大黄素对大鼠急性脊髓损伤后氧化应激和炎症反应的影响研究

研究大黄素对大鼠急性脊髓损伤后氧化应激和炎症反应的影响,探讨大黄素对急性脊髓损伤后神经元的保护机制。以Allen's法制备脊髓损伤模型。将195只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、大黄素20 mg·kg-1组(C组)、大黄素40 mg·kg-1组(D组)、大黄素80 mg·kg-1组(E组),术后3,7,14,28 d予BBB评分,斜板实验观察大鼠运动功能恢复。术后7 d,甲苯胺蓝染色观察神经元尼氏小体,电镜观察脊髓神经纤维改变;Western blot法检测Nrf2,HO-1,NQO1,GFAP,NF-κB蛋白表达;ELISA检测TNF-α,IL-1β,IL-6含量;免疫荧光检测GFAP,NG2,ED-1表达。BBB评分与斜板实验显示,术后7,14,28 d,C,D,E组较B组明显升高,差异均具有统计学意义(P0.05);术后7 d,B,C组尼氏小体开始融合,D,E组较B,C组融合明显减轻;电镜显示,B,C组脊髓神经纤维出现明显脱髓鞘改变,D,E组髓鞘变性较B,C组减轻;Nrf2,HO-1,GFAP,NF-κB蛋白表达C,D,E组与B组比较,NQO1蛋白表达D,E组与B组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。C,D,E组TNF-α,IL-6含量较B组,D,E组IL-1β含量较B组显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。C,D,E组GFAP,NG2表达较B组增加,D,E组更明显;C,D,E组ED-1表达较B组显著降低。大黄素对脊髓急性损伤后神经细胞具有保护作用,其机制可能与激活Nrf2-ARE通路,降低NF-κB,ED-1,TNF-α,IL-1β,IL-6表达,促进GFAP,NG2表达有关。     

丹参酮Ⅱ_A磺酸钠促进低温保存的大鼠坐骨神经同种异体移植后神经再生

探讨丹参酮Ⅱ_A磺酸钠(tanshinoneⅡ_Asulfonate)对深低温保存大鼠坐骨神经活性以及同种异体移植后神经再生、功能恢复的保护作用及其可能的作用机制。将SPF级标准雄性SD大鼠坐骨神经片段15 mm,分别在含有不同浓度丹参酮Ⅱ_A磺酸钠(A 0 mg·L~(-1),B 80 mg·L~(-1),C 160 mg·L~(-1),D 480 mg·L~(-1))中低温(-80℃)保存24周,另设有新鲜对照组,通过电镜观察保存后神经超微结构,calcein-AM/PI荧光染色激光共聚焦显微镜观察活细胞、死细胞数量,Western blot法检测Bax,Bcl-2的蛋白表达变化;冻存后神经体外培养7 d,PCR,Western blot法检测NGF,GDNF的mRNA以及蛋白表达水平。用保存24周的SD大鼠坐骨神经,修复对应的Wistar雄性大鼠坐骨神经10 mm缺损(A',B',C',D'组),术后16周,电生理检测肌肉复合动作电位潜伏期和神经传导速度,甲苯胺蓝染色分析再生有髓神经纤维数目和髓鞘厚度,电镜观察再生神经超微结构。结果显示,大鼠坐骨神经保存24周,与A,B组相比,C,D组脱髓鞘、空泡化程度较弱,活细胞数量较多,Bax表达降低,Bcl-2表达升高;与此同时,保存24周后的坐骨神经NGF,GDNF mRNA及蛋白表达,C,D组均显著高于A,B组。同种异体移植16周后,与A',B'组相比,C',D'组再生有髓神经纤维数量较多,分布广泛、髓鞘较厚,肌肉复合动作电位潜伏期缩短,神经传导速度升高。这表明丹参酮Ⅱ_A磺酸钠对-80℃长期保存的大鼠坐骨神经具有保护作用,能维持保存后神经的生物活性,促进同种异体移植后受体神经再生,其中以中、高浓度(C,D组)效果更好。     

HIV-1外膜蛋白与 IFNα在重组鸡痘病毒中的共表达及特性分析

艾滋病(AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的一类疾病,该病已成为危害人类最严重的疾病之一,研制AIDS疫苗已成为当务之急。外膜蛋白gp12 0是由HIV 1囊膜蛋白gp16 0经蛋白酶裂解而成[1] 。它不仅与病毒进入细胞有关,同时它含有大量刺激机体产生体液免疫和细胞免疫的抗原决定簇[2 4] 。因此,它成为人们研制艾滋病疫苗的重要靶蛋白。以病毒为载体构建基因工程活载体疫苗是当前研制疫苗的一个重要途径,它不仅可以诱导体液免疫的产生,同时可引起特异性CTL ,尤其对于病毒病的预防更为有效。本研究利用鸡痘病毒中国疫苗株为载体,构建了HIV…     

高密度脂蛋白胆固醇与动脉粥样硬化——高密度脂蛋白胆固醇是“好”胆固醇?

<正>2008年《中国卫生事业发展情况统计公报》显示,心血管疾病导致的死亡人数已占全国总死亡人数的40.27%,而在心血管疾病中,50%以上是冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病,coronary atherosclerotic heart disease,CAD)及其并发症,且CAD发病率一直呈逐年上升趋势。动脉粥样硬化是CAD的主要病理基础和重要危险因素。动脉粥样硬化性疾病是一类多因素疾病,     

碟脉灵注射液对大鼠急性心肌梗塞面积及血液流变学的影响

碟灵注射液５，１０，２０ｇ／ｋｇ给大鼠大舌下静脉注射２次，对结扎左室状动脉前降支（ＬＡＤ）产生急性心肌梗塞面积，降低血清ＣＫ和ＬＤＨ活性，亦能降低全血高切粘度，全血压低切粘度，血浆粘度，红细胞面积，纤维蛋白原浓度，红细胞电泳时间，红细胞聚集指数及红细胞刚性指数。提示碟脉灵注射液既具有抗急性心肌缺血作用，又能防治急性心肌缺血时的高粘综合症。     

某部新兵风疹鉴定与疫情控制

目的分析新兵风疹疫情,为部队新兵风疹疫情的预防控制工作提供一定依据。方法采用酶联免疫吸附试验检测健康新兵、风疹病人血清IgG、IgM抗体,PCR检测风疹病人血清病毒核酸。结果风疹发病初期病人血清风疹IgM吸光度值（A）（2．190±1．260）明显高于正常对照组（0．130±0．061,P〈0．01）。风疹病人组恢复期血清风疹IgC检出阳性率（100．0％）、IgG吸光度值（A）（1．840±0．480）高于正常对照组（62．8％和0．870±0．600）,差异有显著性（P〈0．01）;风疹IgG水平比发病初期升高4倍者占100．0％。10份病人血清PCR结果均为阳性。风疹疫苗免疫接种后阳转率为100．0％。结论在新兵中做好风疹的预防十分重要,早期发现病人并进行疫苗接种可有效控制疫情发展。     

健脑灵口服液提取工艺研究

健脑灵口服液主要由淫羊藿、益智、甘草等中药组成 ,具有补肾扶阳、益精生髓、健脑益智 ,主要用于记忆减退、智力障碍、老年性痴呆。实验发现本方提取工艺对疗效影响显著 ,本处方中大多数有效成分为水溶性成分 ,故工艺上采用水煎煮法 ,采用正交设计试验 ,以淫羊藿中有效成分淫羊藿苷含量为考核指标 ,对水煎煮法提取工艺进行了优选。同时 ,对益智中挥发油的提取及乙醇沉淀的浓度进行了考察。1　仪器、试剂与药品岛津 LC- 1 0 AT高效液相色谱仪 (日本 ) ;CLASS- LC1 0色谱工作站 ,甲醇为色谱纯 ,其他试剂均为分析纯。淫羊藿苷对照品购自…     

HIV-2 DNA疫苗免疫小鼠的免疫反应观察

目的：用构建的HIV－2外膜蛋白gp105和核心蛋白gag基因的DNA疫苗免疫小鼠，评价其免疫效果。方法：将HIV－2型gp 105和gag基因克隆到表达载体pIRES1neo中，构建重组DNA疫苗质粒。间接免疫荧光试验证明，构建的DNA疫苗在真核细胞中表达了gp105或／和gag.构建的疫苗免疫小鼠后，用流式细胞仪测定CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞亚类数，并用HIV－2抗体ELISA检测试剂盒检测免疫鼠血清中抗HIV－2抗体水平。结果：构建了3种HIV－2 DNA疫苗pIRES1gag、pIRSE1gp105和pIRES1gag-gp105，转染BHK细胞后均能表达抗原蛋白，免疫小鼠后可有效地刺激淋巴细胞增殖并诱导产生抗HIV－2特异性抗体，其中pIRES1gag-gp105免疫鼠中，淋巴细胞增殖最显著，而pIRES1gp105免疫鼠中HIV－2特异性抗体水平最高。结论：构建的DNA疫苗均能诱导机体产生免疫反应，其中pIRES1gp105诱导的体液免疫应答最显著，而pIRES1gag-gp105 诱导的细胞免疫响应最显著。     

小鼠对HIV-2 gp105核酸疫苗免疫应答的研究

目的: 探讨HIV- 2gp105基因核酸疫苗在小鼠体内的免疫应答, 为开发HIV- 2核酸疫苗提供实验依据。方法:将HIV- 2外膜蛋白 (gp105 )基因插入真核表达质粒载体pVAX1中, 构建pVAX1 gp105重组表达质粒。将其肌注免疫BALB/c小鼠, 用ELISA法检测小鼠血清抗HIV -2抗体, 用流式细胞仪测定CD4 、CD8 T细胞亚群数, 以乳酸脱氢霉释放法检测脾特异性CTL的杀伤活性。结果: 重组质粒pVAX1 -gp105免疫组小鼠的血清抗体滴度、脾T细胞亚群的数量及特异性CTL的杀伤活性, 均明显高于对照组, 分别为P<0. 01, P<0. 05和P<0. 01。结论: HIV -2gp105核酸疫苗能诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫。     

Salubrinal通过下调Th1和Th17比例缓解CIA

RA是一种自身免疫性疾病,CD4~+T细胞在其发生发展中发挥重要作用。研究通过分析CIA小鼠Salubrinal治疗组和对照组脾脏致病性细胞的增殖,Th亚群比例和相关转录因子表达的差异,以及关节病变部位炎症细胞浸润和细胞因子的变化,探索Salubrinal治疗CIA的作用机制。结果显示,Salubrinal可以抑制脾脏中Ⅱ型胶原反应性CD4~+T细胞的增殖,下调Th1和Th17比例以及转录因子T-bet和p-STAT3的表达,抑制关节病变部位炎症细胞浸润和IL-17与TNF-α的表达,提示Salubrinal通过调节Th1和Th17比例以及对抗原特异性CD4~+T细胞增殖的抑制治疗CIA。本研究为RA的治疗提供了新思路。