骨形态发生蛋白7诱导骨膜细胞体外构骨的超微结构

背景：骨形态发生蛋白被证实有成骨诱导作用,然而关于骨形态发生蛋白7诱导骨膜细胞成骨的超微结构研究尚未见报道。目的：观察骨膜细胞经成骨因子骨形态发生蛋白7诱导后的生物活性及超微结构。方法：实验取材于成人胫骨。分离出原代骨膜细胞后行常规体外培养,实验分为实验组和对照组。实验组加入骨形态发生蛋白7和细胞培养辅助剂,对照组仅仅加入了成骨细胞培养辅助剂。每组分别在第5,10,15天设3个时间点,每个时间点设3个样本,分别行钙结节的染色及采用相差显微镜观察大体形态结构,在透射电镜下观察超微形态结构。结果与结论：实验组和对照组形成的成骨细胞增殖良好,形态一致。细胞早期呈梭形,立体感强,饱满透明,分裂期呈短柱状或立方形,电镜下见成骨细胞内有大量的粗面内质网和高尔基复合体;后期细胞由长梭形逐渐变成宽梭和不规则形,后期射透电镜下可见细胞内有大量基质小泡,有膜包被,胞质内上有碱性磷酸酶及钙结合蛋白,泡内有钙盐结晶,成骨细胞的基底部和侧面出现突起与邻近的骨细胞突起相连。由骨形态发生蛋白7诱导的成骨细胞在体外增殖更快,细胞分裂及成骨速度更快。结果提示骨形态发生蛋白7在体外培养中具有明显增强成骨细胞增殖的能力。     

小容量HSH快速抢救失血性休克家兔的效果以及对其心 肝 肾脏功能的影响

目的 观察小容量高渗氯化钠羟乙基淀粉40(HSH)快速抢救失血性休克家兔的效果及其对心、肝、肾等重要脏器的影响.方法 将家兔随机分成失血性克模型对照组、乳酸林格液(RL)组、HSH组.放血于10 min内使平均动脉压降至40 mm Hg(5.33 kPa)维持60 min.随后对照组不补液;RL组按失血跫3倍体积静脉注入RL,60 min内输完;HSH组按失血量10%静脉注入HSH,2 min内输完,再静脉滴注58 min失血量90%的RL维持.测定休克前、休克后、复苏后不同时间点的各项指标.结果 HSH组家兔存活率明显高于RL组和对照组;复苏后较长时间内HSH组家兔血压和左心室舒张末期压力能维持高值,HSH与RL组谷草、谷丙转氨酶水平均优于对照组;HSH在休克后Cr清除速度优于RL及对照组;复苏对血清离子浓度均没有显著影响,降低了红细胞比容,但对红细胞平均体积没有显著影响.结论 小容量HSH快速抢救失血性休克家兔存活率高,能迅速升高血压和左心室舒张末期压力,并且对心、肝、肾等重要器官的功能无明显不良影响.     

补阳还五汤对全脑缺血再灌注不同时点大鼠皮质神经细胞谷氨酸受体2表达的影响

目的 研究补阳还五汤抗全脑缺血后再灌注损伤的分子机制.方法 将SD大鼠随机分为3组,即正常组、模型组和药物组(补阳还五汤预干预),模型组和药物组再分别设置2、12、24、48、72 h五个观察时间点.连续给药5 d后,采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法复制全脑缺血大鼠模型,再灌注后2、12、24、48、72 h分别检测各组大鼠皮质神经细胞谷氨酸受体2(glutamate receptor 2,GluR2)的表达水平.结果 与正常组比较,再灌注各时点模型组大鼠大脑皮质神经细胞GluR2表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,再灌注各时点药物组GluR2表达水平显著升高(P<0.01);与再灌注2 h比较,再灌注12、24、48、72 h药物组GluR2表达水平显著升高(P<0.01).结论 补阳还五汤可预防大鼠脑缺血再灌注引起的GluR2表达减少,且在再灌注2 h后这种抑制作用更强.     

17β-雌二醇对新生牛血清诱导的血管平滑肌细胞增殖反应的影响及其机制

目的：探讨雌甾-1,3,5（10）-三烯-3,17β-二醇（17β-雌二醇）对新生牛血清诱导血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖反应的影响及其机制。方法：用新生牛血清刺激培养的VSMCs增殖,MTT法检测17β-雌二醇对新生牛血清诱导的VSMCs增殖的影响,并用Western blot检测caveolin-1蛋白,诱导型一氧化氮合酶（iNOS）及NO在此过程中的变化。结果：与对照组比,新生牛血清可促进VSMCs增殖（P〈0.05）,17β-雌二醇作用24 h后能明显抑制上述作用（P〈0.05）;17β-雌二醇预处理可抑制新生牛血清诱导的VSMCs中caveolin-1,iNOS蛋白表达下降及NO释放（P〈0.05）;17β-雌二醇受体阻断剂1-{4-[2-（n,n-二甲氨基）乙氧基]苯}-1,2-二苯-1-丁烯（他莫昔芬）预处理可部分逆转17β-雌二醇的抑制作用（P〈0.05）。结论：17β-雌二醇通过其受体可抑制新生牛血清诱导的VSMCs增殖,此过程与上调caveolin-1蛋白表达,激活iNOS,增加NO释放有关。     

白藜芦醇通过TRPC1抑制血管平滑肌细胞增殖作用研究

目的研究白藜芦醇(Resveratrol,RSV)通过瞬时受体电位C1通道(transient receptor potential canonical-channel 1,TRPC1)来抑制血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的机制。方法采用血管环培养法观察RSV对胎牛血清(fetal calf serum,FBS)诱导的血管壁损伤的影响;MTT法检测RSV对VSMCs增殖的影响;q PCR法检测RSV对TRPC1 m RNA表达的影响;Western Blot法检测RSV对TRPC1蛋白表达的影响。结果与模型组比较,RSV在20~200μmol·L~(-1)范围内,可改善高血清诱导的血管壁损伤和管壁增厚现象;RSV可降低FBS诱导的VSMCs增殖(P0.01),以200μmol·L~(-1)浓度最为显著,此作用可被TRPC1抑制剂SKF96365所阻断;RSV各浓度组的TRPC1 m RNA及蛋白相对表达量显著降低(P0.01)。结论 RSV抑制VSMCs的增殖可能通过影响TRPC1靶点来实现。     

雌激素膜快速效应对兔血管平滑肌细胞iNOS快速激活的影响

目的 探讨17β-雌二醇（17β-estradiol,E2）通过快速激活诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）的活性,调节细胞外信号调节激酶（mitogen-activated protein kinase,p42/44 MAPK）表达抑制血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖的机制。方法 在培养的VSMCs的基础上,采用放射免疫测定法(RIA)和Western blot检测E2预处理前后胎牛血清（fetal calf serum,FCS）对VSMCs中诱导型iNOS的活性及磷酸化p42/44 MAPK蛋白和p42/44 MAPK总蛋白表达的影响。采用比色法检测E2预处理后VSMCs中NO含量的变化。结果 E2预处理5 min,即可逆转FCS诱导的iNOS活性下降,此效应在E2预处理15 min时达到高峰,处理30 min后此效应减弱。基因转录抑制剂放线菌素D（actinomycin D,Act D）预处理后对此过程无影响,而三苯氧胺预处理可明显逆转E2诱导的iNOS活性增加。比色法检测上清液中NO的含量显示,E2预处理15 min,NO的含量明显增加。Western blot的结果显示,E2预处理15 min,可明显抑制磷酸化p42/44 MAPK蛋白的表达,而对总p42/44 MAPK蛋白的表达无影响。NO合酶(NOS)抑制剂L-硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)预处理,可逆转E2诱导的磷酸化p42/44 MAPK的表达下降。结论 E2可通过快速激活iNOS增加NO释放,下调磷酸化p42/44 MAPK的活性,抑制VSMCs增殖。     

TBL教学在生理学教学中的应用

TBL（Team-based learning）教学是一种基于PBL（Problem-bosed learning）的强调以小组为单位的集体性学习,对提升整个组织的学习能力,创新能力和可持续发展能力具有十分重要的作用。本研究通过在生理学适当章节推行TBL教学,并和传统教学方法进行研究对比。结果提示TBL教学可培养学生的学习兴趣及学习积极性,使学生掌握科学的学习、思维方法,并增强团队合作能力;同时也促进了师生间的相互交流,提高了生理学教学质量。     

川芎嗪联用硝酸甘油治疗冠心病疗效观察

受川芎嗪抗血小板聚集、扩张小动脉治疗闭塞性脑血管病〔1〕之启发 ,笔者采用川芎嗪与硝酸甘油联用治疗冠心病 (CHD) 40例 ,探讨川芎嗪在 CHD治疗中的作用机制。1　对象与方法1 .1 　 对象我科 1 998～ 2 0 0 0年住院的 CHD患者 80例 ,其诊断符合文献 [2 ]标准。将其随机分为治疗组与对照组。治疗组 40例 ,男 3 1例 ,女 9例 ,年龄 47～77(平均 6 7)岁。其中心绞痛 1 1例 ,急性心肌梗死(AMI) 5例 ,心力衰竭 2 4例 ;心功能 (NYHA) 级2例 , 级 1 3例 , 级 9例。对照组 40例 ,男 3 4例 ,女 6例 ,年龄 44～ 80 (平均 6 6 )岁。其中心绞痛…     

补阳还五汤对全脑缺血再灌注后大鼠皮层神经元NR1 mRNA表达的影响

目的观察补阳还五汤对全脑缺血再灌注后大鼠皮层神经元NR1 mRNA表达的影响,研究补阳还五汤抗全脑缺血后再灌注损伤的分子机制。方法 SD大鼠随机分为3组,即正常组、模型组和药物组(补阳还五汤预干预),模型组和药物组再分别设置2,24h两个观察时间点。连续给药5 d后,采用改良的Pulsinelli四血管闭塞法复制全脑缺血大鼠模型,再灌后2,24 h采用RT-PCR技术检测各组大鼠皮质神经细胞NMDA受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor)亚单位NR1的mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组2h,24h等2个不同时间点,NR1的mRNA表达水平显著升高(P0.05);与模型组比较,药物组再灌注后2h,24h等2个不同时间点,NR1 mRNA表达水平显著降低(P0.01)。结论补阳还五汤预干预对全脑缺血再灌注模型大鼠大脑皮层神经元NR1 mRNA表达水平的增高有调低作用。