丹红注射液及其活性组分对脂多糖诱导的小胶质细胞NO分泌的抑制作用

目的 研究日本琵琶甲虫Blaps japonensis的化学成分及其生物活性。方法 采用多种柱色谱法对日本琵琶甲虫的50%乙醇提取物的正丁醇萃取部位化学成分进行分离和纯化,并根据其理化性质及波谱数据鉴定结构;采用MTT法进行抗肿瘤活性筛选。结果 共分离得到9个化合物,分别鉴定为N-乙酰基多巴胺（1）、(?)-N-acetylnoradrenaline（2）、1, 4- diacetamidobutane（3）、N, N′-pentane-1, 5-diyldiacetamide（4）、(1H-indol-3-yl) oxoacetamide（5）、吲哚酸（6）、吲哚醛（7）、deoxyuridine（8）和胸苷（9）。细胞毒活性筛选表明,化合物6对HL-60、SMMC-7721、A-549、MCF-7和SW480细胞株有显著抑制作用。结论 所有化合物均为首次从该昆虫中分离得到,并首次对化合物2的核磁共振波谱数据进行了归属。     

丹红注射液及其活性组分对脂多糖诱导的小胶质细胞NO分泌的抑制作用

目的 研究丹红注射液及其单体成分对小鼠小胶质细胞株(BV-2细胞)的影响及其作用机制.方法 实验分为对照组、脂多糖(LPS)刺激组、加药组,检测不同稀释倍数的丹红注射液、水和醋酸乙酯萃取物及其单体成分对小胶质细胞活力及LPS诱导小胶质细胞一氧化氮(NO)产生的影响.结果 丹红注射液及醋酸乙酯萃取物对LPS诱导的小胶质细胞NO的产生没有抑制作用,但是丹红注射液水萃取物以及丹酚酸A可以在不影响细胞活力的情况下抑制NO产生.结论 丹红注射液水萃取物中的某些成分以及丹酚酸A抑制激活小胶质细胞NO的产生可能是丹红注射液神经保护作用的机制之一.     

羟基红花黄色素A对小胶质细胞炎性激活的抑制作用

红花为菊科植物红花(Carthamus tinctorius L.)的干燥花,是传统的活血化瘀类代表药[1].其主要的活血化瘀成分为水溶性的黄色素;红花黄色素主要成分有羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)、红花明苷A、红花明苷B及其他含量较低的成分[2],其中羟基红花黄色素A含量最高且具有较强的药理活性[3]:如抑制血栓形成、抗炎、抗氧化等作用.据文献报道,羟基红花黄色素A能抑制血栓形成,对缺血性脑损伤有治疗作用[4],但作用机制尚不明确.本试验利用LPS激活中枢神经免疫细胞小胶质细胞,考察羟基红花黄色素A的抗炎作用及其机制.     

大黄酚对LPS诱导小胶质细胞炎性因子分泌的影响

[目的]抑制小胶质细胞的过度活化,对中风、神经退行性病变等疾病的治疗有重要意义。考察大黄酚对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞炎性因子分泌的影响。[方法]培养小胶质细胞细胞株,检测大黄酚对小胶质细胞活力及LPS诱导的小胶质细胞一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)产生的影响。[结果]与LPS相比,大黄酚可以抑制NO、TNF-α的分泌。[结论]大黄酚可以抑制LPS诱导小胶质细胞炎性因子的分泌。     

HPLC测定复方丙戊酰胺胶囊中苯妥英钠和五味子醇甲的含量

目的:建立复方丙戊酰胺胶囊(丙戊酰胺,苯妥英钠,五味子,维生素B6等)中苯妥英钠和五味子醇甲含量的HPLC测定方法。方法:采用HypersilBDSODS色谱柱,流动相为甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(60∶40),检测波长为254nm。结果:苯妥英钠和五味子醇甲分别在4.50μg～72.0μg(r=1.0000)和0.0244～0.391μg(r=0.9999)范围内呈线性关系。平均回收率(n=9)分别为100.21,102.32,RSD分别为1.3,0.5。结论:本法简便、可靠、准确,可用于该制剂的质量控制。     

高效液相色谱法测定复方卡钙菖蒲胶囊中卡马西平的含量

目的建立复方卡钙菖蒲胶囊中卡马西平的高效液相色谱法。方法采用C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(60∶40)为流动相。检测波长为285 nm,流速为1.0 ml/min。结果卡马西平在0.008648~0.17296μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=1.0000,n=9),平均回收率为101.44%,(n=9),RSD为0.49%。结论该方法快速、简便、结果准确,可用于复方卡钙菖蒲胶囊的质量控制。     

复方首乌颗粒质量标准研究

目的探讨复方首乌颗粒（何首乌、葛根、丹参）的质量标准。方法用薄层色谱法鉴别复方首乌颗粒中的何首乌、葛根及丹参；用高效液相色谱法分别对制剂中的2。3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷及葛根素进行定量分析。结果定性鉴别分离度好，专属性强；2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷进样量线性范围为0．01752～0．3504μg（r=0．9999，n=6），平均回收率为100．23％，RSD=1．2％（n=9）；葛根素进样量线性范围为0．08160～1．224μg（r=1．0000，n=5），平均回收率为99．75％，RSD=1．3％（n=9）。结论所用方法可靠、准确、专属性强，可有效控制复方首乌颗粒的质量。     

丹红注射液对脑缺血缺氧损伤的保护作用

目的: 观察丹红注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠和缺氧损伤神经元细胞的保护作用。方法: ①成年雄性Wistar大鼠随机分为模型组、假手术组、丹红注射液(0.9,1.8,3.6 mL·kg^-1)组和阳性对照(依达拉奉,6 mg·kg^-1)组,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,缺血60 min后再灌注72 h,分别于造模前30 min、再灌注即刻、缺血后24,48,72 h经ip给药。72 h,进行神经功能评分;末次给药1 h后,取左侧缺血半脑,匀浆,ELISA法测定S100B蛋白和神经特异烯醇化酶(NSE)含量。②体外培养Neuro-2A细胞,分为正常对照组、氧糖剥夺(oxygen and glucose deprivation,OGD)损伤模型组、丹红注射液组,细胞加平衡盐溶液D-Hanks于94%N₂-5%CO₂-1%O₂三气培养箱缺氧孵育2 h建立OGD损伤模型,丹红注射液(1.25,2.5,5 mL·L^-1)干预处理,检测细胞的增殖活力、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、活性氧(ROS)水平。结果: ①与假手术组比,模型组大鼠神经功能评分明显升高(P<0.01),脑组织匀浆NSE和S100B的含量明显升高(P<0.01),与模型组比,丹红注射液各剂量组均能不同程度改善MCAO大鼠的行为障碍(P<0.05,P<0.01,P<0.05),明显降低脑组织匀浆中NSE含量(P<0.05),中、低剂量组明显降低S100含量(P<0.05,P<0.01)。②与正常对照组比,模型组细胞活力明显下降,LDH漏出量升高,ROS水平显著升高(P<0.01),与OGD组比,丹红注射液各组均能增加OGD损伤Neuro-2A细胞活力,降低细胞内ROS水平(P<0.01),2.5,5 mL·L^-1浓度丹红注射液显著降低细胞LDH漏出量(P<0.05,P<0.01)。结论: 丹红注射液对脑缺血缺氧损伤具有一定的保护作用。     

毛细管区带电泳法测定麻黄及麻杏石甘汤中麻黄碱和伪麻黄碱的含量

目的:采用毛细管区带电泳法测定麻黄及麻杏石甘汤中麻黄碱和伪麻黄碱.方法:电泳缓冲液为50 mmol·L~(-1)硼砂/20 mmol·L~(-1)苏氨酸缓冲溶液(1 mol·L~(-1) NaOH溶液调pH至9.27);紫外检测波长210 nm,分离电压15 kV;以苯巴比妥为内标物,采用压力进样(10 cm×20 s),柱温室温.结果:麻黄碱与伪麻黄碱的线性范围分别为21.3～213,8.4～84 mg·L~(-1),相关系数分别为0.999 6,0.999 5,检测限分别为1.45,1.48 mg·L~(-1),定量限分别为4.81,4.93 mg·L~(-1).将该法用于麻黄中麻黄碱与伪麻黄碱的含量测定,平均回收率分别为97.5,98.6%.结论:本法操作简便、快速、经济、灵敏度高,麻黄及麻杏石甘汤中麻黄碱及伪麻黄碱可获得满意的分离,可作为麻黄和麻杏石甘汤中麻黄碱和伪麻黄碱的含量测定方法.     

RP-HPLC法测定烟酸维生素B6注射液中2组分含量

目的:建立HPLC法测定烟酸维生素B_6注射液中烟酸和维生素B_6含量的方法。方法:采用C_(18)(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.04%戊烷磺酸钠溶液(用冰醋酸调节pH为3.0±0.05)-甲醇(90:10)为流动相,检测波长为262nm,流速为1.0ml·min~(-1)。结果:烟酸的线性范围为0.04～1.01μg(r=1.000 0,n=7),平均回收率为100.3%(n=9),RSD为0.4%;维生素B_6的线性范围为0.12～3.03μg(r=1.000 0,n=7),平均回收率为100.2%(n=9),RSD为0.5%。结论:本方法快速、准确,可用于烟酸维生素B_6注射液的质量控制。