肌腱组织工程研究新进展

组织工程化肌腱原理是将分离的高浓度有活力的肌腱种子细胞种植于生物相容性好，可生物降解的细胞载体中，体外培养后植到缺损部位，形成新的、自身的，具有功能的肌腱组织，最终达到生物学意义上的完全修复。现就肌腱组织工程中肌腱细胞的特征、种子细胞来源、支架材料的制备、临床应用和面临的问题和展望等做一综述。     

衍生肌腱支架材料的细胞相容性研究

目的 探讨衍生肌腱支架材料（tendon derivation biomaterials，TDBM）与肌腱细胞的细胞相容性及肌腱细胞在此三维支架上培养的生物学行为，为肌腱组织工程新型支架材料的应用提供依据。方法将肌腱细胞与TDBM体外复合培养，设置单纯肌腱细胞培养为对照组，进行形态学观察，并检测细胞增殖、细胞周期、细胞DNA倍体水平及肌腱细胞凋亡率。通过^3H-脯氨酸（^3H-Proline）掺入试验了解材料对肌腱细胞胶原合成的影响。结果 肌腱细胞在TDBM上呈梭形生长，TDBM组细胞第2天进入对数增长期，倍增时间为3d，而单纯肌腱细胞培养对照组倍增时间为3．75d。TDBM组与单纯肌腱细胞培养对照组比较，^3H-Proline掺入值差异无统计学意义（P〉0．05），说明细胞功能未受影响。与支架材料复合培养的肌腱细胞DNA指数为0．96，增殖指数较对照组高10．1％，提示肌腱细胞在三维胶原支架上生长速度快，增殖能力强。结论TDBM具有良好的细胞相容性，可作为肌腱细胞的有效载体应用于组织工程化肌腱的构建。     

人重组pcDNA6.2/生长分化因子5质粒的构建及鉴定

背景：生长分化因子5是一种刺激肌腱、韧带塑型，增强愈合反应有效的生长因子，在活性组织工程肌腱构建中有重要作用。 目的：构建人重组pcDNA6.2/生长分化因子5质粒，为转染基质干细胞向肌腱诱导分化实验奠定基础。 设计、时间及地点：细胞基因工程体外实验，于2007-08/12在哈尔滨医科大学遗传学教研室和分子生物学教研室完成。 材料：根据Genbank（NM000557）中人生长分化因子5的序列化学合成一对引物,从人胎儿软骨组织提取总RNA。 方法：通过反转录-聚合酶链反应得到人生长分化因子5完整成熟肽基因。将所得基因片段插入克隆载体pcDNA6.2并转化入JM109菌株，提取重组质粒，PCR鉴定、酶切鉴定并测序。 主要观察指标：反转录-聚合酶链反应检测结果，PCR及SalⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定结果,重组质粒测序与Genbank中序列比较结果。 结果：电泳显示，反转录-聚合酶链反应产物为一长约380 bp的带，阳性克隆质粒经PCR电泳及双酶切均出现约380 bp的片段。测序表明与Genbank中的序列完全相符。 结论：成功构建出人重组pcDNA6.2/生长分化因子5质粒，为组织工程化肌腱过程中种子细胞的制备提供转染质粒。     

无柄人工全髋关节置换术10例报告

由于某些髋关节疾病造成关节严重破坏、疼痛、功能障碍和畸形行人工全髋关节置换术的患者日见增多。尽管有柄髋关节假体设计与生产日趋完善,但做这种手术患者仍面临着应用年龄谨慎和假体翻修缺陷的问题。无柄式人工全髋关节的设计与应用是解决此类问题的有益尝试。     

无柄人工全髋关节置换术10例报告

由于某些髋关节疾病造成关节严重破坏、疼痛、功能障碍和畸形行人工全髋关节置换术的患者日见增多。尽管有柄髋关节假体设计与生产日趋完善，但做这种手术患者仍面临着应用年龄谨慎和假体翻修缺陷的问题。无柄式人工全髋关节的设计与应用是解决此类问题的有益尝试。     

BMP-12诱导下对骨髓基质干细胞分化潜能及生物学行为影响的实验研究

目的:探讨(MSCs)在BMP-12诱导下向肌腱细胞分化潜能及其生物学行为。方法:将MSCs在含BMP-12的F12培养液中诱导分化后传代培养并与肌腱细胞对比,进行形态学观察、细胞增殖、细胞周期、细胞DNA指数及细胞凋亡检测。通过3H-Proline掺入实验了解对MSCs细胞胶原合成的影响。结果:MSCs细胞呈梭形生长,第2天进入对数增长期,倍增时间为3.2天,而单纯肌腱培养对照组倍增时间3.75天(P>0.05)。MSCs与单纯培养对照组比较3H-Proline掺入值无显著性差异(P>0.05),说明MSCs细胞分泌可分泌胶原。细胞功能向肌腱细胞方向转化。MSCs细胞DNA指数为0.96,增殖指数比对照组高11%,提示MSCs细胞生长速度快,增殖能力强。结论:MSCs在BMP-12诱导下具有向肌腱细胞分化潜能,可作为肌腱组织工程的有效种子细胞应用于组织工程化肌腱的构建。     

人重组pcDNA6.2/生长分化因子5质粒的构建及鉴定

背景：生长分化因子5是一种刺激肌腱、韧带塑型，增强愈合反应有效的生长因子，在活性组织工程肌腱构建中有重要作用。目的：构建人重组pcDNA6．2／生长分化因子5质粒，为转染基质干细胞向肌腱诱导分化实验奠定基础。设计、时间及地点：细胞基因工程体外实验，于2007-08／12在哈尔滨医科大学遗传学教研室和分子生物学教研室完成。材料：根据Genbank（NM000557）中人生长分化因子5的序列化学合成一对引物，从人胎儿软骨组织提取总RNA。方法：通过反转录聚合酶链反应得到人生长分化因子5完整成熟肽基因。将所得基因片段插入克隆载体pcDNA6-2并转化入JM109菌株，提取重组质粒，PCR鉴定、酶切鉴定并测序。主要观察指标：反转录聚合酶链反应检测结果，PCR及Sal I和BamH I双酶切鉴定结果，重组质粒测序与Genbank中序列比较结果。结果：电泳显示，反转录-聚合酶链反应产物为一长约380bp的带，阳性克隆质粒经PCR电泳及双酶切均出现约380bp的片段。测序表明与Genbank中的序列完全相符。结论：成功构建出人重组DcDNA6．2／生长分化因子5质粒，为组织工程化肌腱过程中种子细胞的制备提供转染质粒。     

骨水泥振动器的运用对骨水泥-骨界面微嵌合的影响

目的 评价骨水泥振动器对提高骨水泥-骨界面的整合效果及临床意义. 方法 取新鲜成猪股骨16根,随机分成两组,实验组(A组)与对照组(B组)模型各8根.猪股骨髓腔内应用骨水泥振动器进行骨水泥灌注后(对照组灌注骨水泥不经振动),对每组实验模型进行硬组织切片,每根股骨模型等距选取3个层面,HE染色后在体视显微镜下观察,经电脑Motic Med 6.0数码医学图像分析系统分析测量骨水泥渗透入松质骨腔的厚度,记为渗透厚度,将所得数值进行统计学分析,对比振动组与对照组的骨水泥灌注效果. 结果 体视显微镜下显示实验组骨水泥与骨小梁之间结合紧密,骨水泥在松质骨腔内充填均匀一致,骨水泥与骨小梁之间的结合紧密.对照组骨水泥向松质骨腔内渗透欠佳,在松质骨腔内充填不均匀.结果显示实验组骨水泥渗透厚度高于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05). 结论 骨水泥振动器能够使骨水泥在骨髓腔内弥散更加均匀,能够促进骨水泥向骨小梁内渗透,从而增加骨水泥与骨小梁之间的微嵌合.     

牵引协助法功能锻炼治疗轻度胸腰段压缩性骨折

目的:探讨牵引协助法功能锻炼治疗轻度胸腰段压缩性骨折的临床效果.方法:对于压缩小于 1/3,后柱无损伤,无神经根损伤症状,经CT检查椎管无狭窄者通过牵引装置在患者胸腰部两侧加以相同的牵引重量进行功能锻炼,牵引重量为体重的1/8～1/5,比较损伤程度及身体素质相似的,试验组(应用上述方法)及对照组(采用传统锻炼方法)患者的疗效.结果:实验组:优45例,良10例,可4倒,差1例.对照组:优30例,良12例,可10例,差8例.u=3.1589,P＜0.01,说明实验组疗效明显优于对照组.结论:牵引协助法功能锻炼是治疗轻度胸腰段压缩性骨折的理想方法.     

自锁铰链型人工全肘关节置换假体的临床应用分析

目的:探讨新型自锁铰链型人工全肘关节置换假体在肿瘤、严重肘关节骨关节炎病人及肘关节毁损伤中的初步应用疗效,为此关节应用在临床的广泛开展提供可靠依据。方法:15例因肿瘤、严重骨关节炎破坏、肘关节毁损伤等肘关节疾病患者行肘关节切除,将自行设计的自锁铰链型肘关节假体用骨水泥固定于肱骨和尺骨上,并用横行锁钉将肱骨假体、骨水泥、肱骨固锁成一体。术后1周行被动无痛肘关节功能锻炼。2周被动锻炼结合主动功能锻炼,3周可持物功能锻炼。3个月恢复正常活动,但避免提过重物。结果:术后15例患者随访平均66个月(65～122个月),不同程度恢复了肘关节的正常活动,Mayo肘关节功能评分平均从40(25～70)恢复到95(65～100),与术前比较有显著性差异(P<0.01)。肘关节活动范围从85°(0～120°)到术后的105°(95～125°),与术前比较有显著性差异(P<0.05)。X线片显示无假体松动,部分患者假体与骨移行处有骨形成。术后无神经刺激、麻痹症状,取得满意的临床疗效。结论:自锁人工全肘关节假体设计符合人体生物力学结构,抗旋转和剪切能力强,手术简单可靠,适于肘关节肿瘤、毁损伤的患者应用。