胰岛β细胞再生与糖尿病治疗的研究进展

2005年,美国疾病控制中心(Centers for Disease Control,CDC)公布的资料显示[1],美国现有糖尿病患者2080万,还有100万人处于糖尿病前期(pre-diabetes).     

胰腺移植后免疫抑制治疗调节Th1/Th2细胞因子与抑制凋亡途径的研究

胰腺移植术中及术后行免疫抑制治疗有助于预防和治疗急、慢性排斥反应,保证移植物的长期存活[1].     

DPC4重组腺病毒载体的构建

目的：构建DPC4基因重组腺病毒载体以研究DPC4对胰腺癌的影响。方法：构建PRL-DPC4重组质粒，然后将具CMV启动子的DPC4CDNA片段自PRL-DPC4上切下，亚克隆至腺病毒穿梭质粒中，形成转移质粒PAd△E1-DPC4将这写腺病毒基因组质粒PBHG10共转染293细胞获得重组腺病毒，采用PCR方法对其进行鉴定。结果：在挑选的空斑中有含DPC4CDNA的重组腺病毒，DPC4重组腺病毒可感染293细胞并在293细胞中进行有效的复制。结论：成功构建了DPC4基因重组腺病毒载体，为进一步研究DPC4的功能提供了条件。     

85例急性重型胰腺炎死亡原因分析

目的：探讨影响胰腺炎病死率的因素。方法：８５例急性重型胰腺炎（ＡＳＰ）死亡患者按时间划分为３个阶段：１９８４年～１９９０年为Ⅰ阶段，１９９１年～１９９３年为Ⅱ阶段，１９９４年～１９９７年为Ⅲ阶段，分析不同时期ＡＳＰ的死亡原因。结果：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段手术率逐渐降低，分别为７７．５９％，５４．５５％和２９．２９％（Ｐ均＜０．００５），手术组病死率分别为４７．７８％，２０．３７％和１５．５２％（Ｐ均＜０．００５）；３阶段非手术组病死率分别为１５．３８％，１３．３３％和８．５７％。Ⅰ和Ⅲ阶段非手术组病死率低于手术组（Ｐ均＜０．０５），且Ⅲ阶段合计死亡２１例，病死率为１０．６１％，低于Ⅰ阶段病死率（Ｐ＜０．０５）。结论：早期手术、误诊误治、并发症处理不及时、营养不良与死亡密切相关，休克和急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）是早期死亡的主要原因，胰周脓肿和多器官衰竭（ＭＯＦ）是后期死亡的主要原因，严格掌握手术指征非常重要。     

CTLA4Ig和西罗莫司短期联合使用延长异种胰岛移植物的存活

目的 观察细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白(CTLA4Ig)与西罗莫司(SRL)联用阻断共刺激通路对异种胰岛移植物存活的影响.方法 取C57BL/6小鼠,腹腔注射链佐星,制成糖尿病模型.采用随机单位组设计分组法将糖尿病小鼠分为7组,各组均于小鼠左肾包膜下移植SD大鼠胰岛300胰岛当量.CTLA4Ig组分别于移植当天及移植后第2、4、6天腹腔注射CTLA4Ig 0.5 mg/d;SRL组分别于移植当天及移植后第1、2天给予SRL灌胃,0.2 mg·kg-1·d-1,其后隔天用药1次,共用2周;MRI组分别于移植当天及移植后第2、4天腹腔注射仓鼠抗小鼠CD154单克隆抗体(MR1)0.5 mg/d;CTLA4Ig和SRL联用组(SRL联用组)、CTLA4Ig和MRl联用组(MR1联用组)以及CTLA4Ig、MR1和SRL联用组(三药联用组)各药物的剂量与用法同上述各组;对照组仅行胰岛移植,不予以药物.观察至移植后200 d,通过监测受者血糖水平来判断排斥反应的发生情况.记录各组移植物的存活(即无排斥反应)时间.发生排斥反应者,或未发生排斥反应、移植物存活时间＞200 d者,取移植胰岛,行HE染色及免疫荧光染色,进行组织学观察.结果 对照组移植物存活时间中位数为17 d,该组最终均发生排斥反应.SRL组、MRl组和CTLA4Ig组移植物存活时间中位数分别为34 d、98 d和77 d.均明显长于对照组(P＜0.05),三组中分别有90%(9/10)、62.5%(5/8)和83.3%(5/6)的小鼠发生排斥反应.SRL联用组移植物存活时间中位数为130 d,明显长于上述4组(P＜0.01),有50%(3/6)的小鼠发生排斥反应.MR1联用组以及三药联用组移植物存活时间中位数均＞200 d,分别有42.9%(3/7)和25%(2/8)的小鼠发生排斥反应.组织学检查结果显示,对照组发生排斥反应时,其移植胰岛破坏严重,可见大量CD4+和CD8+淋巴细胞及巨噬细胞浸润,并可见IgG、IgM和补体C3沉积.其它组发生排斥反应者的组织学改变与对照组相似.SRL联用组存活200 d的小鼠,其移植胰岛组织中未见或仅有少量炎症细胞浸润,胰岛素和胰高血糖素染色阳性,未见IgG、IgM和补体C3沉积.结论 短期联合使用CTLA4Ig和SRL能显著延长小鼠体内大鼠来源的胰岛的存活时间.     

胰腺癌细胞survivin表达RNAi抑制载体的构建及其抑制作用的研究

目的构建胰腺癌细胞生存蛋白（survivin）表达的RNA干扰（RNAi）抑制载体，并研究其对survivin表达的抑制作用。方法用免疫荧光技术和RT-PCR检测胰腺癌细胞PANC-1中survivin及其mRNA的表达，并把survivin基因克隆到T载体进行测序；构建针对survivin缺失碱基基因和survivin基因的RNAi载体si-svv-1和si—SVV-2，用脂质体转染胰腺癌细胞PANC-1后，用RT—PCR、DNA梯状电泳及流式细胞术分析比较2种干扰载体对survivin mRNA表达的抑制情况和检测细胞凋亡。结果survivin在胰腺癌细胞PANC-1中高表达；si—svv-2对survivin mRNA的表达抑制率达（72．43±8．04）％，而si—svv-1为0；si—svv-2能诱导胰腺癌细胞PANC-1的凋亡，72h细胞凋亡率达（12．36±1．44）％。结论本研究成功建立胰腺癌细胞survivin表达RNAi抑制载体，该载体可特异有效地抑制胰腺癌细胞PANC-1survivin的表达并诱导胰腺癌细胞PANC-1凋亡。     

急性胰腺炎时C-反应蛋白变化及临床意义

目的 探讨急性胰腺炎病程早期Ｃ－反应蛋白变化规律及其临床意义。方法 分别于入院第１、４、７和１４天对起病４ｄ以内入院的２３例急性胰腺炎患者外周血中Ｃ－反应蛋白进行检测。结果 入院第１天急性胰腺炎患者Ｃ－反应蛋白显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）。重症组Ｃ－反应蛋白显著高于轻症组（Ｐ＜０．０１），第７天时重症组中有并发症者Ｃ－反应蛋白显著高于无并发者（Ｐ＜０．０５）。结论 Ｃ－反应蛋白可作为判断病情轻重的早期指标并能提示并发症的发生。     

早期益活清下法治疗高脂血症性重症急性胰腺炎的临床研究

目的：探讨早期采用益活清下法治疗高脂血症性重症急性胰腺炎（severe acute pancreatids．SAP）的疗效。 方法：依据纳入和排除标准，选取高脂血症性SAP104例，按入院接受治疗的时间分成早期组52俐（发病3d内入院）和晚期组52例（发病后3～7d入院），所有病俐入院后均接受益活清下法治疗。 结果：两组入院时Ranson评分、CT评分、急性生理和慢性健康评价指标Ⅱ评分的差异均无统计学意义（P〉0．05）。发病第10天早期组血清甘油三酯低于晚期组（P〈0．01）；早期组急性呼吸窘迫综合征、肾功能衰竭、肝功能不全、心功能衰竭、脑病、休克、感染及消化道出血的发生率低于晚期组（P〈0.05）；早期组病死率低于晚期组（P〈0．05）；住院时间也短于晚期组（P〈0．05）。 结论：早期采用益活清下法治疗高脂血症性SAP可以取得更好疗效。     

转变观念 迎接挑战 培养21世纪高素质医学人才

即将到来的21世纪,国家的综合国力和国际竞争能力将越来越取决于教育发展、科学技术和知识创新水平。高等教育肩负着为现代化建设提供人才支持和知识贡献双重任务,在可持续发展中将发挥重要的支柱作用。为了抢占未来竞争的制高点,不少国家将培养高素质的人才作为高等教育改革的     

RNAi抑制胰腺癌细胞survivin表达的实验研究

目的研究用RNAi表达载体对胰腺癌细胞PANC-1中凋亡抑制蛋白survivin表达的抑制作用。方法用免疫荧光技术和RT-PCR检测胰腺癌细胞PANC-1中凋亡抑制蛋白survivin的表达,并把survivin基因克隆到T载体进行测序,构建针对survivin基因的干扰载体,用脂质体转染胰腺癌细胞PANC一1,RT-PCR初步分析干扰载体对survivin表达地抑制情况。结果survivin在胰腺癌细胞PANC-1中高表达,其基因序列与genebank中公布的一致,干扰载体si-svv-2可以有效的抑制survivin的表达,抑制率达71％。结论用RNAi表达载体可以有效抑制胰腺癌细胞PANC-1中凋亡抑制蛋白survivin的表达。