕课学习现状。方法选取内蒙古自治区在校大学生为调查对象,采用线上和线下发放网络调查问卷的方法进行调查,然后分析比较医学类本科生和其他专业本科生的慕课学习现状。结果内蒙古地区医学本科生的慕课了解率和使用率偏低(均不足40%)而且明显低于其他专业本科生,同时慕课学习的活跃度医学本科生也明显低于其他专业本科生;医学本科生更注重慕课学习时间灵活性、名师授课和课程免费三个因素,而其他专业本科生则更注重课程免费和教学方式新颖两个方面;参与慕课学习的目的医学本科生和其他专业本科生差异不大,主要都是以扩展专业知识、完成作业、兴趣爱好和提高成绩为主;对于目前可获取的慕课课程来说,大多数学生认为存在着种类少、自律性差、互动少和收费等缺点;另外,半数以上的被调查者都认为慕课是传统课堂的补充和辅助工具并都希望慕课提供更好的服务,医学本科生更多的希望共享国内外优秀慕课而其他专业本科生更期待高校在建设慕课中选择本校的名师或最优秀的课程。结论及建议调查结果显示内蒙地区医学类在校本科生对慕课的了解和使用率偏低,而且相对于其他专业来说对于慕课课程有着独特的需求。建议内蒙地区医学类高校应开展慕课普及工作并结合自身特点引进精品慕课资源,更好的实现"互联网+"的现代教学模式。     

骨髓来源半成熟树突状细胞诱导大鼠小肠移植免疫耐受

目的 观察髓样分化因子88(MyD88)沉默的半成熟树突状细胞(DC)诱导大鼠小肠移植模型免疫耐受.方法 供体乃44大鼠,受体Wistar大鼠.随机分为3组(n=6).A组(半成熟DC组)移植前7d经阴茎背静脉注射半成熟MyD88沉默DC(2×106细胞数),B组(未成熟DC组)移植前7 d经阴茎背静脉注射未成熟DC(2×106细胞数)和C组(阴性对照组)移植前7 d经阴茎背静脉注射1 ml生理盐水.3组均于注射7 d后行大鼠异位节段性小肠移植术,观察统计各组受体存活情况,检测受体血清中的促炎症因子白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ等的变化.结果 半成熟MyD88沉默DC组[(13.7±1.2)d,n=6]较未成熟DC组[(8.0±1.0)d,n=6,P<0.05]和阴性对照组[(6.0±0.8)d,n=6,P<0.05)存活时间显著延长,同时受体血清中IL-2和IFN-γ等促炎症因子的表达明显降低(P<0.05),病理改变亦较轻微.结论 MyD88沉默的半成熟DC具有独特的表形和功能,能够诱导受体产生特异性免疫耐受,显著延长受体术后的存活时间.     

显微镜结肠炎39例临床病理学分析

目的：探讨显微镜结肠炎(microscopic colitis,MC)的临床病理学特点、诊断及鉴别诊断。方法：对39例MC的临床特点、组织形态学、免疫组织化学及Masson染色结果进行分析,并复习相关文献。结果：39例MC中男性18例,女性21例,年龄25~74岁,中位年龄50岁。所有患者均有慢性水样腹泻症状,结肠镜检查正常,其中淋巴细胞性结肠炎(lymphocytic colitis,LC)19例,胶原性结肠炎(collagenous colitis,CC)20例。显微镜下表层上皮细胞间淋巴细胞数(intraepithelial lymphocytes,IEL)为(21.5±8.6),表层上皮下胶原带宽带为(14.3±4.0)μm,与对照组相比差异均有显著性(P<0.01)。结论：MC是老年患者慢性水样腹泻较常见的一种病因,诊断依赖于临床病史、结肠镜及病理组织学检查。     

Semi-Mature Myd88-Silenced Bone Marrow Dentritic Cells Prolong The Allograft Survival In A Rat Model Of Intestinal Transplantation

Recently, a number of reports have demonstrated that semi-mature dendritic cells (DC) may induce tolerance rather than immunity. However, little is known about the regulatory mechanism by which these DCs induce transplant tolerance. Myeloid differentiation factor 88 (MyD88) is a key adaptor of Toll-like receptor signaling, which plays a critical role in DC maturation. Activation of MyD88-silenced immature DCs results in the generation of semi-mature DCs. We explored the possibility of using these DCs to induce intestinal transplant tolerance in rats. MyD88 expression was silenced in bone marrow DCs (F344 rats) using small interfering RNAs for 24 hr, at which point, lipopolysaccharide (LPS) was added to the culture for another 48 hr. These cells were analyzed for their in vitro and in vivo tolerizing capacities. Semi-mature DCs expressing moderate levels of MHC class II and low levels of co-stimulatory molecules were found to produce interleukin (IL)-10, while interleukin (IL)-12 production was decreased. In vitro co-culture with completely allogeneic T cells from Wistar rats led to a significant decrease in alloreactive T-cell responses. In vivo, the transfer of semi-mature DCs (1×106 cells) followed by the transplantation of fully mismatched intestinal grafts (F344 rats) led to significantly prolonged survival compared to rats receiving immature and mature DCs. Serum from semi-mature DC-treated rats contained lower concentrations of the pro-inflammatory cytokines interleukin (IL)-2 and interferon-γ （IFN-γ）5 days after transplantation. This study provides evidence that semi-mature DCs may promote inducible allograft tolerance and suggests a new strategy by which to facilitate the induction of transplant tolerance.