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1.
目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对大鼠雪旺细胞(RSC-96)增殖和凋亡的影响及其机制。方法(1)体外培养RSC-96细胞(大鼠源性雪旺细胞系),细胞培养24 h后用AGEs处理RSC-96细胞造模;(2)细胞增殖实验:细胞培养24 h后,用0、100、250、500、1000μg/mL浓度的AGEs处理细胞24 h、48 h、72 h,之后用CCK-8试剂盒检测各组细胞在450 nm处的吸光值;(3)Caspase-3活性测定:细胞培养24 h后,用0、100、500μg/mL浓度AGEs处理细胞48 h,用Caspase-3活性检测试剂盒检测各组细胞在405 nm处的吸光值;(4)细胞凋亡检测:AGEs处理细胞72 h后进行TUNEL染色,显微镜下观察染色阳性细胞数;(5)蛋白表达检测:AGEs处理细胞72 h后,用Western Blot法检测细胞的p-Akt、Akt、p-GSK3β、GSK3β、Bcl-2、BAD、CHOP、GRP78蛋白表达水平。结果(1)各浓度AGEs组细胞的活力(培养72 h时)明显降低,Caspase-3活性明显增强,凋亡指数明显增高(均P<0.05);(2)AGEs组细胞的p-Akt、p-GSK3β、Bcl-2和GRP78蛋白表达水平降低,BAD、CHOP蛋白表达水平升高。结论AGEs能抑制大鼠雪旺细胞的增殖;并通过增强Caspase-3活性,抑制Akt的激活,增强内质网应激导致细胞的凋亡。  相似文献   
2.
目的:探究间充质同源盒蛋白(Meox2)对乳腺癌细胞增殖能力及其机制的影响。方法:体外培养人乳腺癌细胞株MCF-7,腺病毒转染调高细胞Meox2基因的表达,常规无额外基因序列添加的人乳腺癌细胞株MCF-7细胞设为Control组,含有Meox2基因的腺病毒(Ad-Meox2)转染细胞后设为Ad-Meox2组,以空载体Ad-GFP转染细胞后设为Ad-GFP组。荧光显微镜观察其转染率。采用MTT法和流式细胞仪分别验证过表达的Meox2对乳腺癌细胞在24、48、72 h后细胞的增殖及周期的变化。采用Western blot检测细胞中Meox2及其下游PI3K/AKT通路蛋白的表达。结果:腺病毒转染的MCF-7细胞中Meox2基因表达上调,转染率为95%以上。MTT显示,Ad-Meox2组可明显呈时间依赖性地抑制细胞增殖(P0.05)。流式细胞仪检测显示Ad-Meox2组可显著阻滞细胞周期的进行,使更多的细胞停滞于S期与G2/M期(P0.05),同时,阻滞细胞进入下一个周期,即G0/G1期(P0.05)。Western blot显示各组的MCF-7细胞中PI3K和AKT含量无明显变化(P0.05),但Ad-Meox2组的p-PI3K和p-AKT蛋白含量较Control组明显下降(P0.05)。结论:Meox2基因可通过PI3K/AKT信号通路抑制乳腺癌细胞周期的进程,进而抑制乳腺癌细胞的增殖能力,提示Meox2可能是乳腺癌新的治疗靶点。  相似文献   
3.
4.
目的:比较人乳腺癌及癌旁组织中糖酵解的水平差异,并探讨磷酸果糖激酶1的表达对糖酵解水平的影响。方法:采集3种不同临床分期共33对人乳腺癌及癌旁组织。酶法分析组织中乳酸含量、乳酸脱氢酶活力、己糖激酶活力、磷酸果糖激酶-1活力和丙酮酸激酶活力,用来反映糖酵解的水平;采用Western blot技术检测组织中磷酸果糖激酶-1的表达。结果:癌组织的糖酵解水平和磷酸果糖激酶1表达量均高于癌旁组织,而且,晚期癌组织的糖酵解和磷酸果糖激酶1表达量水平高于早期乳腺癌组织。结论:在人乳腺癌的发生发展过程中,糖酵解水平的增加可能与磷酸果糖激酶1的表达量增加有关。  相似文献   
5.
目的优选复方氨敏Vc胶囊中挥发油的研磨法包合工艺。方法以包封率、挥发油利用率为考察指标,采用L9(34)正交实验设计优选出研磨法制备氨敏VC胶囊挥发油包合物的工艺条件。结果优选包合工艺条件为:β-CD:油质量体积比为10∶1投料,β-CD:水的质量体积比为1∶20制备包合5 min。结论验证实验表明优选出的包合工艺简单合理可行。  相似文献   
6.
目的优选复方氨敏Vc胶囊中挥发油的超声包合工艺。方法以包封率、收率和载药量为评价指标,采用L9(34)正交实验设计优选挥发油的包合工艺。结果优选包合工艺条件为:β-环糊精与挥发油按8∶1(g∶mL)配比,包合时间35min,超声频率59kHz,超声温度为55℃。结论验证实验表明优选出的包合工艺简单、合理、可行。  相似文献   
7.
目的:研究归肾经方对阿霉素(adriamycin,ADR)诱导的肾小球足细胞损伤标志蛋白nephrin及自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、p-mTOR等表达的影响。 方法:以ADR体外诱导的方法制作足细胞损伤的细胞模型。除空白组外均以ADR诱导足细胞,分为5组:空白组(control group,10%空白血清)、模型组(model group,10%空白血清+ADR 0.5 μg·mL-1)、中药高剂量组(H-TCM group,10%高剂量归肾经方含药血清+ADR 0.5 μg·mL-1)、中药低剂量组(L-TCM group,10%低剂量归肾经方含药血清+ADR 0.5 μg·mL-1)、替米沙坦组(TMST group,10%替米沙坦含药血清+ADR 0.5 μg·mL-1)。CCK-8检测各组细胞活性改变,Western blot法检测各组足细胞标志蛋白nephrin、desmin及自噬相关蛋白beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ等表达。 结果:①与空白组比较,模型组细胞活力显著降低(P<0.01),与模型组比较,中药高剂量组及替米沙坦组细胞活性显著增高(P<0.05);②Western blot检测结果显示,与control组比较,model组nephrin显著降低(P<0.01),desmin、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、p-Akt、p-mTOR显著增高(P<0.01);与Model组比较,H-TCM组及TMST组nehprin表达显著增高(P<0.05),desmin表达显著降低(P<0.05),H-TCM、L-TCM及TMST组Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、p-Akt、p-mTOR表达显著降低(P<0.01);与H-TCM组比较,L-TCM组LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著增高(P<0.05)。结论:归肾经方可以修复ADR诱导的足细胞损伤,改善细胞内的自噬水平,与上调细胞内nephrin、Beclin-1、p-Akt、p-mTOR的表达有关。  相似文献   
8.
目的:比较3种补肾方对卵巢摘除骨质疏松大鼠Wnt通路β-Catenin mRNA表达的影响。方法:雌性SD大鼠70只,随机分为假手术组、模型组、龟鹿二仙胶组、二仙汤组、补肾活血组、雌二醇组、仙灵骨葆组,每组10只。双侧卵巢摘除术复制骨质疏松模型,术后30天进行相应的给药实验,假手术组和模型组给予灌服等量的生理盐水。12周后测定各组大鼠血清中I型胶原羧基端肽(β-Crosslaps)、I型前胶原氨基端延长肽(P1NP)含量;以双能X线骨密度测定仪测定大鼠股骨的骨密度;用RT-PCR检测右侧股骨髓LRP5、Wnt2、β-Catenin mRNA表达,用Western blot方法检测LRP5、Wnt2、β-Catenin蛋白表达。结果:与sham组比较,模型组股骨骨密度、血液PINP浓度、β-Catenin mRNA、LRP5 mRNA、Wnt2 mRNA表达均显著降低(P<0.01),β-Crosslaps 浓度显著增高(P<0.01)。与模型组比较,3组中药组骨密度、血液PINP浓度、LRP5 mRNA、β-Catenin mRNA、Wnt2 mRNA及蛋白表达显著增高(P<0.05),血液β-Crosslaps浓度显著降低(P<0.01),补肾活血组骨密度及β-Catenin mRNA及蛋白表达高于其他两补肾方剂组。结论:补肾方通过Wnt信号通路促进去卵巢大鼠成骨细胞增殖而改善骨质疏松症,补肾活血组方效果更为明显。  相似文献   
9.
10.
1病例资料患者,女,45岁。因低热伴头晕1周,加重1d,左耳流脓1d入院。患者1周前无明显诱因出现发热,T 37.5℃,觉头晕,无明显头痛,无恶心、呕吐、耳痛及耳鸣。在当地医院门诊输液(阿莫西林)6d,头晕无明显好转,发热停止。近1天觉头晕明  相似文献   
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