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1.
目的 探讨小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因提取、鉴定及重组质粒转染COS-7细胞表达.方法 通过RT-PCR获取小鼠骨骼肌IGF-1的cDNA,将该基因亚克隆入重组质粒p1 (pcDNA3.1-Nestin-EGFP)中,构建重组质粒p2 (pcDNA3.1-Nestin-EGFP- IGF-1),脂质体转染COS-7细胞,ELISA检测细胞培养基中IGF-1蛋白量.结果 克隆IGF-1基因cDNA与GenBank中该基因序列一致,重组质粒转染COS-7细胞培养基中均含有IGF-1蛋白.结论 IGF-1基因成功构建到重组质粒p2中,且能在COS-7细胞中过表达.  相似文献   
2.
目的:构建含有小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的慢病毒载体,鉴定其在神经干细胞(NSCs)中的表达。方法:采用RT-PCR方法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增IGF-1基因,克隆入pcDNA3.1质粒,构建慢病毒载体pXZ9-IGF-1。用脂质体介导三质粒共转染法转染293FT细胞,获得病毒上清。分离培养神经干细胞,Nestin免疫荧光化学鉴定。慢病毒感染神经干细胞,显微镜下观察GFP表达情况,通过RT-PCR及ELISA试剂盒分别从mRNA和蛋白水平检测IGF-1的表达。结果:通过RT-PCR法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增出IGF-1基因并克隆入pcDNA3.1载体,经亚克隆成功构建慢病毒质粒pXZ9-IGF-1。质粒经脂质体转染293FT细胞获高滴度慢病毒颗粒,体外高效感染神经干细胞。神经干细胞经感染后,IGF-1基因mRNA和培养基中蛋白水平均高表达。结论:成功构建含小鼠IGF-1基因的慢病毒载体pXZ9-IGF-1,并在神经干细胞内获得表达。  相似文献   
3.
为探讨小鼠皮肤体外长期保存的方法,选择清洁级8周龄雄性昆明小鼠40只,随机数字表法分为冷冻皮肤移植组(30只)和新鲜皮肤移植组(10只)。皮肤冷冻采用二步法冷冻,用冷冻液EFS40对皮肤进行快速玻璃化冷冻,用0.5 mol/L蔗糖液解冻,解冻后小鼠皮肤自体移植,冷冻皮肤移植组于2周后接受经过冷冻解冻处理后自体皮肤移植,移植时在脊柱的另一侧剪去略小于植片的皮肤,将皮片平铺于植床上,吻合后缝合。新鲜皮肤移植组备皮后,将皮片置于杜氏磷酸缓冲液中15 min后移植于原来部位。移植14,28d进行移植效果的评价。结果表明,①新鲜皮肤移植成活率达到100%(10/10)。②解冻后皮肤移植14,28d成活率分别为77%(23/30),70%(21/30)。冷冻过程也造成小鼠皮肤表皮层和毛囊部分细胞损伤。因此,小鼠皮肤快速冷冻可以作为一种皮肤体外保存的方法。  相似文献   
4.
小鼠胚胎冷冻研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 探讨小鼠胚胎冷冻保存方法。方法 用EG40、ES40、EFS403种冷冻液进行小鼠胚胎快速冷冻,比较解冻后胚胎的发育率、孵化率、着床率。结果 EFS40冷冻液冷冻效果最好,与对照组相比无明显差异;ES40其次,EG40效果最差。结论 EFS40冷冻液适合用于小鼠胚胎冷冻保存。  相似文献   
5.
目的 探讨不同有氧运动方式对2型糖尿病小鼠血糖和血清胰岛素的影响.方法 将40只C57BL/6J小鼠分为4组:正常组(A组),糖尿病游泳1组(B组),糖尿病游泳2组(C组),糖尿病非运动组(D组),每组10只.高脂饲料饲养小鼠4周,B组、C组和D组小鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ),获得糖尿病模型小鼠.B组每日游泳1次,连续游泳90min;C组每日游泳2次,每次45min;B组、C组游泳时间为6周,A组和D组不做游泳运动.血糖仪检测血糖浓度,碘[125I]胰岛素放射免疫分析血清胰岛素的变化.结果 C组血糖浓度明显低于B组和D组[(14.64±2.69)mmol/L,(19.22±3.28)mmol/L,(27.35±2.88)mmol/L,P<0.05];C组血清胰岛素明显低于D组[(36.95±14.66)mU/L,(55.24±18.42) mU/L,P<0.05].结论 每日2次各45 min的有氧运动对改善2型糖尿病小鼠血糖及胰岛素水平具有一定疗效.  相似文献   
6.
作为江苏省3个开放性动物实验中心之一,我中心在近3年的工作中取得一定成绩,在管理上积累了一些经验。本文报告中心3年来硬件与软件建设和具体管理工作的成绩和存在的问题。  相似文献   
7.
PRRSV人工单独感染及其与PCV2人工联合感染的病理学比较   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的 比较猪繁殖与呼吸综合征(P褂毽)和断奶仔猪多系统萎缩综合征(PMWS)的病理学变化。方法 用PRRSV ATCCV VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染了2头3周龄仔猪,同时设立了3头健康对照猪。在攻毒前后分别于耳缘静脉采血,用Herd Chek IDEXX Kit测其血清抗体。PRRSV和PCV2联合感染猪分别在感染后1周、3周剖杀,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1周、2周和3周剖杀。剖杀后采集肺、脾、扁桃体和腹股沟淋巴结,用甲醛溶液固定,组织石蜡切片以观察显微病理变化。结果 剖检结果和石蜡切片结果均显示了试验猪在攻毒后发生程度不一的问质性肺炎及相应的显微病变。结论 PRRSV和PCV2联合感染引起的病变比PRRSV单独感染要严重。  相似文献   
8.
目的比较分析各麻醉方式的麻醉效果。方法将戊巴比妥钠配制成3%的浓度,并分别以静脉(30mg/kg)、肌肉(30mgk/g)、腹腔(30mgk/g)、皮下(40mgk/g)的剂量对兔和大鼠施行麻醉。记录实验中每只动物的麻醉时间、睡眠时间、麻醉后睫毛反射、刺痛反应、体温、呼吸频率及苏醒后恢复时间等,统计平均数据。结果兔进入麻醉状态时间m(in)为静脉(0)、肌肉(16)、腹腔(6)、皮下(17),睡眠维持时间m(in)为静脉(72)、肌肉(46)、腹腔(58)、皮下(89),恢复时间m(in)为静脉(41)、肌肉(26)、腹腔(28)、皮下(41)。大鼠进入麻醉状态时间m(in)为静脉(3)、肌肉(13)、腹腔(5)、皮下(12),睡眠时间(min)为静脉(44)、肌肉(39)、腹腔(72)、皮下(82),恢复时间m(in)为静脉(16)、肌肉(18)、腹腔(25)、皮下(28)。结论实验者在实验时,可通过本文所给数据,根据手术过程的长短的需要和理想的恢复期选择上述不同的麻醉方式对实验动物施行麻醉。  相似文献   
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