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慢性乙型肝炎患者血清及肝组织中乙型肝炎病毒核心基因的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
36例肝穿刺诊断为慢性乙型肝炎患者的肝组织及血清,用HBV全基因核酸杂交法及聚合酶链反应(PCR)法扩增了病毒的PreC/C区基因片段。发现PCR法扩增后再经Southern吸印转移及核酸杂交(PCR-SBH)可显著提高检出HBV基因的敏感性。对5例无任何血清HBV标记者证实在其肝内存在HBV基因。用AvaⅡ,sau3AI,XmnI,BstNI及TaqI酶切图谱分析上述病例的c基因,与pADR-1C基因比较,有4例(5份标本)有Sau3AI的异常酶切位点,提示HBV不仅PreC区存在变异株,C基因中亦可有变异。 相似文献
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外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒前S/S基因变异的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
目的研究外周血单个核细胞(PBMC)中乙型肝炎病毒(HBV)包膜抗原基因变异的意义。方法收集19例慢性乙肝患者的PBMC和配对血清,用PCR扩增PBMC及血清中HBV包膜基因片段(S,preS1,preS2),并对其中各5例PBMC及配对血清中的preS1和preS2基因片段,分别进行核苷酸序列分析。结果S、preS1和preS2片段在血清和PBMC中的检出率,分别为100%、947%、100%和0、263%、263%。与HBVADR序列比较,10份标本HBVDNA核苷酸序列分析,发现2份preS1和3份preS2的核苷酸序列,没有发生改变;8份preS1和7份preS2的核苷酸序列,均发生了一个至多个位点的点突变。结论PBMC中存在的包膜基因不完整,因而不会形成完整的HBV病毒颗粒,故不支持HBV可潜伏于PBMC并发展成为体内HBV再感染的来源。preS1点突变编码的氨基酸位点,集中在aa21~47区域,可能会影响HBV的吸附和穿入,及组织亲嗜性的改变。HBV亚基因片段在PBMC中,是否会影响细胞的功能,有待进一步研究。 相似文献
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外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒前S/S基因变异?… 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 研究外周血单个核细胞(PBMC)中乙型肝炎病毒(HBV)包膜抗原基因变异的意义。方法 收集19例慢性乙肝患者的PBMC和配对血清,用PCR扩增PBMC及血清中HBV包膜基因片段9S,preS1,preS2),并对其中各5例PBMC及配对血清中的preS1和preS2基因片段,分别进行核苷酸序列分析。结果 S,preS1和preS2片段在血清和PBMC中的检出率,分别为100%,94.&%,1 相似文献
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张蕾青 《国际医学寄生虫病杂志》1991,(5)
以寡核苷酸引物和探针用于多聚酶链反应(PCR)中,用来检测卡氏肺孢子虫特异的DNA片段。共检测47份诊断性支气管肺泡灌洗液标本,其中37份来自因人类免疫缺陷病毒(HIV)感染或免疫抑制剂治疗而处于免疫抑制状态者,全部患者都有急性呼吸道症 相似文献
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对慢性乙型肝炎患者的22份肝穿刺活检组织及其中配对的6份血清用PCR扩增出乙型肝炎病毒(HBV)的PreC/C基因,选用AvaⅡ、Sau3AⅠ、XmnI,BstNI及TaqI5种限制性内切酶消化后,对C基因进行酶谱分析。发现有6份肝组织及1份血清出现异常酶谱。对Sau3AⅠ酶解异常标本进行分子克隆及核苷酸序列分析,发现2例患者因2137位核苷酸点突变出现了Sau3AⅠ的新酶切点。类似变化在肝癌组织的HBVC基因中也曾发现,其意义待进一步研究。 相似文献
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乙型肝炎患者外周血单个核细胞中乙肝病毒前S/S基因片段的检测 总被引:2,自引:0,他引:2
1. 资料与方法:(1)研究对象:19例慢性乙型肝炎患者均符合1995年第6次全国病毒性肝炎会议诊断标准,为瑞金医院1998年门诊及住院患者,年龄12~46岁,平均32.79岁,女4例,男15例。同时收集PBMC和配对血清,并记录病程及ALT浓度。(2)分离PBMC及提取DNA:抽取肝素抗凝血7ml,用比重1.077的聚蔗糖-泛影葡胺液分离淋巴细胞,2500r/min,15min,吸出淋巴细胞,用HanKs液将细胞清洗5次,以去除可能残留的血浆DNA,分别收集第5次洗涤液(500μl)及细胞,提取PBMC DNA,DNA溶于500μl TE缓冲液。(3)血清及洗液中DNA的抽提:从500μl PBMC洗液及100μl血清中提取DNA后,分别溶于30μl及20μl TE缓冲液。 相似文献
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乙型肝炎患者外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒前S/S基因片段的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
1.资料与方法:(1)研究对象:19例慢性乙型肝炎患者均符合1995年第6次全国病毒性肝炎会议诊断标准,为瑞金医院1998年门诊及住院患者,年龄12~46岁,平均32.79岁,女4例,男15例。同时收集PBMC和配对血清,并记录病程及ALT浓度。(2)分离PBMC及提取DNA:抽取肝素抗凝血7ml,用比重1.077的聚蔗糖一泛影葡胺液分离淋巴细胞,2500r/min,15min,吸出淋巴细胞,用HanKs液将细胞清洗5次,以去除可能残留的血浆DNA,分别收集第5次洗涤液(500μl)及细胞,提取… 相似文献
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