张赤志治疗湿热型慢性乙型肝炎经验

<正>张赤志教授系湖北中医药大学附属医院主任医师,博士生导师,湖北省知名中医,从事肝病临床、教学、科研工作40余年,学验俱丰,擅长中西医结合诊疗肝病。笔者有幸跟师学习,获益颇多。现将张教授诊疗湿热型慢性乙型肝炎经验浅析于下:1辛开苦降清热化湿古代医藉无慢性乙型肝炎病名,其诊治思路散见于"胁痛"、"痞证"、"虚劳"、"黄疸"等疾病,治疗方法繁芜丛杂,莫衷一是。张教授通过观察慢性乙型肝炎发病过程、临床表现等,发现慢性     

温阳活血退黄方对阴黄证大鼠肝细胞凋亡及bcl-2和bax蛋白表达的影响

目的：观察温阳活血退黄方对阴黄证大鼠肝细胞凋亡，相关调控基因bcl—2、bax蛋白表达的影响。方法：72只大鼠随机分为6组：正常对照组，阴黄证模型组，阳黄对照组，阴黄证模型加温阳活血退黄方高、低剂量组，菌陈术附汤组。采用TUNEL和免疫组化法检测大鼠肝细胞凋亡和bcl—2、bax蛋白表达。结果：阴黄模型组大鼠肝细胞凋亡程度明显高于阳黄模型组及正常对照组(P＜0．01)，温阳活血退黄方高剂量组肝细胞凋亡程度明显低于阴黄模型组(P＜0．05)。温阳活血退黄方高、低剂量组肝组织bcl—2蛋白表达明显高于阴黄模型组(P＜0．0l，＜0．05)，且其bax蛋白表达明显低于阴黄模型组(P＜0．01，＜0．05)，体现较好量效关系。结论：温阳活血退黄方可能通过促进bcl—2蛋白表达抑制bax蛋白表达阻断阴黄证大鼠肝细胞凋亡，可能是其治疗阴黄证的机制之一。     

叶下珠胶囊治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的：观察叶下珠胶囊治疗慢性乙型肝炎的临床疗效。方法：治疗组（135例）口服叶下珠胶囊，4粒／次，3次／d；对照组（54例）口服灭溴灵胶囊，4粒／次，3次／d。两组患者均服药3个月，观察其治疗前后（部分患者随访1年）HBV－M，HBV DNA，肝功能及症状变化情况。结果：治疗组HBeAg,HBV DNA的阴转率分别为59．0％，65．4％，对照组为14．0％，17．4％，P＜0．05，差异有显著性意义治疗组和对照组总有效率分别为71．0％，18．5％，P＜0．01，差异有非常显著性意义。随访1年，其中治疗组68例，对照组25例，治疗组HBsAg，HBeAg，HBV DNA阴转率分别为22．0％，73．5％，72．0％，对照组分别为4．0％，24．0％，23．5％，P＜0．05，差异有显著性意义。两组总有效率分别为92．6％，84．0％，P＜0．05，差异有显著性意义。结论：叶下珠胶囊治疗慢性乙型肝炎具有良好疗效，远期疗效满意。     

温阳活血退黄方对阴黄证大鼠肝功能肝组织病理及超微结构的影响

目的：探讨温阳活血退黄方对阴黄证大鼠的治疗作用。方法：72只大鼠随机分为6组：正常对照组、阴黄模型对照组、阳黄对照组、温阳活血退黄方高剂量组、温阳活血退黄方低剂量组、茵陈术附汤组。检测大鼠肝功能、肝组织病理及超微结构的变化。结果：经温阳活血退黄方(高、低剂量)和茵陈术附汤治疗后，ALT、AST、TBil、ALP、TBA均较阴黄模型组明显下降(P0．05)，且温阳活血退黄方能明显改善阴黄大鼠肝组织病理及超微结构的变化。结论：温阳活血退黄方对阴黄证大鼠有良好的治疗作用。     

乳黄制剂对肝硬化大鼠肠源性内毒素血症的影响

[目的]研究乳黄制剂对肝硬化大鼠肠源性内毒素血症(IETM)的影响.[方法]60只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为4组:正常对照(正常)组、模型组、预防组、模型治疗组.采用CC14复合因素法制造肝硬化模型,用乳黄制剂进行预防和治疗,分别检测血内毒素、D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)水平和肠道细菌移位的情况.[结果]预防组、模型治疗组内毒素水平明显低于模型组(P＜0.05);预防组血清D-乳酸、DAO水平明显低于模型组(P＜0.05),模型治疗组介于预防组和模型组之间.且预防组没有出现肠道细菌移位.[结论]乳黄制剂能有效保护肠黏膜,阻止肠通透性的增加,阻止肠道细菌移位,减少肝硬化大鼠IETM的发生.     

皂荚提取物对肝癌细胞PTEN/P13K/AKT信号通路表达的影响

目的应用体外实验方法,探讨皂荚提取物作用于肝癌细胞SMMC-7721上对PTEN/PI3K/AKT信号通路的影响,进一步明确其治疗肝细胞癌的作用机制。方法实验分空白组(人肝癌细胞SMMC-7721,未加任何药物),索拉非尼组(将4μmo L/L的索拉非尼加入人肝癌细胞SMMC-7721),皂荚提取物组(将皂提取物0.3g·kg~(-1)·d~(-1),按10%浓度加入人肝癌细胞SMMC-7721),用Westem blot法检测细胞中PTEN/PI3K/AKT的表达水平。结果 Westem blot检测表明,空白组对AKT、PTEN、PI3K的表达没有影响,索拉非尼和皂荚提取物均使AKT、PI3K基因表达下调,PTEN表达上调(25h和48h皂荚提取物PI3K下调要强于索拉非尼(P0.01);25h索拉非尼对PTEN上调要强于皂荚提取物(P0.01)。结论皂荚提取物能调控PTEN/PI3K/AKT信号通路的表达,抑制肝癌细胞的生长。     

抗纤软肝颗粒含药血清对肝星状细胞黏着斑激酶mRNA、蛋白表达的影响

目的:探讨抗纤软肝颗粒含药血清对肝星状细胞黏着斑激酶(FAK)mRNA、蛋白表达的影响。方法:运用细胞培养技术,以hsc-t6细胞系为研究对象,分为(1)空白包被+10%生理盐水血清组;(2)纤维连接蛋白(FN)+10%生理盐水血清组;(3)FN+5%抗纤软肝颗粒含药血清(kxr)组;(4)FN+10%kxr组;(5)FN+20%kxr组。按以上分组进行药物干预,干预后继续培养48h。应用免疫细胞组织化学方法检测FAK蛋白的表达,采用RT-PCR法测定FAKmRNA的表达。结果:kxr组肝星状细胞的FAKmRNA、蛋白表达均显著下调,分别减少了72.78%和27.88%,78.82%和44.85%,85.51%和57.58%,与对照组及FN组相比,5%kxr组(P<0.05),10%kxr组、20%kxr组(P<0.01)。结论:kxr能在转录及翻译水平抑制FAKmRNA、蛋白的表达,从而阻抑了整合素激活的FAK途径的信号转导。     

抗纤软肝颗粒对肝星状细胞细胞外信号调节激酶1mRNA、蛋白表达的影响

目的:探讨抗纤软肝颗粒对肝星状细胞细胞外信号调节激酶1(ERK1)mRNA、蛋白表达的影响。方法:运用细胞培养技术,以hsc-t6细胞系为研究对象,分为(1)空白包被+10%生理盐水组、(2)纤维连接蛋白(FN)+10%生理盐水组、(3)FN+5%抗纤软肝颗粒含药血清(kxr)组、(4)FN+10%kxr组、(5)FN+20%kxr组。按以上分组进行药物干预,干预后继续培养48h。应用免疫细胞组织化学方法检测ERK1蛋白的表达,采用RT-PCR法测定ERK1mRNA的表达。结果:与FN组相比,kxr组肝星状细胞的ERK1mRNA、蛋白表达均显著下调,分别减少了54.36%(35.98%)、66.08%(49.59%)、72.82%(59.15%),均有显著性差异。结论:kxr能够在转录及翻译水平抑制ERK1mRNA、蛋白的表达,从而阻抑了整合素激活的MAPK途径的信号转导。     

蕲艾提取液含药血清对肝星状细胞转化生长因子β_1及Smad蛋白表达的影响

目的探讨蕲艾提取液的抗肝纤维化作用及其机制。方法 24只Wistar大鼠随机分为蕲艾组、丹参组、生理盐水组和空白组,每组6只。其中,蕲艾组用20%的蕲艾提取液灌胃,丹参组用丹参注射液灌胃,3组灌液量均为20ml/kg,每天3次,连续3天,末次给药1h后采血取血清,用细胞培养液DMEM配制成体积分数分别为5%、10%和20%的含药培养液。分别检测各体积分数的蕲艾提取液含药培养液对HSC/T6细胞转化生长因子(TGF-β1)、Smad3、Smad7mRNA和蛋白的影响。结果 5%、10%和20%的蕲艾提取液含药血清培养HSC/T6细胞24h后TGF-β1mRNA表达水平分别为空白组的(0.82±0.03)、(0.72±0.03)和(0.67±0.04)倍,蛋白表达水平分别为(0.66±0.09)、(0.34±0.05)和(0.31±0.07)倍,与生理盐水组相比显著降低(P0.05);且均下调Smad3mRNA和蛋白水平,同时上调Smad7mRNA和蛋白表达。蕲艾提取液含药血清20%组与丹参组相比无统计学差异。结论蕲艾提取液含药血清抑制肝星状细胞TGF-β1和Smad3的表达,上调Smad7的表达,从而抑制HSC/T6活化、增殖,降低胶原的表达及分泌,达到抗纤维化的目的。     

杞蓟制剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织肝型脂肪酸结合蛋白的影响

[目的]研究肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)在大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)形成中的作用及杞蓟制剂对其影响。[方法]采用高脂饮食复制大鼠NASH模型。实验分为正常对照组、空白模型组、杞蓟制剂防治组、复方蛋氨酸胆碱片对照组。原位杂交和Western免疫印迹技术检测各组大鼠肝组织L-FABP mRNA和蛋白表达的变化。[结果]与正常对照组相比,空白模型组大鼠肝组织L-FABP mRNA和蛋白表达明显增强(P0.01);与空白模型组相比,杞蓟制剂防治组和复方蛋氨酸胆碱片对照组大鼠肝组织L-FABP mRNA和蛋白表达减弱(P0.01),杞蓟制剂作用优于复方蛋氨酸胆碱片(P0.05或P0.01)。[结论]L-FABP mRNA和蛋白表达增强引起脂质代谢失衡,参与NASH的发病。杞蓟制剂能调节L-FABP mRNA和蛋白的表达是通过调节脂质代谢来防治NASH的作用机制之一。