肺来源的不同细胞中MAGE-3基因表达情况的初步研究

目的 分析人肺来源的不同细胞中MAGE-3基因在mRNA水平的表达情况,为肺部良恶性肿瘤的早期鉴别诊断提供研究基础.方法 将人支气管上皮细胞(HBE)、人肺成纤维细胞(HFLF)、原代培养的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)及人肺腺癌细胞LTEP-a-2同步化培养后,加完全培养基培养24 h后,同步提取各组细胞细胞总RNA,运用实时定量PCR方法分析各细胞中MAGE-3基因在mRNA水平的表达情况.结果 在人肺来源的不同细胞中,正常肺部来源的HBE、HFLF和HPASMC细胞中MAGE-3基因在mRNA的表达水平极低,而人肺腺癌细胞LTEP-a-2中表达丰度明显升高;肺癌细胞中MAGE-3基因在mRNA的表达水平明显高于正常细胞表达水平,差异倍数在20倍以上.结论 肺癌细胞LTEP-a-2中MAGE-3基因mRNA表达水平明显高于肺部正常细胞,可探讨其作为鉴别肺部良恶性病变诊断的恶性病变早期检测指标.     

应用动态血压监测评估氨氯地平、培哚普利治疗高血压效果分析

目的观察氨氯地平、培哚普利治疗高血压的效果扣安全性。方法选取42例高血压患者给予氨氟地平、培哚普利联合治疗,通过24h动态血压监测评估治疗4周后患者治疗效果。结果治疗4周后患者收缩压、舒张压均低于治疗前,差异均有统计学意义（P〈0．05）。治疗4周后患者24h、白昼、夜间的收缩压和舒张压均低于治疗前,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论氨氯地平、培哚普利可以有效地降低血压水平,减轻血压负荷。     

外周血宏基因组二代测序在肺炎中的应用价值

目的 评估外周血宏基因组二代测序(mNGS)技术在肺炎患者中微生物检测方面的应用价值。方法 使用回顾性分析的方法，收集常州市第二人民医院收治的28例使用外周血mNGS技术进行病原学检测的肺炎患者，并与常规微生物学检测(CMT)方法进行比较。结果 在这28例患者中，重症肺炎有19例，非重症肺炎有9例。mNGS对微生物的检出率(78.6%,22/28)与CMT(64.3%,18/28)相比差异无统计学意义(P=0.338)。mNGS对病毒的检出率高于CMT(P=0.004),但是在检出细菌(P=0.625)和真菌(P=0.118)方面无明显优势。进一步在重症肺炎患者的亚组分析中得到了同样的结果。经过综合评估，7例患者通过mNGS确诊病原体，分别为耶氏肺孢子菌(PJ)2例，PJ合并巨细胞病毒(CMV)2例，鹦鹉热衣原体2例和腺病毒1例。结论 尽管血mNGS对病原微生物的检出率并不优于CMT,但是当病毒、PJ或鹦鹉热衣原体感染时，可以考虑使用血mNGS进行病原学诊断。     

淡色库蚊β-肌动蛋白基因克隆与序列分析

目的　获取淡色库蚊 β-肌动蛋白全长基因。　方法　采用 RACE法筛选淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系 c DNA表达文库 ,获得 β-肌动蛋白基因的 5′和 3′RACE序列 ,然后通过 T/ A克隆插入 p GEM- T质粒载体 ,经过测序、拼接获取全长序列。用 BL ASTp软件将该基因推导的氨基酸序列与蛋白质公共数据库 Swissprot比对、分析。　结果　获得淡色库蚊 β-肌动蛋白基因全长序列 ,总长度为 12 90 bp,开放阅读框为 1132 bp,编码 377个氨基酸 (Gen Bank/ NCBIAY10 0 0 0 5 )。推导的氨基酸序列与公共数据库比对 ,发现与冈比亚按蚊和黑腹果蝇的 β-肌动蛋白的同源性均为 91%。蛋白质的理论分子质量为 4 1.7ku,等电点 (PI)为 5 .4。　结论　获得了淡色库蚊 β-肌动蛋白基因全长序列 ,为蚊虫分子生物学的进一步研究奠定了基础。     

胶原蛋白Ⅵ在肿瘤中的作用研究进展

胶原蛋白Ⅵ是一种细胞外基质蛋白,在多种肿瘤中高度表达,且与临床不良预后相关。胶原蛋 白Ⅵ参与肿瘤的转移与肿瘤的血管重塑,并且通过募集巨噬细胞促进肿瘤炎症。胶原蛋白Ⅵ通过与细胞外基 质其他组分相互作用、刺激信号传导及促进肿瘤代谢重编程,有利于肿瘤的生长。通过肿瘤坏死因子β 途径 减弱肿瘤对程序性死亡[ 蛋白]-1 抑制剂的反应或上调程序性死亡[ 蛋白] 配体-1/ 程序性死亡[ 蛋白]-1, 参与肿瘤的免疫逃逸。此外,胶原蛋白Ⅵ可以促进化疗耐药,这些发现均表明胶原蛋白Ⅵ在肿瘤进展中的重 要作用,为癌症的诊断生物学标志物和癌症治疗靶点的研究提供另一条途径。     

2 394例肺腺癌患者EGFR及ALK驱动基因分析

目的：通过分析2 394例肺腺癌患者表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）及间变性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase,ALK）驱动基因,了解肺腺癌患者EGFR及ALK驱动基因的特征。方法：收集2014年1月—2019年4月2 394例南京医科大学第一附属医院确诊并行EGFR及ALK检测的肺腺癌患者,分析其EGFR、ALK驱动基因特点,探讨EGFR/ALK状态与肺腺癌亚型的相关性。结果：59.7%（1 429/2 394）肺腺癌患者存在EGFR突变,高于全国平均水平（51.8%）、东南亚地区（51.4%）;其中90%以上为常见突变,21L858R突变率（48.01%）最高,19Del突变率（43.32%）次之;约10%为非经典突变,包括18G719X、20ins及21L861Q等。ALK重排发生率为4.4%,低于全国平均水平（6.0%）,以EML4?ALK融合最常见。不同类型标本EGFR突变率有差异,组织标本、细胞学标本及外周血标本的EGFR突变率分别为60.60%、51.20%及46.48%;肿瘤原发灶组织学标本中,手术切除、经皮肺穿刺及支气管镜活检的EGFR突变率分别为64.50%、59.25%及45.45%。EGFR突变更易表达在附壁状腺癌（79.7%）、乳头状腺癌（74.9%）及腺泡状腺癌（74.4%）中,较少见于实体状（58.9%）及浸润性黏液腺癌（28.9%）;与其他亚型相比,实体状腺癌（8.6%）及浸润性黏液腺癌（13.3%）ALK重排发生率更高。结论：本研究EGFR突变率较高,21L858R和19Del最常见。手术切除标本EGFR突变率最高,且EGFR突变、ALK融合均与肺腺癌亚型有关。     

淡色库蚊抗药性相关基因NYD-Ch和NYD-Tr的表达与初步鉴定

目的　淡色库蚊抗药性相关基因NYD Ch(糜蛋白酶 )和NYD Tr(胰蛋白酶 )表达与鉴定。　方法　以淡色库蚊抗性品系全长cDNA文库为模板 ,采用PCR方法扩增出抗性品系中高表达的NYD Ch和NYD Tr基因 ,经T/A克隆测序鉴定 ,将扩增产物用NotI、EcoRI双酶切后作为插入片段 ,与具有相同粘性末端的融合表达质粒 pET 2 8a(+ )连接 ,转化入表达菌株E .coliBL2 1中 ,取含重组表达质粒的重组菌株以IPTG进行诱导表达 ,表达产物以SDS PAGE电泳和小鼠抗NYD Ch和NYD Tr抗血清进行Westernblot分析鉴定。　结果　NYD Ch和NYD Tr基因开读框大小分别为816bp和 786bp ,预计可分别编码 2 72个和 2 62个氨基酸。对应分子质量大小分别为 2 9.4ku和 2 8ku ,加上pET 2 8a(+ )载体融合部分氨基酸 ,表达产物条带应在 3 3ku附近 ,与SDS PAGE蛋白电泳胶上蛋白条带一致。Westernblot分析确认诱导后的 pET 2 8a(+ ) /NYD Ch和 pET 2 8a(+ ) /NYD Tr在分子质量约 3 3ku处出现 1条与小鼠抗NYD Ch和NYD Tr抗血清特异反应的条带。　结论　NYD Ch和NYD Tr基因在大肠杆菌中获得表达 ,Westernblot分析表明该蛋白为目的蛋白。     

淡色库蚊β-肌动蛋白基因克隆与序列分析

目的 获取淡色库蚊β-肌动蛋白全长基因。方法 采用RACE法筛选淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系cDNA表达文库，获得β-肌动蛋白基因的5′和3′RACE序列，然后通过T／A克隆插入pGEM-T质粒载体，经过测序、拼接获取全长序列。用BLASTp软件将该基因推导的氨基酸序列与蛋白质公共数据库Swissprot比对、分析。结果获得淡色库蚊β-肌动蛋白基因全长序列，总长度为1290bp，开放阅读框为1132bp，编码377个氨基酸(GenBank／NCBIAYl00005)。推导的氨基酸序列与公共数据库比对，发现与冈比亚按蚊和黑腹果蝇的β-肌动蛋白的同源性均为91％。蛋白质的理论分子质量为41．7ku，等电点(PI)为5．4。结论 获得了淡色库蚊β-肌动蛋白基因全长序列，为蚊虫分子生物学的进一步研究奠定了基础。     

无创正压通气在高龄急性左心衰竭患者治疗中的应用

目的探讨无创正压通气（NIPSV）在高龄急性左心衰患者治疗中的临床应用价值。方法收集40例高龄急性左心衰病人,分成无创正压通气组及常规治疗组,无创正压通气组采用常规药物治疗＋无创正压通气,常规治疗组采用常规药物治疗,对两组治疗前、治疗2h和24h后症状、肺部哕音、血气及两组治疗前、治疗24h后超声心功能、BNP等指标进行对照分析。结果无创正压通气组在短时间内各项指标得到改善,明显优于常规治疗组。结论应用NIPPV治疗急性左心衰能快速改善氧合及呼吸困难,并改善心功能,值得在临床推广使用。