犬骨髓间质干细胞体外诱导及非诱导培养后向心肌细胞的分化

目的:骨髓间质干细胞体外诱导和非诱导培养向心肌细胞分化的结果的对比。方法:实验于2003-03/2004-12在阜外心血管病医院中心实验室完成。①分离犬骨髓间质干细胞。②于体外培养,应用不同浓度(0,6,8,10,12,14,20μmol/L)的5-氮胞苷定向诱导并连续传代培养4周,未诱导的细胞培养8周。③进行细胞形态学、细胞免疫组织化学、透射电镜鉴定。结果:①骨髓间质干细胞于5-氮胞苷诱导培养2周时,α-肌动蛋白、TroponinI染色阴性;4周时,α-肌动蛋白染色阳性,TroponinI阴性;电镜下可见肌丝结构,其中8mmol/L5-氮胞苷诱导的间质干细胞肌丝结构排列较规则。②骨髓间质干细胞非诱导培养8周时,α-肌动蛋白染色阳性,TroponinI阴性,电镜下亦可见肌丝结构形成;而培养4周时全部为阴性。结论:骨髓间质干细胞经5-氮胞苷诱导培养4周及未诱导连续培养8周均可定向转化为具有肌丝结构的肌样细胞,而非心肌样细胞。     

光学相干断层成像技术评价猪冠状动脉佐他莫司洗脱支架术后早期新生内膜覆盖情况

目的:应用光学相干断层成像(OCT)、病理和扫描电镜评价猪冠状动脉佐他莫司洗脱支架(ZES)术后早期(7天、14天、28天)新生内膜覆盖情况。方法:18只中华小型猪随机分为7天组、14天组和28天组,每组6只,每只猪于右冠状动脉置入一枚佐他莫司洗脱支架,3组实验动物分别于术后7天、14天及28天时进行OCT检查,观察支架表面新生内膜覆盖情况,并取支架段冠状动脉进行病理组织学检查及扫描电镜观察。结果:用OCT观察3个时间段支架表面新生内膜情况,7天组为(61.3±37.7)μm,14天组为(132.6±103.3)μm,28天组为(244.3±282.3)μm,3组间差异有统计学意义(P<0.001),新生内膜覆盖率7天组为(53.62±2.49)%,28天组达到(94.88±2.93)%,病理提示7天时新生内膜以炎性细胞、红细胞、血小板为主,28天时以平滑肌细胞、炎性细胞和血管内皮细胞为主。结论:OCT在支架术后7天即能清晰观察到新生内膜覆盖情况,佐他莫司洗脱支架术后28天大多数支架丝被新生内膜覆盖。     

犬骨髓间质干细胞体外诱导及非诱导培养后向心肌细胞的分化

目的：骨髓间质干细胞体外诱导和非诱导培养向心肌细胞分化的结果的对比。方法：实验于2003-03／2004-12在阜外心血管病医院中心实验室完成。①分离犬骨髓间质干细胞。②于体外培养，应用不同浓度（0，6，8，10，12，14，20μmol／L）的5-氮胞苷定向诱导并连续传代培养4周，未诱导的细胞培养8周。③进行细胞形态学、细胞免疫组织化学、透射电镜鉴定。结果：（D骨髓间质于细胞于5-氮胞苷诱导培养2周时，α-肌动蛋白、TroponinI染色阴性；4周时，α-肌动蛋白染色阳性，Troponin I阴性；电镜下可见肌丝结构，其中8mmol／L 5-氮胞苷诱导的间质干细胞肌丝结构排列较规则。②骨髓间质干细胞非诱导培养8周时，α-肌动蛋白染色阳性，Troponin I阴性，电镜下亦可见肌丝结构形成；而培养4周时全部为阴性。结论：骨髓间质干细胞经5-氮胞苷诱导培养4周及未诱导连续培养8周均可定向转化为具有肌丝结构的肌样细胞，而非心肌样细胞。     

AT1受体阻断剂络萨坦对大鼠急性心肌梗死左室重构的防治作用

目的评价络萨坦对大鼠急性心肌梗死(AMI)左室重构的防治作用.方法AMI雌性SD大鼠41只随机分成AMI组(n=19)和络萨坦[3mg/(kg     

一氧化氮合酶在吸烟导致慢性阻塞性肺疾病中作用机制的初步观察

目的 建立吸烟引起慢性阻塞性肺疾病（COPD）的地鼠模型,观察一氧化氮合酶（NOS）在肺内的表达情况,以探讨NOS在吸烟导致COPD中的作用机制。方法 雄性叙利亚金黄地鼠15只,每天吸烟2次,每次10支香烟。每周5d,连续3个月。同时设不吸烟正常对照组10只。分别于吸烟1个月、2个月和3个月后处死动物,行肺组织病理学检查并应用显微－微机图象处理系统进行形态定量。应用免疫组化方法观察肺内诱生型NOS（iNOS)和内皮型NOS（eNOS)的表达情况。结果 吸烟组于3个月时出现慢性支气管炎和肺气肿的病理改变,免疫组化结果表明支气管上皮及肺泡巨噬细胞iNOS呈强阳性表达,eNOS则呈弱阳性表达。结论 吸烟可引起iNOS的过量表达,引起肺部损伤,导致COPD的发生,同时大量吸烟可导致肺内小动脉内皮细胞eNOS的表达减弱,有能引起肺动脉压的升高。     

中药脑肺康对大鼠缺氧性肺动脉高压治疗作用的探讨

目的：探讨中药脑肺康对大鼠缺氧性肺动脉高压的治疗作用及其机理。方法：设立对照组、常压缺氧模型组、脑肺康3个剂量给药组及西药合心爽对照组，用免疫组化法观察肺内血红素氧合酶（HO）－1、内皮型和诱生型一氧化氮合酶（eNOS和iNOS）表达的变化。结果：脑肺康中、大剂量组有明显减轻肺动脉高压性结构重塑、保护血管内皮细胞的功能，可能是通过促进eNOS表达和抑制HO－1、iNOS的表达发挥作用。结论：脑肺康对血管内皮及超微结构的保护作用优于合心爽。     

吸烟导致慢性阻塞性肺疾病地鼠膜型的建立及中药脑肺康的防治作用

为了探讨脑肺康对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的防治作用,将金黄地鼠分为对照组、吸烟组和脑肺康防治组(脑肺康组).脑肺康组于吸烟前15天给予脑肺康灌.吸烟组和脑肺康组均放入吸烟箱中,每次燃烧10支香烟,每天2次,每周5天,连续3个月.于吸烟3个月后测定血清中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,行肺组织病理学检查.结果,吸烟组出现了COPD的病理改变,血清MDA含量高于对照组,SOD含量低于对照组;脑肺康组COPD病理改变较轻,MDA含量低于吸烟组,SOD含量低于对照组;脑肺康组COPD病理改变较轻,MDA含量低于吸烟组,SOD含量高于吸烟组.表明吸烟能成功复制出COPD模型,脑肺康对其具有防治作用.     

新型中药复方制剂防治CoxB3感染小鼠急性实验性心肌炎的形态定量学研究

目的观察新型中药复方制剂心康口服液预防和治疗柯萨奇B3 (CVB3m)感染小鼠急性病毒性心肌炎形态学及形态定量学改变的作用.方法将小鼠随机等分为模型组、阳性药(干扰素、Ribavilin)对照组、心康口服液组及正常对照组,并腹腔接种CVB3m病毒液建立病毒性心肌炎模型.预防组在用药2d后建立病毒性心肌炎模型,连续用药20-22d,观察比较第5、10和20d小鼠心脏肉眼及组织形态学改变并进行形态定量学测量,所得数据用SPSS/PC软件包作统计学处理.结果心康口服液中、小剂量组及干扰素组第20d时心脏表面重度病变检出率与病毒组有显著意义P＜0.01;心肌组织重度损伤(心肌细胞大片坏死崩解)检出率第20d时均低于病毒感染对照组、Ribav-ilin对照组及干扰素对照组,其中,中、小剂量组与病毒组有显著意义P＜0.0l;心肌病变面积/全心面积比值第10d及20d时心康口服液中、小剂量组及干扰素对照组与病毒对照组有显著意义P＜0.01;平均病变面积预防用药第10d及20d,治疗用药第20d心康口服液中、小剂量组及干扰素组与病毒感染对照组有显著意义P＜0.0l.结论心康口服液对CVB3m病毒感染小鼠的预防性及治疗性给药可保护心肌,减轻心肌损伤及促进损伤心肌修复,其预防作用类似干扰素,治疗作用优于Ribavilin,预防用药疗效较治疗用药为好.     

外源基因在低温保存后同种带瓣大动脉中的表达

目的观察外源性基因在低温保存不同时间后的同种带瓣大动脉中的表达。方法将30只幼兔的同种带瓣大动脉分为5组,分别在4℃营养液中（M199）保存2、6、12、24、72h。保存后将每组中的5个同种带瓣大动脉浸入300μl含重组腺病毒(Ad5CMVLacZ)的DMEM液中,而另1个则浸入300μl不含重组腺病毒的DMEM液中,均在室温下放置30min,然后分别移植于15只成兔受体的两侧颈动脉。术后5d取出移植物,进行组织化学染色。结果所有转染重组腺病毒的同种带瓣大动脉均有不同程度的基因表达,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组阳性细胞平均表达量分别42.6±8.5、38.2±12.7、34.5±10.2、31.6±9.6、36.4±13.2;组间转基因细胞表达量差异无显著性（P＞0.05）。对照组均为阴性。结论对低温保存不同时间后的同种带瓣大动脉进行转基因是可行的。     

心康口服液预防小鼠病毒性心肌炎的实验研究

目的 探讨心康口服液预防小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的作用。方法 心康口服液预防性用药2d后的小鼠经腹腔感染CVB3,以诱发急性病毒性心肌炎模型,持续用药至20d,观察小鼠于感染不同阶段的心肌组织形态学改变并进行形态定量分析,所得数据用SPSS／PC软件包作统计学处理。结果 心康口服液各剂量组的心脏表面重度病变检出率显著低于病毒对照组（P＜0.01）;心肌组织重度损伤（心肌细胞大片坏死崩解）的检出率均低于病毒组及干扰素组,其中中剂量组与病毒组差异显著（P＜0.01）;心肌平均病变面积、病变面积／全心面积比值第20d时心康组与干扰素组均与病毒组差异显著（P＜0.01）,第5d时心康各剂量组与病毒组差异显著（P＜0.01）。结论 心康口服液预防性给药可保护心肌,减轻心肌损伤及促进损伤心肌恢复,其预防柯萨奇B3病毒性心肌炎的作用类似干扰素。