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基于入血成分、网络药理学与实验验证研究策略,探讨左金丸治疗抑郁症的作用机制。采用UHPLC-TOF-MS对左金丸含药血清进行定性分析。采用PharmMapper、GeneCards等数据库获取入血成分及疾病相关靶点,取交集后构建蛋白互作(PPI)网络,筛选核心靶点并进行GO功能和KEGG通路富集分析。采用Cytoscape 3.7.2软件构建“化合物-靶点-通路”网络,预测左金丸抗抑郁的作用靶点与信号通路,并构建CUMS抑郁模型小鼠对关键靶点进行验证。结果显示,共鉴定左金丸入血成分21个,主要为生物碱类化合物。化合物-疾病共有靶点155个,PPI网络分析筛选出核心靶点67个。KEGG富集与PPI网络分析发现,左金丸可能通过AMPK/SIRT1、NLRP3、insulin等靶点与通路发挥抗抑郁作用。动物实验结果表明,左金丸可显著改善CUMS抑郁模型小鼠的抑郁样行为,显著降低海马区和血清中IL-1β、IL-6及TNF-α水平,激活AMPK/SIRT1信号,并降低NLRP3的蛋白表达水平。综上可得,左金丸可能主要通过激活小鼠海马区AMPK/SIRT1信号通路,抑制NLRP3激活及神经炎症,从... 相似文献
2.
目的: 研究异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷与牛血清蛋白的相互作用。 方法: 采用平衡透析法,高效液相色谱测定异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷与牛血清蛋白的结合率。采用同源建模和分子对接技术分析药物相互作用模式。 结果: 异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷与牛血清蛋白的最佳平衡透析时间为16 h,异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷低、中、高(2,4,8 mg·L-1)3个质量浓度的牛血清蛋白结合率分别为(43.23±2.23)%,(45.16±3.12)%,(44.71±3.25)%。牛血清白蛋白同源建模和分子对接结果显示:异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷能够与牛血清白蛋白氨基酸残基形成6个氢键。 结论: 异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷与牛血清发生中等强度的结合。 相似文献
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摘 要 目的:研究大黄蛰虫丸(DZP)对结肠炎相关结直肠癌(CAC)的影响及其可能机制。方法:以C57BL/6小鼠为研究对象,随机分为对照组、模型组,DZP低(2 g·kg-1)、高剂量组(4 g·kg-1)。除对照组外,其余各组采用AOM/DSS诱导小鼠CAC模型,并于造模中各组给予相应的药物灌胃干预。实验结束,比较各组小鼠死亡率,并以ELISA检测小鼠血清IL-1β和IL-18水平;苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织损伤情况;免疫荧光染色分析小鼠结肠Occludin和ZO-1的表达;免疫组化染色分析小鼠结肠ATG5、IL-1β和IL-18的表达水平;蛋白印迹检测小鼠结肠中LC3BⅠ/Ⅱ、SQSTM1及ATG5的蛋白表达水平。结果:经8周灌胃给药,对照组、模型组,DZP低、高剂量组的死亡率分别为0%、40.00%、20.00%、6.67%。与模型组相比,DZP能显著降低血清IL-1β和IL-18水平,提高小鼠肠道组织中Occludin和ZO-1的表达水平。同时,DZP能显著降低模型小鼠结肠组织中IL-1β、IL-18及SQSTM1的表达水平,提高模型小鼠肠道组织中的LC3BⅠ/Ⅱ和ATG5的蛋白表达水平。结论:DZP能显著降低CAC模型小鼠的炎症和死亡率;其作用机制可能与促进CAC模型小鼠肠道自噬改善肠道紧密连接相关。 相似文献
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【】目的:探讨黄芩苷对脂多糖促人牙周膜成纤维细胞炎症因子表达的影响。方法:将培养后的人牙周膜成纤维细胞用不同浓度的黄芩苷处理,CCK8实验观察不同浓度黄芩苷对人牙周膜成纤维细胞的细胞毒性。将培养后的人牙周膜成纤维细胞分为空白对照组、LPS组、黄芩苷组和LPS+黄芩苷组。空白对照组仅加入2%胎牛血清的培养液;LPS组加入加入100μg/mLLPS ;黄芩苷组分别加入黄芩苷200、500ng/mL ;LPS+黄芩苷组加入100μg/mL LPS,同时分别加入黄芩苷 200ng/mL 、500ng/mL。24h收集细胞, 检测各组IL-6、IL-8、IL-1βmRNA表达的变化。结果: 500ng/mL浓度以下黄芩苷添加至细胞没有明显的细胞增殖毒性。单独加入黄芩苷200ng/mL和500ng/mL的黄芩苷组和空白对照组比较,IL-6、IL-8、IL-1β均无明显变化(P>0.05)。 和空白对照组比较,LPS组IL-6、IL-8、IL-1β明显上升,差异有统计学意义 (P<0.05),同时加入LPS和200ng/ml黄芩苷,相比单独加入LPS组,IL-6、IL-8、IL-1β明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。而同时加入LPS和500ng/mL黄芩苷,相比单独加入LPS组,IL-6、IL-8、IL-1β明显上升,差异有统计学意义 (P<0.05) 结论:黄芩苷在低浓度时显示有抑炎作用,而在浓度增加达到500ng/mL时显示有促炎作用。 相似文献
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固相萃取在生物样品分析中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
生物样品中的药物浓度与药物的疗效有很大的相关性,尤其是血浆(或血清)药物浓度直接与药效相关。尿液中常常含有丰富的药物代谢产物,也被经常使用。唾液由于采集方便且有时和血浆游离药物浓度具有相关性而有时使用。其他脏器组织,除特别需要,较少用。生物样品的药物分析因其复杂多样性而对样品的预处理技术提出了较高的要求。在各种处理方法中,固相萃取由于其适用性广,实用性强而越来越受到广大科研工作者的重视。本文综述了固相萃取技术(SPE)及其在生物样品分析中应用的相关报道,以期对相关研究者提供理论指导和技术支持。 相似文献
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目的:建立威麦宁胶囊中原花青素B2、表儿茶素的HPLC测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定原花青素B2、表儿茶素的含量,其标准曲线、精密度、重复性、加样回收率均符合要求。色谱柱:Zorbax SB-C18柱,流动相为乙腈-0.04%磷酸水溶液,梯度洗脱,检测波长为280nm,柱温30℃,流速1.0 mL.min-1,进样量10μL。结果:原花青素B2、表儿茶素的标准曲线分别为A原花青素B2=7047.3C-1066(r=0.9998),A表儿茶素=7321.9C-601.43(r=0.9999),加样回收率分别为93.56%(RSD 4.36%)、99.34%(RSD 4.14%),3个批次威麦宁胶囊中原花青素B2、表儿茶素的平均含量分别为1.44mg/粒、0.96mg/粒。结论:威麦宁胶囊3个批次中2种主要成分的含量相近。该方法简便、准确、重复性好,可为威麦宁胶囊提供质量控制方法。 相似文献
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目的:建立同时测定白香丹胶囊中芍药苷、丹皮酚和α-香附酮在人血浆中含量的方法并测定其体外血浆蛋白结合率。方法:采用平衡透析法计算血浆蛋白结合率。样品经乙酸乙酯萃取,采用LC-MS/MS检测,Phenomenex Luna C18色谱柱(2.0 mm×100 mm,3μm),流动相甲醇-0.1%甲酸水(含2 mmol·L~(-1)甲酸铵)(80∶20),流速0.2 m L·min~(-1)。离子化模式为正离子,定量模式多反应监测模式,毛细管电压4 kV,干燥气温度400℃。检测对象芍药苷m/z 503.2~503.2,裂解电压200 V,碰撞电压0 V;丹皮酚m/z 167.1~120.9,裂解电压100 V,碰撞电压20 V;α-香附酮m/z 218.9~111.0,裂解电压100 V,碰撞电压20 V;毛蕊异黄酮(内标)m/z 285.1~213.1,裂解电压170 V,碰撞电压40 V。结果:白香丹胶囊在低、中、高(56.2,112.5,168.8 mg·L~(-1))质量浓度下,芍药苷的血浆蛋白结合率分别为(24.82±3.91)%,(20.88±2.69)%,(22.40±3.33)%,丹皮酚分别为(88.62±1.68)%,(86.16±2.36)%,(88.73±0.80)%,α-香附酮依次为(80.69±1.12)%,(78.10±2.28)%,(72.57±0.30)%。结论:白香丹胶囊中主要成分芍药苷、丹皮酚及α-香附酮与人血浆蛋白结合率大小排序为丹皮酚α-香附酮芍药苷。 相似文献
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目的采用LC-MS法同时测定清热养心颗粒中的绿原酸、咖啡酸、甘草次酸、氧化苦参碱和薯蓣皂苷元。方法色谱柱为Agilent Zorbax SB C18柱(100 mm×3.0 mm,3.5μm),流动相为水-甲醇(10∶90),柱温40℃,流速0.2 m L·min-1,进样量10μL,离子化方式为电喷雾(ESI),选择性离子检测(SIR),正负离子同时检测,检测电压3.5 k V,离子源温度120℃,脱溶剂温度450℃,脱溶剂气体为N2,体积流量480 L·h-1。结果绿原酸、咖啡酸、甘草次酸、薯蓣皂苷元和氧化苦参碱的线性范围分别为11.60~2.97×103(r=0.9986)、3.05~780(r=0.9958)、1.10~282(r=0.9991)、3.63~930(r=0.9931),0.47~120μg·L-1(r=0.9977)。结论所用方法专属性强、快速灵敏、可用于清热养心颗粒中绿原酸、咖啡酸、甘草次酸、氧化苦参碱、薯蓣苷元等成分的含量测定。 相似文献
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目的 建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测大鼠血浆中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ浓度,研究苍术-香附提取物灌胃后大鼠体内3种活性成分的药动学特征。方法 以苯海拉明为内标,血浆样品采用乙酸乙酯液-液萃取法处理,采用ACQUITY UPLC BEH-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm, 1.7μm),流动相为乙腈-体积分数0.05%甲酸水,通过电喷雾离子源进行正离子扫描,多反应监测技术(multiple reaction monitoring, MRM)检测模式。检测离子:m/z 231.2→185.1(白术内酯Ⅰ)、m/z 233.2→187.1(白术内酯Ⅱ)、m/z 249.2→231.1(白术内酯Ⅲ)、m/z 256.2→167.1(苯海拉明)。利用DAS 3.2.2软件计算药动学参数。结果 白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ的线性范围分别为0.315 0~20.00、0.315 0~20.00、3.150~200.0 ng·mL-1,方法学的各项指标均符合要求。苍术-香附提取物灌胃给药后的3种活性成分的药-时曲线呈双... 相似文献
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目的研究氯吡格雷对人参皂苷Rg1血浆蛋白结合率影响。方法建立人参皂苷Rg1在胎牛血清及透析外液中含量测定方法,随机分成人参皂苷Rg1低、中、高三种浓度单独组(浓度分别为0.4、1.0、5.0 mg/L)和人参皂苷Rg1低、中、高三种浓度合并氯吡格雷组(人参皂苷Rg1浓度依次为0.4、1.0、5.0 mg/L,合并使用2.0 mg/L氯吡格雷),采用平衡透析法观察合并使用氯吡格雷时对人参皂苷Rg1的血清蛋白结合率影响,采用同源模建方法(homology modeling)构建牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)三维构建结构,在此基础上采用分子对接方法观察氯吡格雷和人参皂苷Rg1与BSA间结合效应,观察在血浆蛋白结合率层面的相互作用。结果人参皂苷Rg1低、中、高三种浓度单独组与胎牛血清蛋白结合率分别为(11.2±2.1)%、(13.4±2.2)%、(14.6±1.4)%,人参皂苷Rg1在低、中、高三种浓度合并氯吡格雷组血浆蛋白结合率分别下降,分别为(6.5±2.3)%、(9.2±1.5)%、(12.1±1.7)%,差异有统计学意义(P0.05),分子对接结果显示两个化合物与BSA存在竞争结合效应。结论平衡透析法和分子对接实验综合表明氯吡格雷对人参皂苷Rg1血浆蛋白结合率存在影响作用。 相似文献