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1.
目的 探讨共有序列简并杂合寡核苷酸引物PCR(CODEHOP-PCR)在肠道病毒血清型鉴定中的临床应用价值。方法 以CODEHOP-PCR检测经实时荧光RT-PCR鉴定为EV71和CA16 手足口病患者的临床样本和病毒分离培养细胞上清的肠道病毒VP1基因片段,经琼脂糖凝胶电泳并回收、测序,与Genbank提供的序列比较,确定肠道病毒的血清型。结果 CODEHOP-PCR后的序列分析表明,所有的EV71毒株和CA16毒株与近几年国内报道的部分毒株同源性在96%以上,其血清分型结果验证了实时荧光RT-PCR分型结果的准确性。结论 CODEHOP-PCR合并测序用于肠道病毒血清型的准确鉴定,与传统的病毒分离及血清中和试验相比,具有更快速、准确的优点。  相似文献   
2.
流式细胞术鉴定特异性识别曲霉孢子单克隆抗体   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的筛选可以与悬浮状态下曲霉孢子结合的特异性单克隆抗体。方法采用流式细胞术检测与曲霉活孢子结合的单抗。结果 2株单抗MA3和Con2可特异性结合悬浮状态下的烟曲霉孢子,其中单抗MA3可结合烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉等常见致病曲霉孢子。结论成功筛选到2株特异性结合曲霉孢子的单抗。  相似文献   
3.
目的建立运输振动对悬浮红细胞质量影响的模型及开发血液质量可视监测系统。方法选取采集后储存7 d的悬浮红细胞(2 U/袋) 7袋,使用电磁振动实验系统组合轮式车振动环境,模拟运输过程中产生的振动,振动方向选择垂直方向,累积振动6 h。分别在振动前、振动20—360 min共取样13次(180 min及以前每隔20 min取样1次、以后为每隔60 min取样1次),检测血常规、Hb,计算FHb、溶血率,分析比较振动前、振动不同时间各指标的变化。利用振动监测仪监测不同振动时间的振动情况,通过加速度均方根计算振动能量,最终通过不同振动时间的振动能量和FHb浓度,建立振动对悬浮红细胞质量影响的模型曲线。利用传感技术设计血液质量监测系统,包括无线温湿度、加速度传感器,实时采集、分析血液运输过程中的温湿度及振动情况。根据传感器收集的数据,建立血液振动能量关联模型,进一步实时处理并在无线终端上可视化实时显示血液质量。结果悬浮红细胞FHb(g/L)/溶血率(%):模拟运输振动前与振动20、80、240 min时,分别为0.11/0.02 vs 0.35/0.07 vs 1.39/0.28 vs 4.35/0.86(P0.05)。无线温湿度、加速度传感器可实时采集运输过程中的血液温湿度及振动情况,无线终端可实时显示血液质量。结论建立了能够反映不同振动时间及其对应振动能量和悬浮红细胞质量(FHb)的关系曲线模型,开发出运输过程中血液质量可视监测系统。  相似文献   
4.
毋庸置疑,“细胞因子风暴”贯穿于急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发病全程.越来越多的研究证据支持细胞因子基因多态性是诱导异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)相关并发症,特别是影响GVHD发生的重要因素.细胞因子基因多态性主要表现为单核苷酸多态性(SNP)以及短串联重复序列(STR),并且主要发生在基因编码区和启动子区.SNP可以通过影响基因的转录与翻译,从而影响细胞因子的结构、表达与活性,导致个体细胞因子的分泌水平与功能的改变.我们仅就近年来关于细胞因子,诸如IL-1、IL-6、IL-7R、IL-10、IL-17、IL-23、TNFα、IFN-γ、TGFβ的基因多态性,对alloHSCT后GVHD、感染、总体生存(OS)率以及移植相关死亡率(TRM)等的影响研究进展进行综述.  相似文献   
5.
一步法实时RT-PCR快速检测手足口病肠道病毒   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨实时荧光RT-PCR在手足口病(HFMD)肠道病毒快速检测中的应用价值。方法以实时荧光RT-PCR检测64例临床初诊为HFMD患儿标本中总肠道病毒(EV)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)和肠道病毒71型(EV71),用RD细胞、Vero细胞和Hep-2细胞进行病毒分离培养,以免疫荧光法鉴别分离培养的EV71。结果64例标本中,EV(+)/EV71(+)为23.4%(15/64)、EV(+)/CA16(+)为48.4%(31/64)、EV(+)/EV71(-)/CA16(-)为10.9%(7/64)、EV(-)/EV71(-)/CA16(-)为17.2%(11/64)。实时荧光RT-PCR检测为EV71且病毒分离培养出现细胞病变效应的培养细胞经抗EV71单克隆抗体免疫荧光检测均为阳性,未发生细胞病变效应或非EV71的培养细胞均为阴性。结论实时荧光RT-PCR检测HFMD病原具有特异和快速等优点,与病毒分离培养具有较高的一致性,可用于手足口病的早期诊断和鉴别诊断。  相似文献   
6.
Ⅲ型登革病毒NS1单克隆抗体的制备及鉴定   总被引:3,自引:0,他引:3  
晋晶  潘玉先  丁细霞  蔡建飘  狄飙  车小燕 《广东医学》2007,28(11):1726-1729
目的 研制Ⅲ型登革病毒(DV3)非结构蛋白1(NS1)单克隆抗体,鉴定其血清型特异性.方法 以具有良好抗原性的重组DV3-NS1蛋白与DV3交替免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选阳性的杂交瘤细胞,并结合免疫荧光(IFA)和Weatern Blot对抗体的特异性进行鉴定.结果 经交替免疫法免疫Balb/c小鼠,共获得14株抗DV3-NS1单抗,其亚类测定1株为IgG2a,余为lgG1.其中3株特异性结合DV3及DV3-NS1蛋白,4株能同时结合4型登革病毒NS1蛋白,其余7株与其他3型登革病毒NS1蛋白存在交叉反应.结论 成功获得了针对DV3-NS1的特异性单抗及交叉性单抗,将为进一步研究登革病毒NS1蛋白的结构与功能及临床诊断试剂的研发奠定基础.  相似文献   
7.
目的模拟极端路况下运输悬浮红细胞,研究不同时长振动对悬浮红细胞质量的影响。方法使用电磁振动实验系统模拟极端陆地运输条件下的振动,选择组合轮式车振动环境,水平、纵向、垂直3方向振动,将悬浮红细胞累计振动6 h。分别在振动前、累计振动3 h、4. 5 h、6 h后留取血样,检测游离血红蛋白(FHb)、乳酸脱氢酶(LDH)、钾离子(K~+)、溶血率,分析比较振动前后及不同振动暴露时间对上述指标的影响。结果悬浮红细胞FHb含量在振动3 h、4. 5 h、6 h分别为1. 30±0. 42 g/L、1. 66±0. 46 g/L和2. 14±0. 54 g/L与振动前(0. 28±0. 06 g/L)相比有显著差异(P0. 05);振动后溶血率较振动前明显增高,振动3 h、4. 5 h、6 h分别为0. 25%±0. 07%、0. 36%±0. 07%和0. 45%±0. 11%,与振动前(0. 04%±0. 02%)相比较有显著差异,P0. 05;振动后LDH较振动前明显增高,振动3h、4. 5 h、6 h分别为(507. 20±134. 70) U/L、(679. 40±151. 10) U/L和(838. 50±169. 90) U/L与振动前[(69. 4±27. 9) U/L)比较有显著差别,P0. 05;振动3 h、4. 5 h、6 h K~+浓度分别为(9. 6±0. 72) mmol/L、(10. 2±0. 84) mmol/L和(10. 6±0. 84) mmol/L均高于振动前K~+浓度[(6. 9±0. 56) mmol/L],P0. 05,振动4. 5 h及振动6 h后的K~+较振动3 h后增高(P0. 05),但振动6 h后与振动4. 5 h后的K~+比较差异无统计学意义(P0. 05)。结论剧烈的陆地运输振动可导致悬浮红细胞FHb、溶血率、LDH及K~+含量的改变,导致红细胞振动损伤,且FHb、溶血率及LDH随着振动暴露时间的延长而逐渐增高,影响悬浮红细胞质量。  相似文献   
8.
目的探讨减振装置对运输悬浮红细胞的减振效果。方法使用电磁振动实验系统,选择组合轮式车振动环境,利用振动监测仪,选用能反映振动强度的加速度均方根值来计算减振效率。选取采集后储存7 d的悬浮红细胞(2 U) 20袋,随机分为对照组和实验组,每组10袋,2组悬浮红细胞均放于制式血箱内,并将实验组放于减振装置上。2组均使用电磁振动实验系统,选择组合轮式车振动环境,模拟运输过程中产生的振动,振动方向为水平、纵向、垂直3方向,每个方向振动1 h,累积振动3 h。分别在振动前、累计振动3 h后留取血样,检测FHb浓度、溶血率、LDH、K~+浓度,分析比较振动前、振动后各指标的变化。结果实验组减振效率(75.51%)明显高于对照组(25.42%);2组悬浮红细胞振动后FHb浓度、溶血率、LDH、K~+含量较振动前显著升高(P0.05);振动后实验组FHb浓度、溶血率、LDH含量明显低于对照组(P0.05),而K~+含量2组之间无统计学差异。结论减振装置对血液运输具有较好的减振效果。  相似文献   
9.
10.
目的分析急性上呼吸道感染患者中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的流行特征及临床特点。方法以南方医科大学珠江医院2009年11月至2016年6月收治的具有发热呼吸道症状患者为研究对象,采集鼻拭子标本3446份,提取标本RNA,采用qRT-PCR方法进行RSV检测,并对RSV阳性标本进行临床上常见的7种(14个亚型)呼吸道病毒的检测,以了解混合感染情况。结果共检测患者标本3446份,其中RSV阳性标本672份,总阳性率为19.5%。4个季节中RSV检出率差异具有统计学意义(χ2=133.184,P<0.001),并以春节最高,冬季次之,夏秋两季最少。RSV感染患者随着年龄的增长检出率逐渐降低,并以3岁及以下儿童检出率最高,占RSV阳性标本数的90.8%(610/672),儿童患者检出率明显高于成年患者(χ2=266.433,P<0.001),男性患者检出率明显高于女性患者(χ2=4.940,P=0.026),住院患者检出率明显高于门诊患者(χ2=60.433,P<0.001)。混合感染标本160份,其中双病毒感染标本143份,3种病毒混合感染16份,4种病毒混合感染1份,并以鼻病毒和呼吸道合胞病毒混合感染率最高,住院患者混合感染率高于门诊患者(χ2=20.896,P<0.001)。与非RSV感染者相比,RSV感染者咳嗽、咳痰、气促/呼吸困难等临床症状发生率均较高(χ2_(咳嗽)=108.934,χ2_(咳痰)=60.626,χ2_(气促/呼吸困难)=38.139,均P<0.001),而咽喉痛、头痛、乏力、寒战/畏寒和肌肉酸痛等发生率相对较低(χ2_(咽喉痛)=46.499,χ2_(头痛)=29.516,χ2_(乏力)=16.972,χ2_(寒战/畏寒)=9.616,χ2_(肌肉酸痛)=8.801,均P<0.001)。此外,RSV感染组与非RSV感染组在临床诊断上也存在统计学差异(χ2=212.157,P<0.001)。结论RSV是引起3岁以下儿童呼吸道病毒感染的主要病原体,也是引起3岁以下儿童呼吸道病毒感染住院的主要原因,咳嗽、咳痰及气促/呼吸困难的发生率较高,临床上应加强对该年龄段儿童的防护。  相似文献   
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