血管紧张素转换酶基因与高血压性脑卒中关系研究

<正> 为探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因与高血压性脑卒中的关系,应用扩增片段长度多态性分析技术对101例原发性高血压患者(为上海市某街道原发性高血压确诊患者)与64例健康体检者(为同一社区接受健康体检者);80例高血压性脑卒中患者(为1997年4月至10月间上海医科大学华山医院神经内科住院或门急诊病人中确诊为脑梗塞或脑出血患者,均有高血压史)进行ACE基因插入/缺失(I/D)多态性检测.各组之间无年龄、性别差异.结果,(1)     

显性负突变存活素质粒的构建

目的 构建显性负突变存活素质粒。方法 从大鼠心脏微血管内皮细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,利用巢式PCR扩增存活素基因全序列,并引入酶切位点,利用重叠PCR对存活素基因进行定点突变,然后与带绿色荧光的真核表达载体pEGFP-N3进行重组,经测序鉴定后转染细胞,观察对细胞凋亡的影响。结果 用巢式PCR扩增出含存活素基因的496 bp产物,和引入酶切位点后的452 bp产物。通过重叠PCR 3次PCR反应,得到452 bp大小的定点突变产物。重组载体经测序鉴定表明插入片段无误,转染细胞后能发出明亮的绿色荧光, Hochest染色显示细胞凋亡比空质粒对照组显著。结论 成功构建了显性负突变存活素质粒。     

血管老化机制与硫化氢的保护作用

 随着全球老龄化的到来,衰老及其相关疾病带来的健康问题日益严峻。血管老化包括血管结构和功能的改变,也是心血管疾病发生发展的重要因素,是机体衰老的一部分。目前科学家对血管老化机制的研究甚少,本文将从血管老化的分子机制和硫化氢的保护作用两个方面入手,综述了血管老化方面的最新进展。     

用mRNA差异显示法比较SHR和WKY大鼠肾脏组织的基因表达

目的用ｍＲＮＡ差异显示技术观察ＳＨＲ与ＷＫＹ大鼠肾脏组织在ｍＲＮＡ表达水平上的差异。方法取１２周龄的ＳＨＲ及ＷＫＹ大鼠，提取肾脏总ＲＮＡ，用含１２个寡聚核苷酸的Ｔ１１Ａ或Ｔ１１Ｇ引物进行逆转录，用Ｔ１１Ａ、ＡＰ１～３，Ｔ１１Ｇ、ＡＰ６，Ｔ１１Ｇ、ＡＰ７～８引物对逆转录产物进行多聚酶链式反应，反应产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及放射自显影。结果每一种引物组合在单一电泳泳道上可显示７０～１００条基因表达条带，其中绝大多数代表肾脏基因表达的条带是相同的，但其中显示的４条ＳＨＲ大鼠肾脏基因表达的条带与相对应的ＷＫＹ大鼠肾脏基因表达的条带出现了差异。讨论ｍＲＮＡ差异显示技术对于快速筛选ＳＨＲ及ＷＫＹ大鼠肾脏组织的差异表达基因是适用的。     

白细胞与原发性高血压

白细胞与原发性高血压赵小松朱依纯姚泰（上海医科大学生理学教研室２０００３２）ＬｅｕｋｏｃｙｔｅｓａｎｄＥｓｓｅｎｔｉａｌＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎＺｈａｏＸｉａｏｓｏｎｇ，ＺｈｕＹｉｃｈｕｎ，ＹａｏＴａｉ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，...     

全反式维甲酸抑制TGF-β1诱导的大鼠肾系膜细胞纤维连接蛋白表达及Smad 2,3,4核转位

目的 采用转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）在体外刺激大鼠肾系膜细胞表达纤维连接蛋白（fibronectin）,观察全反式维甲酸（all-trans retinoic acid,atRA）对它的作用及对TGF-β1的Smad通路的影响.方法 用Western blot方法检测TGF-β1诱导的肾系膜细胞纤维连接蛋白表达,Smad 2的磷酸化,磷酸化Smad 2、总Smad 2/3和Smad 4的核转位,以及atRA对TGF-β1的这些作用的影响.结果 atRA能抑制TGF-β1诱导的肾系膜细胞纤维连接蛋白表达.atRA对TGF-β1引起的Smad 2的磷酸化无明显作用,但atRA能部分阻断TGF-β1引起的磷酸化Smad 2、Smad 2/3和Smad 4核转位.结论 atRA体外拮抗TGF-β1的致纤维化效应可能是由其减少磷酸化Smad 2、Smad 2/3、Smad 4的核转位所致.     

外源性H2S在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的探索新型气体信号分子硫化氢(H2S)抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用。方法Wistar大鼠行冠状动脉左前降支结扎30min再松开灌注2h建立心肌缺血再灌注模型,在结扎前10min分别经股静脉给予生理盐水、30μmol/L、40μmol/L、50μmol/LNaHS溶液。通过经颈动脉插管至左心室监测不同浓度的外源性H2S对缺血再灌注大鼠血流动力学的影响,Real-TimePCR法分析心肌组织中凋亡相关基因bax、bcl-2、sur-vivin(生存素)的mRNA表达量的变化。结果外源性H2S对缺血再灌注大鼠的血流动力学指标有不同程度的改善,并且能够下调凋亡促进因子bax的mRNA表达,上调survivin的mRNA表达,对凋亡抑制基因bcl-2的mRNA表达没有明显影响。结论外源性H2S可以改善缺血再灌注损伤大鼠心肌的血流动力学,影响心肌细胞中凋亡相关基因的表达。     

对基地班学生实施导师制的体会

本总结了2届基地班学生参加生理学科导师组活动的情况,提出几点经验与体会。根据基地班学生的特点和实施导师的制的初衷,运用问题先导法,培养学生的创新意识,加强师生交流,使之成为合格的基础医学人才。     

转换酶抑制剂对心肌梗塞后大鼠心功能及心肌血管紧张素Ⅱ …

目的 给予长效和含量血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）－ｒａｍｉｐｒｉｌ后的大鼠,观察心肌梗塞（ＭＩ）后心功能以及心肌组织中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）受体基因表达的改变。结果 通过冠状动脉结扎建立大鼠ＭＩ模型,手术前１周即开始给给予ｒａｍｉｐｒｉｌ或水,术后在存活大鼠中继续治疗术后３小时、１日、３日、７日,每时间点大鼠６只;通过心室内插管测定心功能;用半定量ＲＴ－ＰＣＲ法检测大鼠室间隔组织的ＡｎｇⅡ     

离体小动脉血管张力的研究方法

目的通过建立离体小动脉血管张力的研究方法,为小血管的机能学和药理学研究提供有效的工具。方法分离大鼠肠系膜动脉,利用Chart5软件计算标准化的血管周径,然后通过自行编制的Excel文件计算血管内径和实验所需的初始张力设定值。随后对小血管施加各种刺激,用小血管肌动描记仪记录血管张力变化。结果小血管内径标准化提供小血管的管径数据,并为小血管初始张力的设定提供准确的参考数值,使实验条件标准化。小血管肌动描记仪能够记录各种刺激条件下小动脉血管张力的变化。结论成功建立离体小动脉血管张力的研究方法。