运动训练联合黄芩苷干预高脂小鼠胰岛素抵抗的实验研究

【目的】 胰岛素抵抗贯穿于2型糖尿病的全过程,是2型糖尿病的病理学基础。骨骼肌是机体最大的胰岛素靶器官,是转运葡萄糖的主要场所,胰岛素抵抗的发生与骨骼肌相关性引起我们的兴趣。本课题拟建立高脂饮食诱导的肥胖小鼠胰岛素抵抗模型,用黄芩苷和运动训练进行干预,初步观察药物和运动干预对肥胖小鼠胰岛素抵抗的影响。 【方法】 将64只健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为8组,正常喂食:空白组、运动组、黄芩苷组、运动+黄芩苷组;高脂喂食:高脂空白组、高脂运动组、高脂黄芩苷组、高脂运动+黄芩苷组。用高脂饲料喂养高脂组小鼠14周,测定体重、空腹血糖和糖耐量、胰岛素耐量指标,建立高脂小鼠模型,同时以正常饲料喂养正常组小鼠14周作为对照。 随之,给予相应组别灌胃黄芩苷或者进行运动训练11周,分别测定各组小鼠体重、空腹血糖、餐后血糖和血清中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、肌酸激酶等含量。取骨骼肌制作切片,油红染色观察脂质沉积的情况。黄芩苷剂量为(每日200 mg/kg);运动组小鼠用YLS-10B轮转式疲劳仪进项训练,20转/min,50 min/d,5 d/周。 【结果】 与高脂空白组相比,高脂黄芩苷组小鼠的体重、空腹血糖、血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白均明显下降,血清高密度脂蛋白明显升高,脂质沉积减少;与高脂空白组相比,高脂运动组小鼠的血清甘油三酯和低密度脂蛋白均明显下降,体重、空腹血糖、总胆固醇都有下降趋势,脂质沉积减少。与高脂运动组相比,高脂运动+黄芩苷组小鼠的空腹血糖和总胆固醇明显下降,体重、甘油三酯、低密度脂蛋白有下降趋势,高密度脂蛋白有升高趋势,脂质沉积减少。 【结论】 黄芩苷和运动训练对高脂小鼠均具有降脂作用、对高脂小鼠的异常糖代谢均具有改善空腹血糖和餐后血糖的作用,可能与改善骨骼肌的胰岛素抵抗有关。     

A20基因在动脉粥样硬化损伤中对内皮细胞的保护作用

目的　探讨A2 0基因抑制氧化型低密度脂蛋白 (oxidizedlowdensitylipoprotein ,oxLDL)诱导内皮细胞凋亡及相关机制。方法　逆转录 聚合酶链反应检测A2 0基因在oxLDL诱导内皮细胞中的表达。DOTAP脂质体转染pCAGGSEHA2 0和pMAMneo于原代培养的脐静脉内皮细胞 ,经G4 18筛选 ,A2 0表达经免疫荧光鉴定。原位末端标记法、原位杂交检测转染前后oxLDL诱导内皮细胞凋亡情况及同型半胱氨酸蛋白酶 (caspase 3)的表达情况。结果　A2 0基因在oxLDL诱导内皮细胞中不表达。oxLDL诱导内皮细胞凋亡达 2 6 % ,A2 0基因能显著抑制oxLDL诱导的内皮细胞凋亡情况及caspase 3的表达。结论　A2 0基因在动脉粥样硬化的防治中可能有一定作用     

互动式教学模式在解剖学教学中的应用

解剖学是基础医学的主干学科之一 ,怎样诱导学生主动学习是解剖学教学的中心任务 ,在传统教育模式中,采用填鸭式教学 ,学生不主动思考问题 ,表现在学生的思维缺陷上,他们完全依靠教师的组织、安排和要求进行学习,所以表现出严重的依赖性,不敢质疑或提不出高质量的问题,特别是神     

解剖第二课堂活动与创新教育

解剖学是重要的基础医学主干学科,凡与人体相关的学科都离不开解剖学教学。有计划、有组织地开展大学生解剖学第二课堂活动是高校医学创新教育的重要内容,也是培养高素质医学人才的重要途径。     

重建胶原纤维对细胞生长的影响*★

背景：胶原种类很多，而不同细胞只在特定类型的胶原环境中才表现出最佳的增殖和表型。 目的：观察Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原对小鼠皮肤成纤维细胞、人牙周膜成纤维细胞和兔软骨细胞生长的影响。 设计、时间及地点：对比观察，细胞学体外实验，于2007-09/2008-09在四川大学生物材料工程研究中心胶原研究室完成。 材料：自制达到中试水平的猪皮Ⅰ型胶原和猪软骨Ⅱ型胶原。 方法：分别将3种细胞在猪皮Ⅰ型胶原和猪软骨Ⅱ型胶原环境中进行体外培养，比较不同细胞在材料上的行为差异。 主要观察指标：傅里叶变换红外光谱、示差扫描热分析和凝胶动力学分析比较2种胶原的热变性温度及在结构和性质上的差异；MTT法观察细胞在2种胶原环境中的黏附、增殖情况。 结果：猪软骨Ⅱ型胶原和猪皮Ⅰ型胶原的热变性温度分别为105.8，87.5 ℃，2种胶原的官能团区相似。凝胶化曲线的对比中猪皮Ⅰ型胶原的成纤维过程较猪软骨Ⅱ型胶原迅速。MTT值显示细胞生长初期，小鼠皮肤成纤维细胞在软骨Ⅱ型胶原环境表现了较好的黏附性，但是更适于在猪皮Ⅰ型胶原上生长；人牙周膜成纤维细胞与小鼠皮肤成纤维细胞对胶原纤维的反应恰好相反。兔软骨细胞第2天在两种胶原上的黏附相似，第4天时在猪软骨Ⅱ型胶原环境中表现出较大的细胞生长密度。 结论：不同细胞对Ⅰ，Ⅱ型胶原纤维表现了不同的时间依赖性，但猪软骨Ⅱ型胶原环境更接近于软骨生长的真实环境，更有利于软骨细胞朝特定方向分化，使软骨细胞维持稳定的表型。     

核心结合因子α1对骨髓间充质干细胞成骨细胞标志基因表达的影响

目的探讨核心结合因子α1（core-binding factor α1，Cbfal）对骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells．MSCs）成骨定向分化的作用。方法抽取3月龄日本大白兔股骨骨髓。密度梯度离心获得MSCs，以Cbfal重组腺病毒转染第3代MSCs．3d后免疫荧光法观察目的基因的表达，并于1～7dMTT法检测其对细胞增殖的影响（Cbfal腺病毒处理组）。以正常培养组、单纯诱导组和对照腺病毒处理组作为对照．各组设置7、14d两个时间点进行观察。RT—PCR法半定量分析Cbfal腺病毒处理对MSCs碱性磷酸酶（alkaline phosphatase．ALP）、骨钙素（osteocalcin。OC）、骨桥蛋白（ostcopontin．OPN）和Ⅰ型胶原等多种成骨细胞标志基因的影响．同时观察Cbfal对MSCs成脂、成肌分化指标过氧化物酶体增殖物激活受体γ2和生肌决定因子的影响。结果①免疫荧光显示．转染Cbfal重组腺病毒后MSCs可以表达Cbfal；②各组MSCs增殖差异无统计学意义（P〉0．05）；③RT—PCR显示7、14d，Cbfal腺病毒处理组ALP、OC和OPN的表达均明显上调，Ⅰ型胶原的表达基本不变；④Cbfal使PPARγ、MyoD的表达受到抑制。结论Cbfal能明显促进MSCs成骨方向的分化。     

一种骨种子细胞体外应力培养系统的建立

目的建立体外应力培养系统，观察应力刺激对骨种子细胞成骨分化的影响。方法选择具有明确成骨分化潜能的间充质干细胞(MSCs)作为种子细胞，以脱细胞骨基质为支架材料，以流体切应力作为对种子细胞的体外应力刺激。建立一种骨种子细胞体外三维应力培养系统——流动腔灌流体系，并利用该系统对MSCs的碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素产物的影响进行评价。结果该系统可以明显促进ALP活性和骨钙素产物的表达，而细胞计数无明显改变。结论本系统为骨组织工程研究提供了一种有效的体外培养模型。     

TGFβ1基因对血管内皮细胞细胞外基质表达及与基质黏附的影响

了解TGFβ1基因对血管内皮细胞表达细胞外基质蛋白及与基质黏附力的影响。用DOTAP脂质体转染p MAMneo TGFβ1于原代培养的脐静脉内皮细胞,经G4 18筛选,TGFβ1表达经免疫荧光鉴定。Western blot确定 型胶原、纤黏连蛋白的表达,微管吸吮系统确定内皮细胞与基质的黏附力。结果表明生理情况下的内皮细胞能表达少量的TGFβ1及胶原、纤黏连蛋白。经G4 18筛选,外源性TGFβ1在血管内皮细胞中稳定表达,能显著提高胶原、纤黏连蛋白纤维的表达及细胞与基质的黏附。说明TGFβ1在血管组织工程中促进内皮细胞的黏附具有一定的应用价值。     

锌指蛋白基因抑制氧损伤诱导的内皮细胞E-选择素的表达

目的：探讨外源性锌指蛋白基因A20对氧损伤诱导的内皮细胞E-选择素表达的影响。方法：DOTAP脂质体介导peDNA3．1EHA20质粒转染人脐静脉内皮细胞，经G418筛选，免疫荧光检测A20基因的表达，原位杂交、免疫组化分别检测过氧化氢诱导的内皮细胞E-选择素表达。结果：A20基因在经G418筛选后的内皮细胞中得到高效表达，过氧化氢能诱导人内皮细胞E-选择素高表达，而A20基因能抑制80％以上过氧化氢诱导的内皮细胞E-选择素表达，两者间相差显著。结论：A20基因能够显著抑制过氧化氢诱导的内皮细胞活化，有助于氧损伤的治疗。     

人体肠道生物力学特性的研究

为探讨人体肠道的生物力学特性，采用电子拉伸机对人体肠道进行一维拉伸试验。结果表明，人体肠道应力-应变关系为指数函数关系。人体肠道各段的指数系数a值接近，但材料常数C有一定的差异，说明肠道各段应力-应变趋势是一致的。在一定应力下，肠道各段轴向与环向的相对伸长率是不同的，表明人体肠道具有各向异性的特性。在一定应变下，肠道各段的增量弹性模量不同，结肠增量弹性模量相对较小，因而更容易发生变形。本研究为肠道内窥镜机器人的研制提供了理论基础。