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目的构建TDO2基因敲除的C57BL/6小鼠,初步研究其表型。方法根据CRISPR/Cas9技术原理,设计并体外转录sgRNA,用显微注射法将Cas9、sgRNA同时注射到小鼠的受精卵。经胚胎移植,获得可能出现多种基因型并存的F0代小鼠。利用PCR法进行基因型判定,获得阳性F0代小鼠。由阳性F0代小鼠与野生型小鼠回交得到F1代杂合子小鼠。阳性F1代杂合子小鼠之间配繁,得到F2代纯合子小鼠。观察和分析纯合子小鼠的生长特性,繁殖能力和子代存活率。Western blot验证TDO2基因敲除纯合子小鼠肝脏组织中TDO2的蛋白表达。结果成功繁育和鉴定出TDO2基因敲除小鼠,PCR法成功鉴别了子代鼠的基因型;Western blot结果表明,TDO2基因敲除小鼠的肝脏组织中TDO2蛋白不表达。TDO2基因敲除小鼠饮食、体质量等未发现异常改变。结论成功建立TDO2基因敲除小鼠,为研究TDO2基因的生物学功能和在疾病中的调控作用提供实验手段。 相似文献
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目的:快速有效地评估肺癌治疗效果。方法:采用肺部CT灌注图像的半自动分割方法和计算机辅助诊断方法对肺癌血管靶向治疗效果进行评估。首先读入肺部DICOM格式的CT灌注图像,然后采用改进的距离规则化水平集分割方法(modified distance regularized level set,MDRLS)对肺部肿瘤进行分割,将分割得到的区域逐层映射到其他CT灌注参数图像上,通过选取合适的阈值,分割出肿瘤的血管丰富区域,再分别计算肿瘤和内部血管丰富区域的体积。采用5例患者治疗前后的CT灌注参数图像,通过计算豪斯多夫距离,分析图像分割的效果;通过比较治疗前后肿瘤和血管丰富区域的体积,评估肺癌血管靶向治疗效果。结果:采用MDRLS可以得到较好的图像分割结果,疗效评估结果也与临床病理数据相吻合。结论:该研究提出的MDRLS方法有望对肺癌血管靶向治疗效果进行有效地评估,从而为肺癌的临床治疗提供重要参考。 相似文献
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目的 探究芳香烃受体(AhR)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)增殖和软骨分化能力的影响.方法 用AhR-homo-1432 inhibitor和AhR-homo-1432 inhibitor阴性对照转染hUC-MSCs,设为si-AhR组和si-NC组.在转染hUC-MSCs后的第1、3、5、7天,CCK-8法测定细胞活力;软骨分化诱导培养hUC-MSCs 7 d,实时荧光定量PCR和Western blot检测软骨分化标志物SOX-9和COL2A1 mRNA和蛋白的表达;阿利新蓝染色检测蛋白聚糖的表达.结果 与si-NC组比较,si-AhR组AhR的mRNA和蛋白水平表达降低,表明转染成功.CCK-8实验结果显示,与si-NC组比较,转染后的第5天和第7天si-AhR组hUC-MSCs活力增强.经软骨分化诱导培养后,与si-NC组比较,si-AhR组hUC-MSCs的SOX-9和COL2A1 mRNA和蛋白表达升高;阿利新蓝染色结果显示,si-AhR组hUC-MSCs表达的蛋白聚糖含量较si-NC组增多,染色更深,软骨分化能力增强.结论 抑制AhR表达可促进hUC-MSCs的增殖和软骨分化. 相似文献