胰腺癌Capan-2细胞与树突状细胞融合诱导特异性抗癌免疫应答的体外研究

目的观察人胰腺癌Capan-2细胞与树突状细胞(DC)融合后诱导的特异性抗肿瘤免疫反应。方法收集2013年4月-2015年3月于沈阳军区总医院消化科就诊的人类白细胞抗原(HLA)-A2~+胰腺癌患者6例,从患者外周血单个核细胞中分离并培养DC。所获DC分为3组:(1)使用聚乙二醇-二甲基亚砜诱导法,将DC与Capan-2细胞融合以负载肿瘤抗原;(2)DC与Capan-2细胞共培养;(3)单独DC培养。通过流式细胞术检测PE-MUC4/FITC-CD86抗体双标细胞评估融合率;应用四甲基偶氮唑盐法检测各组DC的存活率变化。使用干扰素(IFN)γ酶联免疫法检测DC诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)活化反应。采用51Cr标准细胞毒实验检测DC诱导的抗原特异性CTL对体外胰腺癌细胞的杀伤作用。多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果DC与Capan-2融合细胞同时表达DC表型(CD86)和MUC4分子,CD86与MUC4双阳性表达率为(38.30±7.30)%,明显高于共培养组(7.21±1.06)%;融合细胞组DC存活率呈时间依赖性下降,转染后96 h的存活率降低至62.81%,而与Capan-2细胞共培养组DC存活率稳定在80%以上,两组间差异有统计学意义(P0.05)。DC-Capan-2融合细胞诱导的CTL 24 h IFNγ释放量为(85.34±2.97)U/ml,DC、Capan-2共培养组DC诱导的IFNγ释放量为(19.07±4.25)U/ml,两转染组的差异有统计学意义(P0.05)。DC-Capan-2融合细胞诱导的特异性CTL能够有效识别和杀伤HLA-A2~+/MUC4~+的Capan-2细胞及HLAA2~+/MUC4-的PANC-1细胞,但不能有效识别和杀伤HLA-A2-/MUC4-的Mia Pa Ca-2细胞和HLA-A2-/MUC4~+的As PC-1细胞。结论胰腺癌细胞与DC融合后可诱导出显著的CTL抗肿瘤免疫反应,此过程受主要组织相容性复合体Ⅰ类抗原呈递的限制。     

大气污染对我国不同城镇化地区中老年人高血压及心脏病患病的影响

[目的]探讨大气污染对我国中老年人高血压及心脏病患病的长期影响,并分析在不同城镇化水平地区大气污染对中老年人群高血压及心脏病患病影响的差异。[方法]采用2013年中国健康与养老追踪调查数据中124个地级市17 679位受访者的基本信息及高血压、心脏病患病信息。收集2010年、2011年和2012年相应地级市大气可吸入颗粒物(PM_(10))、二氧化硫(SO_2)和二氧化氮(NO_2)的三年年均质量浓度(以下简称"浓度"),采用城镇化率来定义城镇化水平。采用广义线性混合效应模型分析不同城镇化水平地区大气污染对高血压及心脏病患病影响的差异。[结果]本研究所包含的124个地级市大气PM_(10)三年的年均浓度为80μg/m~3,SO_2为36μg/m~3,NO_2为31μg/m~3。有68.5%的城市大气PM_(10)未达到国家二级标准。城镇化水平较高地区的人群高血压和心脏病患病率(高血压:27.4%,心脏病:12.3%)高于中等(高血压:23.1%,心脏病:8.9%)和较低(高血压:19.2%,心脏病:6.9%)城镇化水平地区(P0.05)。大气PM_(10)和NO_2与城镇化率在对中老年人心脏病的患病影响中存在交互作用,其中大气污染物对较低城镇化率地区的中老年人影响最大(PM_(10):OR=2.169,95%CI:1.275~3.691;NO_2:OR=1.817,95%CI:1.100~3.000)。[结论]我国大气污染对中老年人高血压及心脏病的患病影响在不同城镇化水平地区中不同,在城镇化水平较低的地区这种影响更大。     

颅脑损伤术后感染致张力性气颅1例

1病例资料 患者男,49岁,因颅脑损伤去骨瓣减压术后1周、高热伴意识不清3d于2010年8月28日入院。患者于1周前因车祸致头部外伤,伤后意识不清,被立即送往当地医院,诊断为右颞叶脑挫裂伤并行开颅挫裂伤灶清除、去骨瓣减压术,     

紫外分光光度法对苯扎溴铵浓度的测定

用紫外分光光度法，于苯扎溴铵特征吸收峰的２５６ｎｍ波长下测定溶液中苯扎溴铵浓度。对苯扎溴铵浓度≤１６３２μｇ／ｍｌ的溶液，测定结果的相对标准偏差≤１７６％。     

早期康复对膝关节周围骨折患者术后功能恢复影响

膝关节周围骨折后创伤本身及手术对关节结构及伸膝装置的破坏，不可避免发生伸膝装置及关节腔内粘连，导致膝关节功能降碍。一般均需耍通过系统的康复治疗才能恢复良好的关节功能。为了说明早期系统康复治疗对恢复关节功能的重要性，对膝关节周围骨折术后患系统康复治疗与自行锻炼对膝关节功能恢复的影响作以回顾性总结。     

模拟骨水泥型人工关节阻塞骨髓腔远侧骨干内压力变化及复方丹参的干预

背景：骨水泥阻塞股骨近中段骨干髓腔后严重破坏了骨内和髓内的血液循环状态,可引起了一系列血流动力学变化,导致股骨远端的骨内压持续升高并长期存在。目的：观察骨水泥阻塞兔股骨近中段骨干髓腔后复方丹参对股骨远端骨内压的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-07/2008-04在重庆医科大学实验动物中心完成。材料：选用成年新西兰大白兔42只,采取兔左侧股骨髓腔内灌注聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥的方法,制作骨水泥阻塞股骨近中段骨干髓腔的动物模型。方法：按随机数字表法选出6只作为造模后即刻组。其余36只兔随机分为2组,复方丹参注射组及生理盐水注射组各18只,再根据不同观察时点分为造模后4,8,16周组,每时点6只。复方丹参注射组造模后每只兔肌肉注射复方丹参注射液2mL/d,共4周;生理盐水注射组造模后每只兔肌肉注射氯化钠生理盐水注射液2mL/d,共4周。主要观察指标：测量两组兔造模后即刻、4,8,16周实验侧骨内压。结果：造模后4,8,16周生理盐水注射组兔实验侧骨内压显著高于复方丹参注射组（P〈0.05）。生理盐水注射组兔实验侧各时点骨内压均处于骨内高压状态,造模后16周骨内压有所下降。造模后4周实验侧骨内压显著高于造模后16周（P〈0.05）,其他各时点两两比较差异无显著性意义（P〉0.05）。复方丹参注射组兔实验侧骨内压在造模后4周基本恢复正常骨内压水平,造模后8,16周继续保持正常骨内压水平不变。造模后4,8,16周实验侧骨内压均显著低于造模后即刻（P〈0.05）,造模后4,8,16周3个时点两两比较差异无显著性意义（P〉0.05）。结论：复方丹参可以有效降低骨水泥阻塞骨干髓腔后引起的骨内高压。     

早期康复对膝关节周围骨折患者术后功能恢复影响

膝关节周围骨折后创伤本身及手术对关节结构及伸膝装置的破坏,不可避免发生伸膝装置及关节腔内粘连,导致膝关节功能障碍。一般均需要通过系统的康复治疗才能恢复良好的关节功能。为了说明早期系统康复治疗对恢复关节功能的重要性,对膝关节周围骨折术后患者系统康复治疗与自行锻炼对膝关节功能恢复的影响作以回顾性总结。     

骨水泥阻塞兔骨干髓腔后远侧关节的改变

背景:临床上对骨水泥型人工关节并发症的研究已经很多,但骨水泥型人工关节植入后对远侧关节组织结构的影响仍有待进一步观察。目的:观察骨水泥阻塞兔股骨近中段骨干髓腔后远侧关节组织结构的改变。设计:对照观察。单位:广西壮族自治区人民医院。材料:选用26只健康成年新西兰大白兔,雌雄不拘,体质量2.6～3.5kg,实验动物由重庆医科大学实验动物中心提供。国产聚甲基丙烯酸甲酯TJ骨水泥、16#上颌窦穿刺针(外径1.6mm,内径1.05mm,长80mm)、日本Olympus公司光学显微镜(BH-2型,LM)、日本Hitachi公司透射电子显微镜(H-600,SEM)。方法:实验于2005-07/2006-04在重庆医科大学实验动物中心完成。随机摸球法取18只实验兔为模型组,其余8只不造模,作为对照组。模型组采用兔左侧股骨髓腔内灌注骨水泥进行造模,实验兔麻醉后,采用髋后外方入路,根据兔存在第3转子这个特殊的解剖结构,从股骨后外方肌间隙进入,在第3转子上方仅切除大转子外侧部分而不打断股骨颈,暴露转子间窝,找到骨髓腔入口,用自制的大小合适、粗细不同的髓腔锉反复扩髓后(深度为股骨长度的1/2),反复冲洗创面,冲出破坏的骨髓组织,纱布条蘸干。按粉、液比2∶1比例调配骨水泥,持续手工搅拌,待聚合至面团状态后使用,为避免骨水泥填入股骨骨髓腔后深度无法控制,首先将一小块面团状骨水泥作成髓腔大小塞状物,用器械轻轻填入髓腔内至股骨中段狭窄处,作为髓腔塞,待10min骨水泥基本固化后,再将其重新调配好呈面团状骨水泥,用器械填入股骨髓腔内,直至填满为止。待骨水泥完全固化后,缝合关闭切口,分别于术后4,8及16周取材观察,每次取6只,对照组直接取材,采用苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色、免疫组织化学检测对两组实验兔实验侧远侧关节软骨、软骨下骨和滑膜组织标本进行组织学观察,同时采用透射电镜观察左侧股骨远端关节软骨、软骨下骨标本组织学变化。主要观察指标:①苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色、免疫组织化学检测实验兔实验侧远侧关节软骨、软骨下骨和滑膜组织学观察结果。②透射电镜下左侧股骨远端关节软骨、软骨下骨标本组织学变化。结果:①苏木精-伊红染色显示模型组实验兔关节软骨、软骨下骨和关节滑膜组织损害随时间呈进行性加重,造模后16周关节软骨破坏,骨组织结构损害,滑膜组织增生、肿胀;甲苯胺蓝染色显示造模后16周实验兔关节软骨全层失染;免疫组织化学结果:造模后16周软骨细胞Ⅱ型胶原染色阳性,关节滑膜细胞及软骨细胞TGF-β1染色阳性。②透射电镜下模型组实验兔关节软骨和骨细胞损害随时间呈进行性加重,造模16周部分软骨细胞和骨细胞坏死、崩解。结论:骨水泥阻塞股骨近中段骨干髓腔后导致股骨远端血循环障碍,使股骨远端骨代谢发生紊乱,最终造成远侧关节骨、软骨和滑膜组织发生了退行性病变或坏死。     

腹泻型肠易激综合征患者外周血Th1/Th2细胞因子失衡表达的分析

目的:分析腹泻型肠易激综合征(IBS)患者外周血Th1/Th2细胞因子失衡表达。方法:连续选择近期就诊的腹泻型IBS患者27例,对照组为31例同龄、同性别的同期健康体检者。两组对象接受了外周血Th相关细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)检测,并计算IFN-γ/IL-4比值。结果:腹泻型IBS组外周血IFN-γ浓度及IFN-γ/IL-4比值均明显高于对照组,而血清IL-4浓度则显著低于后者(P均<0.05～0.01)。结论:腹泻型IBS患者存在明确Th1优势失衡表达。