丙型肝炎病毒NS4B对YAP转录、表达、磷酸化及细胞内分布的影响

目的 构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白4B(NS4B)细胞内荧光表达质粒,检测NS4B对Yes相关蛋白(YAP)转录、表达、磷酸化及细胞内分布影响。 方法根据现有含有HCV 1b型病毒NS4B完整基因的质粒设计NS4B的特异性扩增引物,扩增NS4B完整序列并构建NS4B荧光质粒,质粒转染进入HEPG2和293T细胞,通过Real-time PCR检测YAP基因转录水平;通过Western blotting检测YAP蛋白表达及磷酸化水平;通过激光共聚焦和核质分离实验检测YAP细胞内分布。 结果成功扩增出NS4B完整序列并构建其荧光质粒;Real-time PCR和Western blotting结果显示,NS4B并不影响YAP的转录和表达水平,但是能够调节其磷酸化水平;激光共聚焦和核质分离试验结果提示NS4B能够调节YAP在细胞质和细胞核内的比例。 结论HCV NS4B可能通过对YAP的影响发挥生物学功能。     

基于代谢性疾病管理中心平台健康教育在出院后2型糖尿病患者中的应用

目的评价基于国家标准化代谢性疾病管理中心(National Metabolic Management Center,MMC)平台在出院后2型糖尿病患者综合管理中的应用效果观察。方法选择2017年11月-2018年4月在本院内分泌科住院的150例2型糖尿病患者为研究对象,按入院先后次序编号,根据随机数字表法,将150例患者随机分为对照组和试验组各75例。两组患者在住院期间均接受常规的综合护理,对照组出院后采用电话随访和糖尿病门诊教育、健康讲座进行干预;试验组在对照组基础上基于MMC平台实施健康教育,评价两组患者干预前后自我管理行为和血糖值的差异。结果干预后,试验组患者足部护理、饮食控制、血糖监测、规律锻炼、糖尿病知识、遵嘱用药评分和自我管理行为总分均高于对照组;试验组空腹血糖、餐后2h血糖和糖化血红蛋白值均低于对照组,差异均有统计学意义(P0.001)。结论基于MMC平台健康教育在提高出院后2型糖尿病患者的自我管理行为,改善患者空腹血糖、餐后血糖及糖化血红蛋白水平均较常规健康教育方法具有显著优势,有利于糖尿病控制。     

MSPD-GC法测定黄芪中20种农药残留

目的 建立黄芪中20种有机氯和拟除虫菊酯类农药的检测方法.方法 采用基质固相分散-气相色谱法(MSPD-GC),色谱柱为PH-5石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);柱温(程序升温):150℃为起始温度,以5℃/min升至250℃,保持1 min,再以2℃/min升至270℃,保持5 min;进样口温度:230℃;ECD检测器温度:280℃;载气为氮气,测定黄芪中20种有机氯和拟除虫菊酯类农药残留量.结果 有机氯和拟除虫菊酯类农药分别在5～500、10～1 000 μg/L呈良好线性关系,r为0.997 9～0.999 7.平均回收率(n=9)为83.6%～110.3%(RSD<10%).结论 该方法操作简便快速,可作为中药材中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留的测定方法.     

12 周不同剂量盐酸吡格列酮治疗对2型糖尿病患者总体水含量的影响

目的探讨盐酸吡格列酮治疗前后体内总体水含量与药物时效、量效的关系。方法随机人选我院门诊口服降糖药血糖控制不良的2型糖尿病患者。在原降糖治疗的基础上加用盐酸吡格列酮口服,起始剂量为15mg／d,每4周随访并根据血糖调整剂量,共随访12周。分别检测治疗前后的空腹／餐后2小时血糖、空腹血脂、糖化血红蛋白、红细胞压积、体质量,根据Watson公式计算总体水含量。结果签署知情同意书并符合入组条件的2型糖尿病患者男28例、女29例,年龄25～69岁。实际完成51例,治疗后空腹血糖较治疗前明显下降。方差分析发现服药4周、8周和12周的总体水含量与基线的差值均数（ATBW）之间存在组间差异,△TBW12均数随盐酸吡格列酮剂量分组值的增加而增加,并呈线性趋势（P=0．013）。两两比较提示ATBW12分别较△TBW4、△TBW8增多。男性总体水含量高于女性、女性2型糖尿病受试者ATBW4、ATBW8和ATBW12值呈线性趋势．30mg组和45mg组的△TBW12明显高于△TBW4,男性2型糖尿病受试者各组△TBW差异无统计学意义。结论盐酸吡格列酮可以明显改善2型糖尿病患者的糖代谢紊乱,但随着治疗时间延长或剂量增大,机体总体水含量增多,尤以女性明显。评价是否存在噻唑烷二酮类药物相关的水潴留,采用Watson公式估算总体水含量可能是临床可行的筛查方法之一。     

MSPD-GC法测定黄芪中20种农药残留

目的 建立黄芪中20种有机氯和拟除虫菊酯类农药的检测方法。 方法 采用基质固相分散气相色谱法(MSPD-GC),色谱柱为PH-5石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);柱温(程序升温)：150 ℃为起始温度,以5 ℃/min升至250 ℃,保持1 min,再以2 ℃/min升至270 ℃,保持5 min;进样口温度：230 ℃;ECD检测器温度：280 ℃;载气为氮气,测定黄芪中20种有机氯和拟除虫菊酯类农药残留量。 结果 有机氯和拟除虫菊酯类农药分别在5～500、10～1 000 μg/L呈良好线性关系, r为0.997 9～0.999 7。平均回收率(n=9)为83.6%～110.3%(RSD＜10%)。 结论 该方法操作简便快速,可作为中药材中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留的测定方法。     

正畸驱动的骨皮质切开术对巨噬细胞的作用及机制研究

目的：研究正畸牙周围骨皮质切开所诱导的局部微环境对巨噬细胞产生的生物学作用。方法：将60只大鼠随机分成骨皮质切开辅助正畸组和传统正畸组各30只,加力后分别于3、5、7、14、21 d处死实验动物并对颌骨进行Micro?CT扫描,三维重建后测量移动牙周围牙槽骨骨密度,并通过免疫组化染色技术,观察牙周组织中CD68、CD11b、CD86及CD163阳性细胞数。将112只8周龄成年雄性C57BL/6小鼠随机分成牙槽骨皮质切开组及对照组各56只,并分别于3、5、7、14、21、28、42 d处死实验动物并取新鲜的牙槽骨组织悬液与小鼠腹腔巨噬细胞共培养,RT?PCR检测CD11b、CD68、白介素（IL）?6、IL?1β、IL?10及精氨酸酶（Arg）?1的mRNA表达,Western blot检测信号通路相关蛋白p65以及STAT3磷酸化水平。结果：牙槽骨皮质切开初期,骨皮质切开辅助正畸组和传统正畸组大鼠牙槽骨密度均降低,且前者明显低于后者（P < 0.05）,同时免疫组化染色显示,前者CD68、CD11b、CD86及CD163阳性细胞比率显著高于后者（P < 0.05）。与牙槽骨组织悬液共培养后,牙槽骨皮质切开组巨噬细胞表面标记物CD11b和CD68的表达量在共培养第3天时开始逐渐增多,在14 d左右达到峰值并显著高于对照组（P < 0.05）;M1型巨噬细胞标记物IL?6及IL?1β及M2型巨噬细胞标记物IL?10及Arg?1表达量在14 d左右到达峰值且显著高于对照组（P < 0.05）。p65蛋白以及磷酸化的STAT3蛋白表达量分别于共培养第5、7天和第7、14天显著高于对照组（P < 0.05）。结论：正畸驱动的骨皮质切开术通过活化并促进巨噬细胞的分型进而影响牙槽骨密度并促进牙齿的移动,其中NF?κB及JAK?STAT信号通路的激活可能发挥重要作用。     

鹿茸草中木犀草素含量测定

目的：建立高效液相色谱法测定鹿茸草中木犀草素的含量方法。方法：采用Agilent XDB C18（5μm,250×4.6mm）色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸（55：45）为流动相,检测波长350nm,流速1.0mL.min-1。结果：在25.02～150.12μg.mL-1质量浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率为103.1%,RSD为1.27%（n=6）。结论：所建立的含量测定方法简便可行,重复性良好,可用于鹿茸草药材的质量监控。     

基于Ewing试验的心率变异性分析对2型糖尿病患者心脏自主神经病变诊断的临床价值研究

目的结合Ewing试验和心率变异性(HRV)分析两种糖尿病心脏自主神经病变(DCAN)诊断方法,探讨基于Ewing试验的HRV分析对DCAN的临床价值。方法选取2012年2月至2013年1月于广东省人民医院内分泌科就诊的T2DM患者47例(T2DM组),及同期体检健康人群19名为正常对照(NC)组。所有受试者在Ewing试验过程中,予心脏搏动法监测HRV。分析静息状态及Ewing试验各项目期间HRV各参数变化,尝试探索基于Ewing试验的HRV诊断模式并评价其临床实用价值。结果以Ewing试验为诊断标准,T2DM组DCAN患病率为55.3%。随机纳入70%T2DM患者(预测组)的HRV指标得到Ewing-HRV诊断组合,包括握力试验时高频功率(HF)、静息状态时低频功率(LF)/HF、Valsalva动作时LF,该模式在其余30%T2DM患者(验证组)中,与Ewing试验诊断方法的符合性:Kappa=0.857,P=0.001,敏感性为100%,特异性为87.5%,阳性预测值为85.7%,阴性预测值为100%。结论基于Ewing的HRV诊断组合(Ewing-HRV法)与经典的Ewing试验的诊断效率高度吻合且该方法无创、受主观因素影响小、简单易行,在进一步探讨和分析的基础上可用于DCAN筛查。