脑心通胶囊调节急性脑梗死患者Th17/Treg平衡及相关细胞因子水平的价值

目的分析脑心通胶囊调节急性脑梗死患者辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)平衡及相关细胞因子水平的价值。方法选取该院2016年2月至2018年5月收治的急性脑梗死患者104例,根据治疗方法不同分为对照组(n=52)和观察组(n=52)。对照组采用抗凝、降脂等对症治疗,观察组在对照组基础上联合脑心通胶囊治疗,分析2组患者治疗后的临床疗效。结果观察组总有效率为90.38%,对照组为73.08%,观察组患者总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。2组治疗前Th17比例、Treg比例、Th17/Treg、肽素、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、血管生成素-2(Ang-2)水平组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。观察组治疗后Treg比例、Ang-2高于对照组,Th17比例、Th17/Treg、肽素、hs-CRP水平低于对照组(P0.05)。2组治疗前简易智力状态量表(MMSE)评分、日常生活能力量表(ADL)评分组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。观察组治疗后MMSE评分、ADL评分高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论脑心通胶囊可调节急性脑梗死患者外周血Th17/Treg平衡,降低肽素、hs-CRP的表达,提高Ang-2的表达,改善患者认知功能和生活能力。     

原因不明复发性流产患者Th1/Th2型细胞因子、M-CSF、封闭抗体检查价值分析

目的观察Th1/Th2型细胞因子、M-CSF(巨噬细胞集落刺激因子)、封闭抗体检查在原因不明复发性流产患者中的价值。方法临床资料采集2017年10月～2018年10月妇产科诊治的80例URSA患者(设观察组),另选取我院80例正常妊娠女性(设正常妊娠组),对两组Th1/Th2型细胞因子、M-CSF、封闭抗体进行检测,比较两组检测情况。结果观察组治疗后URSA的TNF-α(27.69±8.96)pg/m L、INF-γ(28.16±5.25)pg/mL、IL-2(25.76±8.56)pg/m L均高于正常妊娠组、治疗后正常妊娠水平,IL-4(2.19±0.86)pg/m L、IL-6(4.09±1.14)pg/mL、IL-10(1.35±0.33)pg/mL及M-CSF(89.77±8.68)pg/mL均低于正常妊娠组、治疗后正常妊娠水平,差异有统计学意义(P 0.05);观察组治疗前BA阳性率11.25%比正常妊娠组85.00%低,差异有统计学意义(P 0.05),观察组治疗后URSA的BA阳性率52.50%低于正常妊娠组85.00%、治疗后正常妊娠87.50%,差异有统计学意义(P 0.05)。结论 Th1/Th2型细胞因子、M-CSF、封闭抗体与原因不明复发性流产存在密切联系,其中Th1细胞因子表达高,Th2细胞因子及M-CSF表达性低,封闭抗体阳性率低时,易引起流产。     

心理干预对早期带状疱疹后神经痛患者生存质量的影响

目的本研究探讨了心理干预对早期带状疱疹后神经痛患者生存质量的影响,旨在为临床治疗提供参考依据。方法本研究选取2015年3月-2017年3月济南市某医院收治的80例早期带状疱疹后神经痛患者为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组与研究组,每组40例。对照组患者采取常规治疗。研究组患者在对照组患者治疗基础上采取心理干预。比较2组患者治疗前、治疗7d及治疗1个月时的视觉模拟评分法(VAS)评分、生存质量测定量表简表(QOL)评分;比较2组患者治疗1年时并发症发生情况。结果治疗前,2组患者VAS评分比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗7d及治疗1个月时,2组患者VAS评分均低于治疗前,且研究组患者低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。治疗前,2组患者QOL评分比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗7d及治疗1个月时,2组患者QOL评分均高于治疗前,且研究组患者高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。2组患者并发症发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论心理干预在早期带状疱疹后神经痛的治疗中发挥着重要作用,其可有效缓解患者疼痛,同时提高患者的生存质量,临床效果显著,值得临床推广应用。     

shRNA沉默RAGE基因表达对前列腺癌细胞增殖的抑制作用

目的:构建针对人晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products , RAGE)基因的特异性短发夹RNA(small hairpin RNA, shRNA)表达载体,探讨其对前列腺癌细胞DU145增殖的抑制作用.方法:设计并合成4种针对RAGE基因的特异性短链寡核苷酸,构建含shRNA RAGE的表达载体,转染高表达RAGE的亚克隆细胞株sub DU145-2C1.荧光显微镜下观察细胞转染后的情况,实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative -PCR, RFQ-PCR)检测转染shRNA后对RAGE mRNA表达的影响,Western印迹法检测对RAGE蛋白表达的影响,CCK-8法检测对细胞增殖的影响,划痕实验观察对细胞迁移能力的影响.结果:构建获得的shRNA RAGE表达载体能够有效抑制RAGE基因的表达(P<0.05),其中以shRNA RAGE -1(R1)的抑制作用最强,其对RAGE mRNA表达的抑制率为84%,对蛋白表达的抑制率为27%.细胞增殖结果显示,转染shRNA RAGE后细胞增殖能力明显降低;而细胞迁移能力则无明显变化.结论:shRNA RAGE能有效下调RAGE基因的表达水平,抑制细胞增殖.     

重组人HMGB1 A box的表达纯化及对单核细胞的抑制作用

目的:克隆人高迁移率族B1Abox(HMGB1 A box)基因,构建高效稳定的大肠杆菌(E.coli)表达菌株,并探讨其对免疫复合物(IC)刺激单核细胞活化的抑制作用。方法:根据本室优化合成的HMGB1基因序列设计引物,PCR扩增目的基因片段并插入克隆载体pMD19-T,菌落PCR、酶谱分析及DNA测序鉴定阳性克隆。重组克隆载体经NdeⅠ和XhoⅠ酶切,琼脂糖凝胶电泳分离目的基因,插入表达载体pQE-T7-2的相应位点,菌落PCR鉴定重组表达载体。重组菌株经IT-PG诱导,SDS-PAGE分析及Western blot鉴定重组蛋白。Ni2+-NTA层析柱纯化重组人HMGB1 A box,RT-PCR检测其对IC刺激单核细胞活化的抑制作用。结果:获得重组人HMGB1 A box的表达菌株,目的蛋白占菌体总蛋白的40%左右。Western blot显示重组蛋白能与抗人HMGB1多克隆抗体和抗His-Tag多克隆抗体特异反应。目的蛋白纯度高达90%以上,并能有效抑制IC诱导单核细胞分泌BAFF、IFN-γ及TNF-α。结论:成功构建了重组人HMGB1 A Box的表达载体,纯化的重组蛋白能有效抑制IC刺激单核细胞活化后细胞因子的分泌。     

人HMGB1真核表达载体的构建及其在单核细胞的表达

目的构建人高迁移率族蛋白1（HMGB1）表达载体,并探讨其免疫调节作用。方法从HMGB1克隆载体酶切分离HMGB1基因片段,插入增强型绿色荧光蛋白载体pCITE EGFP,菌落PCR和酶谱分析鉴定重组载体。重组表达质粒转染人单核细胞系（U937）,梯度G418筛选,荧光和Western  blot检测HMGB1的表达。结果菌落PCR和酶谱分析显示目的基因被正确插入真核表达载体,获得重组质粒pCITE EGFP HMGB1,转染U937细胞随培养基中G418浓度的升高而增强,转染细胞中目的蛋白HMGB1表达量明显升高。结论成功构建重组载体pCITE EGFP HMGB1,并获得稳定表达人HMGB1的单核细胞系,为研究HMGB1对单核巨噬细胞的作用及其机制奠定基础。     

脑心通胶囊对急性脑梗死患者细胞免疫功能的影响

目的探讨脑心通胶囊能否改善急性脑梗死患者的细胞免疫功能。方法选择我院2016年6月~2017年6月收治的100例急性脑梗死患者为研究对象,按入院的先后顺序分为对照组和观察组,并设立健康组。两组治疗组均给予西医常规治疗,观察组在西医治疗的基础上加服脑心通胶囊,疗程为2周,观察脑心通胶囊治疗前后CD4、CD8、CD4/CD8水平的变化。结果急性脑梗死患者与健康者比较,CD4、CD4/CD8水平降低,CD8升高。急性脑梗死患者CD4含量(36.05±3.32)比健康组(42.27±3.84)降低,差异有统计学意义(P<0.05),急性脑梗死患者CD4/CD8(2.01±0.25)比健康组(2.46±0.39)降低,差异有统计学意义(P<0.05),急性脑梗死患者CD8(23.97±3.48)比健康组(20.29±3.26)升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后CD4/CD8(2.23±0.27)比治疗前(2.01±0.25)升高,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组CD4/CD8(2.33±0.12)比对照组(2.13±0.19)升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑心通胶囊能够改善患者的细胞免疫功能,提高患者免疫力。     

免疫复合物对单核巨噬细胞的调节作用

目的  研究免疫复合物对单核巨噬细胞的增殖、细胞因子的分泌及吞噬功能的调节作用。方法  免疫复合物组：细胞坏死上清+系统性红斑狼疮（SLE）患者血清;对照组有5组：坏死上清+正常人血清组、坏死上清组、SLE血清组、正常人血清组和培养基组,以上分别作用于U937细胞和U937细胞诱导产生的巨噬细胞。24h后,用CCK 8法检测U937细胞的增殖,RT-PCR法检测U937细胞分泌肿瘤坏死因子α（TNF-α）和B细胞活化因子（BAFF）的变化,中性红比色法检测诱导产生的巨噬细胞的吞噬功能。结果  与对照组相比,免疫复合物能明显促进U937细胞的增殖 （Ｐ＜0.05）,TNF-α 和BAFF 的mRNA表达水平明显增加（Ｐ＜0.05）,并明显抑制巨噬细胞的吞噬功能（Ｐ＜0.05）。结论  在免疫复合物作用下,单核巨噬细胞系统（MPS）处于异常活化状态,使免疫复合物的形成增多而清除减少,从而参与了SLE的发生发展。