贴壁和缩短胰酶消化时间培养大鼠骨髓间充质干细胞☆

背景：对于骨髓间充质干细胞的分离纯化、培养扩增目前已有几种方法，各自均有不同的优劣性。 目的：观察贴壁法和缩短胰酶消化时间的方法体外分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞的特点。 方法：培养初期频繁换液，去除混杂细胞；传代后加入不同诱导剂定向诱导分化，使之分别向脂肪细胞，成骨细胞和软骨细胞方向分化。 结果与结论：该分离培养方法在第3代可以得到纯化的骨髓间充质干细胞。分离培养的细胞纯度高，有良好的增殖和分化潜能。定向诱导培养的细胞能向成脂细胞、成骨细胞和成软骨细胞方向分化。     

974例健康男性桡骨超声速率的研究

目的探讨贵阳市区健康男性人群桡骨超声速率(SOS)的变化趋势,建立定量超声(QUS)诊断男性骨质疏松(OP)的参考数据库。方法采用横断面调查的方法,对974例健康男性,用sunlight omnisense 7000TM型超声骨密度仪测量其左侧桡骨远端的SOS。结果按每10岁划分年龄段,男性胫骨SOS的峰值出现在40-49岁年龄组,为(4090．7±102．5)m／s,在峰值出现之前SOS随增龄而增加,之后SOS随增龄而降低。桡骨SOS的多元线性回归方程为:[SOS= 2438．385-0．44643×年龄 9．74308×身高-3．95423×体重 9．9781×体重指数,(R2=0．638,P<0．05)]。男性桡骨SOS随年龄变化曲线的三次方程为[SOS=0．0023(年龄)3-0．4858(年龄)2 30．179(年龄) 3499．2,(R2=0．13,P< 0．05)]。结论贵阳市区不同年龄健康男性胫骨s0S随年龄变化而变化,桡骨SOS的测定能为男性OP的诊断提供一定的依据。     

细化年龄分组在人群峰值骨量和骨质疏松症诊断中的价值

目的比较不同年龄段分组人群峰值骨量（PBM）和骨质疏松症（OP）患病率的差异，使之能够更加准确合理的指导临床工作。方法采用以色列Myriad公司生产的Sunlight omnisense7000^TM型超声骨量测定仪测量2208例女性左侧桡骨远端的超声速率（SOS），比较分别按照每10岁、5岁、2岁、1岁为一个年龄段分组情况下各自的PBM和OP患病率的差异。结果按照10岁或5岁为一个年龄段分组时PBM分别显著低于2岁和1岁为一个年龄段分组（P〈0．05），按照不同PBM筛查的OP患病率亦有显著性差异（P〈0．05）。结论细化年龄分组可以提高OP诊断率。     

2型糖尿病患者胫骨超声速率的改变及部分相关生化指标的研究

测定272例2型糖尿病患者及908例年龄、性别、体重指数与之相匹配的娃康对照者胫骨超声速率；并随机从上述人群中抽取2型糖尿病患者66例和缝康对照者64例，测定其血清甲状旁腺激素（PTH）、降钙素（CT）、骨钙素（BGP）水平。结果①男性2型糖尿病患者胫骨SOS与健康对照组相比差异无显著性（P〉0．05）；②女性2型糖尿病病患者胫骨SOS普遍高于对照组。但只有70～79岁年龄组差异有显著性（P〈0．05）；③2型糖尿病患者血清阻H、CT与对照组相比差异无显著性（P〉0．05）；④女性2型糖尿病患者血清BGP水平低于女性对照组（P〈0．05），而男性与对照组差异无显著性（P〉0．05）。结论2型糖尿病患者胫骨SOS和骨代谢状态的改变可能与性别有关，男性患者改变不明显；女性患者胫骨SOS高于对照组，且随着年龄的增长差异日益显著；与同性别对照组比较，女性2型糖尿病患者骨代谢状态表现为低骨转换率。     

初诊2型糖尿病患者铁代谢与胰岛β细胞功能的关系

采用酶联免疫吸附法检测初诊2型糖尿病患者（T2DM组）及健康对照组血清胰岛素（FINS）、铁蛋白（FT）、转铁蛋白（TRF）水平，生化法检测空腹血葡萄糖（FPC）、血清铁（Fe）、总铁结合力（TIBC）、血脂水平。结果与对照组比较，T2DM组FPG、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）及FT升高，胰岛素分泌指数（HOMA-IS）及β细胞功能指数（HOMA-β）降低（P均〈0．05）；FT与HOMA-IR及TIBC与HOMA-β均呈正相关（r=0．34、0．38，P均〈0．05）。提示铁超载可能通过增加胰岛素抵抗、降低胰岛β细胞功能而引发T2DM。     

诱骗受体3和谷氨酸脱羧酶65重组腺病毒对糖尿病小鼠的作用研究

构建诱骗受体3(DcR3)和谷氨酸脱羧酶65( GAD65)重组腺病毒载体,转染树突状细胞,干预1型糖尿病小鼠,观察小鼠体内CD+8T细胞的活化抑制情况和血糖水平.结果显示转染重组腺病毒的树突状细胞能有效抑制GAD65特异性T细胞的增殖和细胞因子的分泌,γ-干扰素[(50.5±7.2)对(95.4±6.9)、(91.2±6.5)pg/ml]和白细胞介素2[(46.3±5.1)对(86.1±5.2)、(80.3±7.3) pg/ml]低于阴性和空白对照组(均P＜0.05),同时延缓1型糖尿病的发生.提示DcR3和GAD65重组腺病毒可用于1型糖尿病的基因治疗.     

初诊2型糖尿病患者铁负荷的临床研究

目的 探讨初诊2型糖尿病患者铁负荷的变化.方法 初诊2型糖尿病患者30例及健康对照者32例,采用酶联免疫法检测血清铁蛋白(FT)、转铁蛋白(TRF)水平,采用生化法检测空腹血浆葡萄糖、血清铁(Fe)、铁总结合力(TIBC)、血脂水平.结果 2型糖尿病血清FT水平显著高于健康对照组(P<0.05),但两组问血清Fe、TIBC、TRF、TRF饱和度(TS)水平差异无显著性(P>0.05).血清FT与血糖呈显著正相关,与高密度脂蛋白呈显著负相关.结论 初诊2型糖尿病患者存在明显铁超载,但铁超载在2型糖尿病发病过程中的作用还有待于进一步研究.     

降钙素的镇痛作用及其对中脑导水管周围灰质中降钙素受体表达的影响

目的 探讨鲑鱼降钙素的镇痛作用及其对中脑导水管周围灰质(PAG)中降钙素受体表达的影响.方法 采用慢性压迫性损伤(CCI)的方法制备神经性疼痛的大鼠模型,热板实验评估热痛阈(TWL),von Frey纤丝测定机械痛阈(MNT),免疫组化法检测PAG中降钙素受体的分布,Western印迹检测降钙素受体蛋白的表达量.40只雄性SD大鼠被平均随机分配至5组:正常组、假手术组、CCI组、CCI+鲑鱼降钙素皮下注射组和CCI+鲑鱼降钙素PAG微量注射组.结果 (1)假手术组大鼠TWL、MNT及PAG中降钙素受体表达较正常组无显著性差异(P＞0.05);(2)CCI组大鼠TWL和MNT较正常组显著降低(P＜0.05),但降钙素受体表达显著高于正常组(P＜0.05);(3)鲑鱼降钙素治疗后CCI大鼠的TWL、MNT和降钙素受体的表达均显著升高(P＜0.05),且PAG注射较皮下注射效果显著(P＜0.05).结论 鲑鱼降钙素能够提高CCI大鼠的痛阈并增加PAG中降钙素受体的表达量,而且PAG注射鲑鱼降钙素较皮下注射效果明显.

Abstract：

Objective To investigate the analgesic effect of salmon calcitonin(sCT)and its effect on expression of calcitonin receptor(CT-R)in periaqueductal gray(PAG). Methods Rat models of neuropathic pain were prepared by chronic constriction injury(CCI). Thermal withdrawal latency(TWL)and mechanical nociceptive threshold(MNT)were measured using hot plate test and yon Frey monofilaments test. The distribution of CT-R in PAG was detected by immunohistochemical method. CT-R protein was quantitatively determined by western blotting. Fourty male SD rats were randomized into 5 groups: normal group, sham-CCI group, CCI group, CCI plussubcutaneous sCT group, and CCI plus microinjection of sCT into PAG group. Results TWL, MNT, andexpression of CT-R in PAG showed no difference between normal group and sham-CCI group(P＞0. 05). TWL and MNT in CCI group were significantly lower than those in normal group(P＜0.05), and expression of CT-R in CCI group was significantly higher than that in normal group(P＜0.05). TWL, MNT and expression of CT-R in CCI rats increased significantly after sCT therapy(P＜0. 05), and the effect was more marked in PAG injection group than subcutaneous injection group(P＜0.05). Conclusions sCT raises the pain threshold and increase the expression of CT-R in PAG of CCI rats, while PAG injection showed more marked effect than subcutaneous injection.     

2型糖尿病患者非酒精性脂肪肝合并症的早期检测

目的探讨多种血清肝纤维化指标与2型糖尿病（T2DM）非酒精性脂肪肝（NAFLD）合并症的相互关系。方法将80例T2DM患者分为合并NAFLD组50例和单纯T2DM组30例,并选30例健康人作为对照组。测定体质量指数（BMI）、腰围（WC）、空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2hPG）,采用ELISA法测定ALT、AST、血清层黏蛋白（LN）、透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（C-Ⅳ）、组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）。分析各指标与NAFLD合并症的相关性。结果合并NAFLD组BMI、WC、ALT、AST较单纯T2DM组升高（P〈0.05）。多元线性逐步回归分析显示,BMI、ALT、PCⅢ、TIMP-1为合并NAFLD的独立危险因素。结论BMI、WC、ALT、PCⅢ、TIMP-1联合检测可作为早期筛查T2DM患者合并NAFLD或相关性肝纤维化较好的临床指标。     

贵阳市糖尿病住院患者死亡原因分析

随着人民物质生活的改善以及人口老龄化,我国的糖尿病(DM)患病率快速上升,DM的病死率也随之增加,而DM已成为全球第5位死亡原因[1,2].近年由于DM防治知识的普及,死于DM急性并发症的患者有所减少,但死于因长期血糖控制不佳而并发的各种慢性并发症尤其是大血管并发症者却逐渐增加.为探讨贵阳市住院DM患者主要死亡原因和特点,本研究回顾并总结分析贵阳市5所综合性医院的DM患者的死亡原因,为本地区糖尿病防治提供流行病学依据.