白介素-10治疗急性胰腺炎的实验研究

目的：研究白介素－10（IL－10）对急性胰腺炎（AP）病理，生理方面的影响。方法：Wistar大鼠结扎胆胰管汇合末端制作AP模型，随机分为AP对照组及IL－10治疗组（AP加IL－10），治疗组在模型制作后1．5小时腹腔内注入IL－10蛋白10000U，1次／3h，共3次，AP组则注射等量生理盐水，分别于第3，15，27小时断尾取血，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子－α（TNF－α）及血清淀粉酶水平，于27小时断头杀鼠切取胰腺组织，固定切片后以双盲法测出2组的胰腺组织病理学分级，结果：给予外源性IL－10后不同时间点血清TNF－α和淀粉酶均较相应AP组降低，以15小时最为显著，IL－10治疗组胰腺组织各项病理学评分均较AP组有所下降，除胰腺组织水肿外，炎症，空泡样变性及坏死均有显著性差异（P均＜0．05）。结论：IL－10能显著性降低AP的病情严重度，对AP的治疗可能有潜在的临床应用价值。     

32例老年胆囊穿孔的临床分析

对32例老年胆囊穿孔患者进行了回顾性分析，结果表明：1）老年患者临床表现不典型，伴发病较多；2）穿孔发生率和误诊率高（28．1％）；3）有腹膜刺激征者，及时作诊断性腹穿，有胆汁性腹水者系诊断本病的重要依据；4）B超对胆囊穿孔者有较高的检出率（71．9％），有重要诊断价值；5）早期、合理的手术治疗是治疗成败的关键。     

纳米碳在cNO期甲状腺乳头状癌中央区淋巴结清扫手术中的应用

目的研究纳米碳混悬液示踪技术在cN0期甲状腺乳头状癌中央区淋巴结清扫手术中的应用价值。方法将2012年5～10月期间在笔者所在医院科室治疗的68例cN0期甲状腺乳头状癌患者随机分为2组：未使用纳米碳淋巴示踪剂（对照组）32例,使用纳米碳淋巴示踪剂（示踪组）36例,均行甲状腺全切除术、患侧和（或）对侧中央区（Ⅵ区）淋巴结清扫术。比较2组患者的淋巴结清扫数、淋巴结转移情况以及手术相关指标（手术时间、术中出血量、术后引流时间和住院时间）。结果对照组和示踪组分别清扫中央区淋巴结205枚和324枚。其中,对照组手术清扫中央区淋巴结（6．41±1．56）枚／例,示踪组为（8．99±2．24）枚／例,多于对照组（P〈0．001）。对照组的中央区淋巴结转移率为40．6％（13／32）,与示踪组（47．2％,17／36）相比差异无统计学意义（P=0．762）,但示踪组喉返神经内侧区的淋巴结转移率（38．9％,14／36）高于对照组（12．5％,4／32）,P=0．029。2组患者的手术时间、术中出血量、术后引流时间、住院时间、术后切口出血发生率、一过性低血钙发生率及喉上神经损伤发生率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。2组患者术后均随访6个月,均无术后肿瘤复发、转移及死亡发生。结论纳米碳淋巴示踪技术可明显提高cN0期甲状腺乳头状癌患者中央区淋巴结的清扫数目,能比较准确地反映淋巴结的转移情况,从而对肿瘤进行准确的分期,以指导术后治疗,同时不增加（或延长）术中出血量、手术时间、术后住院时间及手术并发症发生率。     

捕获噬菌体酶联免疫吸附法筛选抗去唾液酸糖蛋白受体单链抗体的价值

目的评价捕获噬菌体酶免疫吸附试验法(ELISA)在筛选抗去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)单链抗体(scFv)中的价值。方法以含ASGPR基因的质粒(CRDH1/pET3b)为模板,通过聚合酶链反应扩增获得ASGPRH1亚单位糖识别区基因(CRDH1),定向克隆至原核表达载体pET-32c,并经IPTG诱导表达,其表达产物用Ni2+螯合柱亲和纯化;然后,采用捕获噬菌体ELISA对人源噬菌体抗体库进行筛选和鉴定,同时对筛选的抗CRDH1单链抗体进行DNA测序、表达、纯化和免疫印记鉴定。然后,与间接噬菌体ELISA比较。结果CRDH1/pET-32c在原核系统中经诱导表达出分子量约35000的融合蛋白,且以包涵体形式存在;通过Ni2+亲和柱纯化获得CRDH1融合蛋白后,采用捕获噬菌体ELISA进行四轮筛选,在60个噬菌体克隆中有45株与CRDH1特异性结合,其中仅1株与重组蛋白标签有交叉结合反应。DNA序列分析表明,有9株DNA序列各异,9株可分泌性表达与CRDH1特异性结合的scFv,纯化的scFv也可特异性识别rCRDH1。计算该筛选方法的假阳性率为2%,低于间接噬菌体ELISA筛选的假阳性率(58%)。结论捕获噬菌体ELISA筛选CRDH1特异性scFv可有效降低硫氧还蛋白标签(Trx·Tag)引起的假阳性,提高筛选阳性率,并成功筛选出9株具有rCRDH1特异性的scFv。     

原发性脾肿瘤21例临床分析

目的:探讨原发性脾肿瘤的临床特点、诊断及治疗。方法:回顾性分析1990年1月至2005年9月深圳市第二人民医院和华中科技大学同济医院收治的21例原发性脾肿瘤患者的临床资料。结果:21例原发性脾肿瘤均行手术治疗,其中11例良性病变包含脾血管瘤4例、脾表皮样囊肿、脾炎性假瘤各2例,脾错构瘤、脾假性囊肿、脾肉芽肿性病变各1例;10例恶性肿瘤包含脾原发性非何杰金氏淋巴瘤6例,纤维肉瘤2例,血管肉瘤2例。随访,良性肿瘤患者均无复发;6例非何杰金氏淋巴瘤,除1例术后8个月死于复发外,2例分别随访30个月和45个月未发现复发和转移,3例随访超过5年仍健在,其中1例存活已达12年。纤维肉瘤2例,均生存5年无转移。2例脾血管肉瘤分别于手术后3个月和11个月因肿瘤广泛转移而死亡。结论:原发性脾肿瘤以手术治疗为主,良性肿瘤效果好;原发性非何杰金淋巴瘤结合辅助治疗预后好,恶性肉瘤预后差,早期诊断,根治性手术和综合治疗是提高疗效的关键。     

应用善宁治疗原发性肝细胞癌的研究

肝细胞性肝癌(HCC)在世界范围内都是一种常见的恶性肿瘤。在德国和其他一些西方国家每年的肝癌发病率约为40～60例10万人,其中在德国每年约有4000～6000例新增肝癌患者。最近的研究表明肝细胞性肝癌在发达国家的发病率有所上升。肝细胞性肝癌的临床恶性程度很高,病人的预后较差。     

Th1/Th2平衡在急性胰腺炎中的作用

近年来的研究显示,急性胰腺炎(acute panereatitis,AP)并不是简单的"胰酶自身消化"的结果,而更多的与免疫异常有关.Th细胞是免疫应答的中心细胞,它不但是机体免疫应答的启动细胞,而且其活性对整个免疫应答具有调节作用;Th1/Th2失衡参与了许多疾病的发生和病程演变.本文通过对有关资料的收集,从Th1/Th2失衡的角度解释了AP时的免疫异常,说明AP时全身炎症反应综合征(SIRS)、免疫抑制、胰腺腺泡细胞凋亡以及其后的感染均与"Th1/Th2失衡"有关;AP早期存在"Th1漂移、Th1/Th2失衡",而AP中后期在感染等因素的作用下"Th1漂移"可被逆转.个体化免疫治疗是AP综合治疗的重要组成部分.     

WWOX基因真核表达载体的构建及其在SMMC-7721中的表达

目的克隆人WWOX基因及构建WWOX基因真核表达载体并研究其表达。方法取人新鲜正常肝组织，提取总RNA，采用逆转录-聚合酶联链反应（RT—PCR）扩增WWOX基因，将该基因定向克隆到真核表达载体pEGFP—N1中，构建真核细胞表达载体pEGFP—N1-WWOX，用限制性内切酶酶切分析，DNA序列分析鉴定重组质粒；将测序正确的WWOX基因通过脂质体介导下转染肝癌细胞SMMC-7721。结果重组质粒pEGFP—N1-WWOX经HindⅢ和BamHI双酶切后，获得4700bp片断和1234bp插入片断，序列分析表明插入的片段与Gene Bank发布的序列一致；荧光显微镜下可见转染的SMMC-7721细胞有绿色荧光蛋白的表达。结论成功构建了真核表达载体pEGFP—N1-WWOX，WWOX基因在SMMC-7721细胞内成功表达。     

腔镜辅助甲状腺切除术112例治疗体会

目的 探讨腔镜辅助甲状腺切除手术在甲状腺良性疾病治疗中的作用.方法 回顾性分析2004年1月至2008年6月采用腔镜辅助甲状腺切除术112例病例,总结手术经验和观察术后恢复情况.结果 112例手术均在腔镜辅助下完成,无中转手术.手术时间19～69min,平均43min,均未出现喉返神经短暂性及永久性损伤及甲状旁腺短暂性及永久性功能低下等并发症,术后2～4d出院,美容效果满意.结论 腔镜辅助甲状腺切除术安全可靠,并发症少,美容效果好.