HPLC同时测定慢性阻塞性肺病患者血浆中的茶碱和1,3-二甲基尿酸

目的 采用HPLC法同时测定慢性阻塞性肺病(COPD)患者血浆中的茶碱及其代谢物1,3-二甲基尿酸(1,3-DMU).方法 色谱柱为Hypersil BDS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(7∶93),流速1 mL·min-1,检测波长280 nm.43名COPD患者连续服用茶碱(100 mg,bid)两周后,测定茶碱及1,3-DMU的血药浓度.结果 茶碱、1,3-DMU的线性范围分别为0.20 ～ 10.00 μg∶ mL-1(r=0.9998)、0.05 ～ 2.00 μg∶ mL-(r=0.9996);日内、日间RSD均≤12.91％,提取回收率分别为77.52％ ～79.22％、71.69％ ～ 74.02％;患者的平均茶碱血药浓度为3.57±1.59 μg∶ mL-1,茶碱和1,3-DMU的浓度呈强相关(r=0.672),1,3-DMU/茶碱为0.064±0.024.结论 所用方法简便、快速、准确,可用于COPD患者茶碱血药浓度的监测,1,3-DMU与茶碱浓度的比值可评估不同个体对茶碱清除率的差异.     

干扰TonEBP基因对Raw264.7细胞迁移、增殖和吞噬功能的影响

 目的 探讨张力反应性增强因子结合蛋白(tonicity-responsive enhancer binding protein, TonEBP)基因对巨噬细胞活性、迁移、增殖及吞噬功能的影响。方法 利用TonEBP-shRNA慢病毒感染Raw 264.7细胞,筛选稳定细胞株,Real time-PCR、Western blot评估干扰效率,选取干扰效率最高的慢病毒感染组及空载慢病毒感染组用于后续实验。各组细胞同步培养,孵育24 h后CCK-8法测定细胞活性,transwell实验观察细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞周期及吞噬功能。结果 成功建立并筛选出干扰TonEBP稳定细胞株,与正常细胞组相比,mRNA和蛋白的干扰效率均高于70％,差异具有统计学意义(P＜0.05);下调TonEBP表达可使细胞活性明显下降[24 h (0.39±0.02 vs 0.46±0.01),48 h(0.57±0.02 vs 0.63±0.02),72 h(0.71±0.02 vs 1.01±0.11),96 h(0.93±0.06 vs 1.42± 0.04),120 h(1.26±0.06 vs 1.56±0.09) ](P＜0.05),同时显著降低细胞迁移(88±7.00 vs 356±35.23)、增殖[(38.73±2.57)％ vs (50.20±2.29)％]及吞噬[(2.26±0.10)％ vs (5.63±0.42)％]能力,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论 干扰TonEBP的表达可有效抑制巨噬细胞活性,降低其迁移、增殖及吞噬能力,为继续探究与巨噬细胞相关的疾病提供实验依据。     

口服降糖药的合理使用

按照WHO及国际糖尿病联盟(IDF)专家组的建议,糖尿病可分为1型、2型、其他特殊类型及妊娠糖尿病4种。目前世界糖尿病患者人数最多的前3位国家为印度、中国、美国。发病率增加最快的是由穷到富急剧变化着的发展中国家。世界卫生组织     

压面机致手部软组织爆裂伤的显微外科治疗

目的探讨应用显微外科方法治疗压面机致手部软组织爆裂伤的临床应用效果。方法采用显微外科修复技术予以治疗并早期、正确、及时的功能锻炼,前手掌合并多指体爆裂23例,单纯多指体爆裂32例,使患指最大程度的恢复功能。结果55例中,4例因挫伤较重致部分皮缘或小范围皮肤坏死,后经游离植皮或局部皮瓣转移修复而愈合,其余均一期愈合。9例因术后锻炼不及时而出现肌腱粘连或瘢痕挛缩,经二期手术松解或修复,功能恢复较好。随访10～36个月,全部恢复原工作。结论本方法简便易行,效果切实可靠,便于临床广泛应用。     

羊水来源胎儿间充质干细胞向成骨细胞的诱导分化

背景:羊水细胞已广泛应用于与基因突变有关疾病的产前诊断,但目前关于羊水采源胎儿间充质干细胞的分离培养、细胞表面特征鉴定、细胞分化及其应用前景的文献并不多见.目的:体外诱导孕中期羊水来源的胎儿间质干细胞向成骨细胞方向分化.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2005-08/2006 05在新华医院实验中心完成.材料:10例羊水标本取自孕18-22周行产前诊断或流产的孕妇,取前均征得孕妇本人同意.方法:采用机械手段挑取孕中期羊水细胞培养体系中的胎儿间充质干细胞集落,体外培养扩增.取第3代胎儿间充质干细胞,以100 nmol/L地塞米松、10 mmol/L β-甘油磷酸和50 mg/L维生素C持续诱导14 d.主要观察指标:免疫组化染色检测碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原的表达,Western Blot蛋白印记法检测Ⅰ型胶原蛋白的表达,VonKossa染色法检测钙结节形成能力,激光共聚焦显微镜检测细胞骨架蛋白形成.结果:分离出的胎儿间充质干细胞为CD44和HLA-ABC阳性,CD34、CD45、HLA-DR阴性,符合间充质干细胞特点.成骨诱导14 d后,细胞碱性磷酸酶染色阳性率达91%,Ⅰ型胶原阳性率达87%;表达Ⅰ型胶原蛋白:随诱导时间的延长钙结节逐渐增多、增大;镜下可见细胞胞质中的微丝呈绿色荧光,细胞周围的微丝形成致密的周围束.结论:羊水来源的胎儿闻充质干细胞可以分化为成骨细胞,且与典型的成骨细胞具有相似的形态学和生物学特征.     

巨大肝紫癜病自发性破裂并失血性休克1例报道

临床资料患者,男,29岁。因"中上腹痛3 d,突发昏迷,血压下降2 h"入院。既往有乙肝史,发现肝硬变、脾肿大史1年余,再生障碍性贫血史10年。入院体检:血压80/40 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),心率110次/min,皮肤、巩膜无黄染,腹部膨隆,腹软,上腹部轻度压痛,无反跳痛及肌卫,肝脾肋下未及,肝区叩痛(+),移动性浊音阳性。血常规:WBC 2.67×109/L,中性粒细胞0.708,血红蛋白57 g/L,     

HPLC法测定玉容颗粒中丹参酮ⅡA含量

玉容颗粒由丹参、当归等9味中药组成,功能清热泻肺,活血解毒,消痈散结。用于寻常痤疮的各种皮损如粉刺、丘疹、脓疱、结节、囊肿等治疗。本品处方中丹参为君药,丹参主要成分之一为丹参酮ⅡA,为控制本品质量,使临床用药安全有效。笔者采用HPLC法测定了本品中丹参酮ⅡA的含量,并拟定了含量限度。通过方法学验证,证明所用方法稳定、准确、重复性好。     

中风病机演变规律的初步探讨

探讨中风病不同时期的病机演变规律,可以帮助我们分清不同时期的主要矛盾,进行有的放矢的治疗,从而达到最佳的治疗效果。     

微型营养评定法在老年慢性阻塞性肺疾病患者中的应用及其与BODE指数的相关性

目的探讨微型营养评定法(MNA)在老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中的应用,分析其与BODE指数的相关性。方法选择2012年4月~10月南方医科大学珠江医院呼吸内科门诊稳定期COPD老年患者139例,采用MNA评估营养状态并分为营养良好组、营养风险组及营养不良组。测定患者的体测指标、肺功能、6分钟步行距离(6MWD),采用MMRC评估呼吸困难程度。按BODE指数评分标准进行评分,并分析其与MNA评分间的相关性。结果 3组间性别构成无统计学意义(P>0.05),年龄及体测指标差异具统计学意义(P<0.001)。3组间BODE指数参数FEV1%Pred、BMI、MMRC、6MWD的评分情况差异均有统计学意义(P<0.001)。MNA评分与BODE指数呈负相关(r=-0.605,P<0.001)。结论 MNA与体测指标、BODE指数密切相关,适用于COPD人群;营养是COPD患者症状的重要影响因素,改善营养状态是缓解症状的有效措施之一。