儿童呼吸道感染流感嗜血杆菌的耐药性分析

目的：探讨儿童呼吸道感染流感嗜血杆菌的临床特征及对抗菌药物的耐药性,指导临床合理用药。方法对本院2012年儿科住院及门诊患者呼吸道标本分离到的50株流感嗜血杆菌进行回顾性调查分析。结果50株流感嗜血杆菌耐药率较高的药物为复方新诺明（56.0%）、氨苄西林（52.0%）及头孢噻吩（38.0%）,未发现β-内酰胺酶阴性耐氨苄西林的流感嗜血杆菌;敏感率较高的药物为利福平（98.0%）、阿奇霉素（98.0%）、氯霉素（96.0%）、头孢噻肟（96.0%）、阿莫西林/棒酸（94.0%）、氧氟沙星（92.0%）、四环素（90.0%）等。结论复方新诺明、氨苄西林及头孢噻吩对流感嗜血杆菌耐药率较高,不宜用于临床治疗,多重耐药现象应引起重视。临床治疗可优先考虑阿奇霉素、阿莫西林/棒酸、头孢噻肟。     

抗人非小细胞肺癌单克隆抗体对肺腺癌抑制作用的实验研究

目的:研究抗人非小细胞肺癌单克隆抗体(单抗)NJ488-1对肺腺癌的体内外抑制作用。方法:将人肺腺癌细胞SPC-A1分别与不同浓度(0、200、400、800、1 600、2 000μg/ml)的单抗NJ488-1在双层琼脂中共同培养2周,计算克隆形成率、抑制率;建立人肺癌移植瘤动物模型,腹腔注射不同剂量(200、400、800μg)单抗或生理盐水,作为单抗组和对照组,测量肿瘤体积,3周后处死小鼠,称量肿瘤湿重,计算抑瘤率;400μg/ml单抗与SPC-A1细胞作用24、48 h后,观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:软琼脂克隆形成试验中,200μg/ml单抗作用SPC-A1细胞2周后克隆抑制率为23.4%,400μg/ml达62.5%,800μg/ml及以上浓度抑制率达100%;裸鼠移植瘤实验,400、800μg单抗组平均肿瘤体积显著小于对照组(P=0.004,P=0.003);4组小鼠平均瘤重组间差异有统计学意义(P=0.044),其中400、800μg单抗组平均瘤重显著低于对照组(P=0.032,P=0.015),200μg和800μg单抗组间也存在显著差异(P=0.048),200、400、...     

肺癌细胞抑制CD4+T细胞 IFN-γ基因表达的机制研究

目的:研究肺癌细胞能否直接影响CD4+T 细胞干扰素-γ(IFN-γ)基因启动子甲基化水平?方法:ELISA法检测肺癌组(n = 30)及健康对照组(n = 30)血浆IFN-γ水平;免疫磁珠分选两组外周血CD4+T 细胞(n = 8),提取DNA后经亚硫酸氢盐修饰,PCR扩增 IFN-γ基因启动子进行TA克隆测序,测序结果采用生物信息学软件进行分析;建立健康人CD4+T 细胞与肺腺癌细胞株SPC-A1体外Transwell共培养体系(n = 6),并设健康人CD4+T 细胞单独培养为对照组,培养5 d后分别收集CD4+T 细胞?CD4+T 细胞按上述法进行TA克隆测序?同时CD4+T 细胞经anti-CD3?anti-CD28刺激6?24 h,ELISA法检测两组上清IFN-γ表达水平,RT-PCR检测CD4+T 细胞IFN-γ mRNA表达水平?结果:肺癌组血浆IFN-γ水平显著低于健康对照组[(69.30 ± 38.56) pg/ml vs (92.62 ± 34.75) pg/ml,P = 0.017];肺癌组CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平显著高于健康对照组(84.6% vs 68.6%,P < 0.001);肺癌患者血浆IFN-γ水平与其基因启动子甲基化率呈负相关(r = -0.850 3,P = 0.010 7)?体外Transwell共培养实验中,与对照组相比,实验组CD4+T 细胞anti-CD3?anti-CD28刺激6?24 h,IFN-γ表达水平显著下降[6 h:(14.53 ± 7.12) pg/ml vs (36.14 ± 23.51) pg/ml,24 h:(7.81 ± 4.02) pg/ml vs (24.85 ± 15.58) pg/ml],6 h对照组CD4+T 细胞IFN-γ mRNA表达水平为实验组的2.37倍?实验组CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平显著高于对照组(85.4% vs 70.9%)?结论:肺癌细胞可诱导CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子发生高甲基化,进而导致IFN-γ基因表达下调,可能对肺癌患者的免疫抑制起重要作用?     

溧阳市孕产妇艾滋病、梅毒和乙型肝炎病毒检测与分析

目的:调查溧阳市孕产妇艾滋病、梅毒和乙型肝炎病毒的感染状况,研究孕产妇接受血清检测的结果并分析其临床作用。方法:对2012年1月-2012年12月于我院保健的1032名孕产妇产前进行抗-HIV、抗-HCV、TPPA、乙肝二对半检测。结果:1032名孕产妇中,早期检查145例,所占比例为14.05%,中期及晚期检查887例,所占比例为85.96%;所有产妇均无抗-HIV阳性,TTPA、HBsAg检测的阳性率各自为1.74%、23.74%。结论:本市孕产妇主要表现为乙型肝炎病毒感染,梅毒感染率较低,尚未发现HIV感染的孕产妇;早期的检验率偏低。经过检查孕产妇的感染性血清标志物,孕妇应当尽早进行检验且及早发现传染病是预防母婴传播的有效措施。     

肿瘤远处转移与血浆DNA水平相关性研究

目的:探讨肿瘤转移与血浆DNA水平之间的关系,评价早期诊断肿瘤转移的方法。方法:将人肺腺癌SPC-A1细胞接种到BALB/c小鼠腹腔,每周定期检测血浆DNA水平,7周后处死小鼠,观察肿瘤形成及转移情况。结果:小鼠血浆DNA水平呈升高趋势的占75.6%(34/45只);其中接种后第3周起血浆DNA水平均比接种后第1周显著升高(P﹤0.05)。血浆DNA水平升高及持续升高组小鼠中有肺转移瘤形成的占73.5%(25/34只)。无升高组小鼠中有肺转移瘤形成的占27.3%(3/11只)。血浆DNA水平升高组及持续升高组均显著高于无升高组(P﹤0.05)。血浆DNA水平与肿瘤负荷正相关(R2=0.8703)。结论:形成肺转移瘤的BALB/c小鼠血浆DNA水平在早期即显著升高,血浆DNA水平可用于肿瘤转移的早期监测。     

抗人非小细胞肺癌单克隆抗体的制备及鉴定

摘要：目的：制备抗人非小细胞肺癌（NSCLC）的单克隆抗体(McAb),并对其生物学特性及特异性进行鉴定。 方法：以人肺腺癌细胞株SPC-A1为抗原,免疫BALB/c小鼠,常规细胞融合,间接细胞ELISA法筛选阳性细胞克隆;多种细胞间接ELISA及间接免疫荧光法鉴定其特异性;western blot分析其特异性结合抗原的相对分子量;免疫组化染色分析单抗的组织特异性。 结果：得到1株高效价的、稳定分泌IgG1抗人NSCLC单抗的细胞株（NJ488-1）,纯化后效价为2×10⁶;间接细胞ELISA 及间接免疫荧光法证实NJ488-1能特异地识别肺癌细胞系,其识别抗原定位于SPC-A1细胞胞浆区;western blot显示NJ488-1特异性结合的抗原相对分子量(Mr)为70 000左右;免疫组化结果表明NJ488-1与NSCLC组织有强阳性反应。 结论:成功地制备并鉴定了抗人NSCLC单抗NJ488-1,为肺癌的进一步研究及NJ488-1的临床应用奠定了基础。     

溧阳地区HPV感染情况及基因亚型分析

目的分析溧阳地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染及基因型分布情况,为区域性HPV疫苗的研发和宫颈癌的防治提供依据。方法收集2017年9—12月来我院就诊的831例女性宫颈脱落细胞标本,通过荧光PCR法检测HPV基因亚型。结果在被调查的831例女性中,161例检出HPV感染,总感染率为19.37%,其中单一感染和混合感染率分别为85.71%和14.29%,最常见的4种高危亚型分别是HPV52(24.85%)、16(17.39%)、58(17.39%)和18(7.45%);55岁年龄组HPV感染率最高(31.87%),其次为≤30岁组(21.95%),各年龄组HPV感染率之间对比,差异有统计学意义(P0.05)。结论本地区流行的HPV亚型主要是52、16、58和18型,符合HPV亚型分布的区域性特征;研发与主要型别高度相关的HPV疫苗,综合考虑成本及覆盖人群,能够有效降低本地区宫颈癌的发病率。