在放射性肾损伤纤维性修复中的分子病理机制

目的为探讨纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)在放射性肾损伤纤维性修复中的作用和意义,揭示其发病的分子病理机制。方法24只雄性健康的Wistar大鼠以30Gy60Coγ线单次双肾局部照射,于照射后4个不同时相点活杀,取肾组织进行常规病理学观察及原位分子杂交,观察PAI-1mRNA表达的变化。结果纤维化的肾组织PAI-1表达较正常对照组增高,与纤维化程度呈正相关。结论PAI-1可能在肾放射性损伤后纤维性修复的发生及发展中起重要的作用。     

肾上腺髓质素对局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠神经元凋亡及早期生长反应基因-1的影响

目的探讨肾上腺髓质素（ADM）对局灶性脑缺血/再灌注（I/R）损伤大鼠神经元凋亡、梗死体积及早期生长反应基因-1（Egr-1） mRNA表达的影响,进一步研究ADM在局灶性脑I/R损伤中的作用。方法将54只SD大鼠随机分为假手术组、I/R损伤组以及ADM股静脉组、颈内动脉组和侧脑室组。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉（MCA）I/R损伤模型,于阻断血流2h后分别经股静脉、颈内动脉和侧脑室3条途径注射ADM进行干预后再灌注22h。应用氯化三苯四唑（TTC）染色法测定梗死体积,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测神经元凋亡,用原位杂交法检测Egr-1 mRNA阳性细胞表达。结果大鼠局灶性脑I/R损伤并经股静脉、颈内动脉、侧脑室注射ADM后,脑梗死体积显著小于I/R损伤组;且颈内动脉和侧脑室注射ADM在减少脑梗死体积方面明显优于股静脉注射ADM（P均〈0.05）。I/R损伤组大鼠缺血侧大脑皮质、海马CA1区凋亡阳性细胞数明显多于假手术组（P均〈0.01）,给予ADM后阳性细胞数显著少于I/R损伤组,以ADM颈内动脉组和侧脑室组更为明显（P均〈0.01）。假手术组大鼠大脑皮质有少量Egr-1 mRNA阳性细胞表达,I/R损伤后缺血侧大脑皮质、海马CA1区Egr-1 mRNA阳性细胞表达多于假手术组（P均〈0.01）,应用ADM的3组大鼠大脑皮质、海马CA1区Egr-1 mRNA阳性细胞的表达明显多于I/R损伤组（P均〈0.01）,但颈内动脉和侧脑室给予ADM组的Egr-1 mRNA阳性细胞表达增高最为明显（P均〈0.01）。结论股静脉、侧脑室和颈内动脉给予外源性ADM能减少神经元凋亡和梗死体积,激活Egr-1 mRNA,对局灶性脑I/R损伤可能有治疗作用。     

核因子κB在佐剂性关节炎大鼠肺组织中的表达

目的　研究核因子κB (NF κB)在佐剂性关节炎 (AA)大鼠肺组织中的表达 ,以探讨类风湿肺的发病机制。方法　通过给大鼠右后足足跖部皮下注射完全弗氏佐剂 (CFA)建立类风湿关节炎 (RA)的动物模型—AA。用蛋白质印迹 (Westernblot)法研究AA大鼠肺组织中活化NF κB蛋白水平 ,用原位杂交法进一步研究AA大鼠肺组织中NF κBmRNA水平 ,用显微图像分析系统对其表达进行定量分析。结果　在AA大鼠肺组织中可见肺泡变形 ,肺泡毛细血管基底膜损伤 ,间质内可见淋巴细胞、浆细胞及巨噬细胞浸润。AA组活化NF κB蛋白水平明显高于正常组 (P <0 0 1 ) ,NF κBmRNA的表达也明显高于正常组 (P <0 0 1 )。NF κBmRNA主要表达于肺内巨噬细胞、浆细胞以及浸入肺间质内的淋巴细胞中。结论　AA大鼠肺组织的病理改变与RA患者肺组织的病理改变相似 ,且NF κB参与AA肺组织的病理过程     

BDNF对哮喘小鼠C7T5节段脊髓后角Kinesin-1表达的上调作用

目的探讨在哮喘发病中,脑源性神经营养因子(BDNF)对哮喘小鼠C7~T5节段脊髓后角内驱动蛋白-1(Kinesin-1)表达的调节作用。方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法均分为正常对照组、哮喘组、Anti-BDNF抗体组,利用AniRes2005肺功能仪测小鼠气道阻力、免疫荧光方法和western blot方法检测各组小鼠C7~T5节段脊髓后角内Kinesin-1的表达。结果哮喘组小鼠吸气阻力和呼气阻力明显高于正常组(P<0.01),与哮喘组相比,Anti-BDNF抗体组吸气阻力和呼气阻力则明显降低;免疫荧光结果显示哮喘组C7~T5节段脊髓后角内Kinesin-1阳性产物的平均光密度值(MOD)显著高于正常对照组(P<0.01);而anti-BDNF抗体组与哮喘组相比,Kinesin-1阳性反应产物的MOD值则明显降低(P<0.01)。western blot方法也得到了相同的结论。结论 BDNF被阻断后,哮喘小鼠C7~T5节段脊髓后角内Kinesin-1的表达降低。     

磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶B在小鼠过敏性气道反应肺组织炎性细胞中的差异表达

目的:探讨丝/苏氨酸蛋白激酶B(Akt)在过敏性小鼠肺组织不同炎性细胞中的活化状况.方法:应用卵蛋白致敏激发BALB/c小鼠制备过敏性气道炎症反应模型,抽取肺泡灌洗液(BALF)进行细胞总数计数和不同炎性细胞分类计数,应用免疫组织化学检测磷酸化Akt(p-Akt)在过敏性小鼠肺组织中不同炎性细胞的表达.结果:过敏性小鼠BALF中总细胞数明显高于正常鼠;分类细胞计数中,正常组以巨噬细胞为主,而过敏性小鼠的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞百分比明显升高;免疫组织化学显示p-Akt在过敏性小鼠气道中嗜酸性粒细胞中表达明显高于淋巴细胞和巨噬细胞,而在淋巴细胞中表达明显高于巨噬细胞.结论:Akt在过敏性小鼠的气道炎症中的作用与炎性细胞的种类密切相关,发挥不同的诱导嗜酸性粒细胞和巨噬细胞增多、趋化、释放炎性细胞因子和对抗淋巴细胞凋亡等重要的作用.     

Akt对哮喘小鼠肺组织VEGF表达的上调作用

目的探讨在哮喘发病机制中,PKB/Akt对哮喘小鼠肺组织VEGF表达的调节作用。方法BALB/c小鼠30只,按随机数字表法均分为正常对照组、哮喘组、PKB/Akt阻断组,免疫荧光、Western blot方法检测各组小鼠肺组织VEGF的表达。结果免疫荧光结果显示:哮喘组肺组织内VEGF阳性产物的平均光密度(MOD)显著高于正常对照组(P<0.01),而PKB/Akt阻断组与哮喘组相比,上述部位VEGF阳性反应产物的MOD值明显降低(P<0.05)。Western blot结果显示:与正常对照组比较,哮喘组小鼠肺组织内VEGF的IDV( integrated density value)与内参照IDV的比值均明显升高(P<0.01),而PKB/Akt阻断组上述部位IL-1β目标带的IDV与内参照IDV的比值均明显低于哮喘组(P<0.05)。结论在NGF介导的哮喘发病机制中,Akt能上调哮喘小鼠肺组织内VEGF的表达。     

地塞米松对哮喘豚鼠肺内、脊神经节及脊髓背角内蛋白激酶C表达的抑制作用

目的探讨地塞米松对哮喘豚鼠肺内、C7～T5脊神经节及对应节段脊髓背角内蛋白激酶C（PKC）表达的抑制作用。方法利用免疫组织化学和Western blotting方法。研究哮喘豚鼠肺内、C7～T5脊神经节及对应节段脊髓背角内PKC的免疫反应变化。结果哮喘组豚鼠肺内、C—L脊神经节及对应节段脊髓背角内PKC平均光密度值明显高于对照组（P〈0．01），而地塞米松组则明显低于哮喘组（P〈0．01）。结论PKC可能参与哮喘的发病过程，地塞米松抑制哮喘豚鼠PKC的表达可能是其治疗哮喘的作用机制之一。     

哮喘豚鼠结状神经节,脊神经节和中枢内神经激肽A含量变化

应用放射免疫分析方法，检测16只哮喘豚鼠一级传入系统和中枢内神经激肽A（NKA）的水平。与正常对照组（结状神经节62．82±11.09pg/gw.w，C7～C8段脊神经节53．78±12．63，T1～T2段脊神经节54．23±19．08，T3~T5段脊神经节50．53±14．23pg／gw．w;C7～T5段脊髓后角45．86±19．56，孤束核55．27±19．68pg/gw．w．和延髓腹侧浅层37.36±18．29pg/gw．w．）相比，哮喘豚鼠一级传入系统和中枢内（结状神经节83．81±15．23pg/gw．w．C7～C8段脊神经节72．11±17．16．T1～T2段脊神经节73．95±23．76，T3～T5段脊神经节70.53±14．23pg／gw．w，C7~T5段脊髓后角60.25±21．38pg／gww．孤束核71．36±18．76pg／gw．w和延髓腹侧线层49．58±20．19pg／gw．w．）NKA水平明显升高（P＜0．05）．这些结果提示，一级传入系统和中枢内的NKA可能参与哮喘的发病机制。     

豚鼠下呼吸道K物质放射免疫及免疫组织化学研究

应用放射免疫分析方法测定了16只豚鼠下呼吸道内K物质的含量。结果表明,肺内含量最高,支气管次之,气管最低。应用ABC免疫酶组织化学方法研究了K物质免疫反应纤维在16只豚鼠下呼吸道的分布,结果指出,K物质免疫反应纤维分布于:1)各级呼吸道粘膜固有层、粘膜下层、平滑肌内及外膜层;2)肺内各级血管壁内平滑肌层,外膜层及二者的交界处,以及血管周围的结缔组织内;3)肺泡隔内。本文并讨论了K物质与某些呼吸道疾病的发病之间可能的联系。     

降钙素基因相关肽对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织P53蛋白表达的调节作用

目的　研究降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织P53蛋白表达的影 响,探讨降钙素基因相关肽对脑组织缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法　用线栓法制备大鼠大脑中动 脉阻塞(MCAO)模型,应用免疫组化和显微图像分析方法检测大鼠脑缺血再灌注后脑组织P53蛋白的表达。 结果　假手术组海马和顶叶内未见P53阳性细胞,脑缺血再灌注组阳性细胞明显增多,注射CGRP后P53阳 性细胞平均灰度值明显高于缺血再灌注组(P<0.01)。结论　CGRP下调缺血神经元P53蛋白的表达,可能 对缺血神经元的恢复有促进作用。