染色质多肽对DNA及细胞核转录的抑制

从大鼠肝制备了对DNA转录有抑制作用的染色质多肽物质,其中不含RNase和DNase活性。经嗜热菌蛋白酶处理后。抑制作用显著降低。对大鼠肝及肝癌细胞核体外转录有抑制作用。     

小鼠腹水肝癌细胞增殖酶及分化酶基因染色质构象的变化及其与酶基因表达的关系(简报)

在化学致肝癌过程中,我们已证明细胞增殖酶天门冬氨酸氨甲酰转移酶(ACT)与分化酶氨甲酰磷酸合成酶(CPS_1)及鸟氨酸氨甲酰转移酶(OCT)活性的变化,可能是由于酶基因转录调控的异常。在真核细胞中,基因转录调控与染色质结构有密切关系。为进一步证明肝癌中增殖酶与分化酶基因表达变化与其染色质结构变化的关系,我们测定了小鼠腹水肝癌细胞中CPS_1及ACT活性.结果表明,肝癌中CPS_1活性较正常肝显著降低,而ACT活性则显著增高,约为正常肝的13倍。RNA-cDNA斑点杂交结果与酶活性的     

癌变原理研究Ⅷ.大鼠肝鸟氨酸氨甲酰转移酶的提纯及致癌过程中酶的免疫化学滴定

大鼠肝线粒体OCT提纯至均一纯。免疫化学证明OCT活性可被抗OCT血清完全中和。DENA诱发大鼠肝癌及发育过程中OCT活性的变化与酶蛋白量的变化是相关的。未见免疫化学性质的差异。     

THE IMMUNOHISTOCHEMISTRY AND IN SITU cDNA-mRNA HYBRIDIZATION OF CARBAMYL PHOSPHATE SYNTHETASE I IN ENZYME-ALTERED LIVER CELLS DURING CARCINOGENESIS

The changes of carbamyl phosphate synthetase I(CPS 1)in diethylnitrosamine-(DEN)-inducedenzyme-altered liver cells were studied by means of immunohistochemical(PAP)and in situcDNA-mRNA hybridization methods.The experimental rats were treated with DEN,2-acetylaminofluorene(2-AAF)and 2/3 hepatectomy according to Solt-Farber's protocol andwere further promoted by oral daily administration of 0.05% phenobarbital in drinking water.The results showed that the average number of lesions showing abnormal expression of CPS1 was relatively constant over the course of the experiment(8 months),while the numberof normally expressing lesions gradually decreased.The former lesions were also largerin volume than the latter ones.We conclude that in DEN-initiated lesions the abnormallyexpressed CPS 1 lesions may grow continuously,thus leading to the formation of largernodules.We also suspect that some of these lesions have increased tendencies to developinto tumors.     

大鼠肾γ-GT的分离提纯及其免疫化学的初步研究

本文报告正常大鼠肾γ—GT的分离提纯,主要的程序为:超速离心,脱氧胆酸钠和Triton X—100增溶,丙酮沉淀,硫酸铵分级分离,ConA—Sepharose亲和层析。最终产物提纯倍数为83倍,聚丙烯酰胺凝胶电泳呈现一条带。由纯化的γ—GT制备的抗血清可以完全抑制大鼠肝、肾及肝癌肝的γ—GT活性。     

同工酶在发育及肿瘤发生过程中的表达及其调控

同工酶的研究已有20多年的历史,发展非常迅速。目前已发现百多种同工酶,同工酶的研究遍及生物学各个领域。在肿瘤同工酶方面也有不少研究。但在同工酶基因调控方面的工作则不多。     

大鼠肝氨甲酰磷酸合成酶I cDNA片段在肝癌及非肝细胞中表达体系的构建

观察０．５８７和０．７１２ｋｂＣＰＳＩｃＤＮＡ片段分别与ｐＳＶ＿２载体的重组质粒ｐＳＶ＿２－ＣＰＳ＿（５０５）和ｐＳＶ＿２－ＣＰＳ＿（５０７）在人肝癌和非肝细胞中的表达情况。结果证实，两种重组的表达质粒转染的７４０２人肝癌细胞和ＮＩＨ／３Ｔ３细胞均能有效地表达ＣＰＳＩ，ＣＰＳＩ基因的非翻译区顺序与其高度组织特异性无关。这些体系的建立为体外生产ＣＰＳＩ抗原和天然ＣＰＳＩ蛋白提供了细胞模型和实验依据，对深入了解ＣＰＳＩ的表达过程及其癌变和分化的关系具有重要的意义。     

艾氏腹水癌及其宿主肝中醛缩酶同工酶、染色质化学组分及体外转录活性的初步研究

①醛缩酶同工酶谱:在醋酸薄膜电泳图上,艾氏腹水癌及其宿主肝均出现三条带,正常肝则只有两条带。在聚丙烯酰胺凝胶电泳图上,宿主肝与正常肝的差别同上;②染色质的组蛋白,非组蛋白、RNA含量及体外传录活性:宿主肝与正常肝之间均无明显差别。艾氏腹水癌除组蛋白不变外,其他均显著高于正常肝。对上述结果与醛缩酶基因表达改变的关系作了讨论。     

小鼠腹水肝癌细胞染色质的转录活性及对DNaseⅠ消化敏感性的研究

在E.Coli RNA聚合酶作用下,小鼠腹水肝癌细胞染色质的体外转录活性较正常小鼠肝细胞染色质明显增高。肝癌细胞染色质的非组蛋白和RNA含量也较正常肝增高;但组蛋白含量基本相同。肝细胞染色质对DNaseⅠ消化更加敏感,说明肝癌细胞染色质转录活性部分的结构与正常肝染色质不同。     

大鼠肝染色质多肽的提取及对DNA转录的影响

从大鼠肝去蛋白质的染色质提取与DNA紧密结合的染色质多肽分子量小于(10,000)对大鼠肝DNA的体外转录有调控作用(抑制或激活)。