尿素—ＳＤＳ—ＰＡＧＥ快速测定多肽的相对分子质量

随阒电泳技术的不断改进和完善，该技术已成为现代分子生物学实验不可缺少的基本实验技术之一。然而进行小分子多肽的电泳分析时，由于其相对分子质量（Ｍr)小，易受电泳条件（电泳缓冲系统、凝胶浓度、电泳时间、染色和脱色等）的影响，极易引起条带扩散、不易着色。使分辨率降低，因而直接影响多肽Ｍr的测定，现有多肽Ｍr的电泳测定法［１，２］操作复杂，且结果也不理想，因此，我们经反复实验，建立了对Ｍr为２５００－１７０００多肽的尿素－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ快速测定法。     

5-羟色胺对心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的　观察 5 -羟色胺 (5 - HT)对新生大鼠心肌细胞内游离 Ca2 + 浓度的影响 ,并探讨其作用机制 .方法　培养 SD大鼠 (1～ 3d)心肌细胞 ,应用特异性 Ca2 +荧光指示剂 Fluo- 3/AM负载细胞 ,激光共聚焦显微镜检测游离 Ca2 + 浓度 .结果　 5 - HT在 10 - 6 ,10 - 5,10 - 4 m ol· L- 1 时均可升高心肌游离Ca2 + 浓度 ,且随剂量增加而加强 ;二氢吡啶类钙通道阻断剂lacidipine可部分拮抗 5 - HT的作用 ;心肌肌浆网内钙释放通道 ryanodine受体调节剂 ryanodine,在 10 - 5mol· L- 1 时也可部分拮抗 5 - HT的作用 ;用 EGTA络合细胞外液中游离Ca2 + ,5 - HT升高心肌游离 Ca2 + 作用明显减弱 ;此外 ,5 - HT二型受体 (5 - HT2 R)阻断剂赛庚定具有显著抑制 5 - HT升高心肌游离 Ca2 + 的作用 .结论　 5 - HT具有升高心肌游离 Ca2 + 的作用 ,其机制可能与细胞外 Ca2 +经 5 - HT2 R或二氢吡啶类钙通道进入细胞以及肌浆网内钙释放有关     

关于护理科研思维的探讨

科学研究是人类在实践中运用正确的观点和方法来观察未知事物的一种认识活动。护理科研是护士高层次的心理活动，是一种新视野、新侧面、多层次、多结构具有开拓性的思维活动，也是提高护理工作质量，促进护理科研不断发展的关键，然而长期以来护理科研成果较少，科研成果的层次性偏低，缺乏系统性和新颖性，这除与护士的文化知识层     

高浓度聚丙烯酰胺凝胶的简易干燥法

聚丙烯酰胺凝胶电泳分析小分子多肽时,凝胶浓度通常在１６％以上。对这类高浓度凝胶我们曾采用文献１２的方法制干胶,但效果不好,凝胶易干裂或皱缩。经反复实验,我们摸索出一种极为简便的方法,仅用一张玻璃纸即可将高浓度凝胶制成平整光亮,清晰透明的理想干胶,此方法也适用于其他浓度的凝胶。具体方法如下：①将脱色后的凝胶浸入７５％乙醇中浸泡５ｍｉｎ。②取一张长度约为凝胶长度两倍,宽度比凝胶宽４ｃｍ的玻璃纸,浸湿后平铺在干净的玻璃板上。③玻璃纸上涂一层甘油,放上凝胶,再在凝胶表面涂一层甘油,然后将玻璃纸下端…     

流式细胞术快速测定细胞活性

0　引言　细胞周期动力学研究和细胞凋亡的研究是目前生物医学领域的热门课题之一 [1 ] ,流式细胞术 (FCM)检测细胞周期和凋亡是其主要研究手段 [2 ] .FCM对细胞周期的分析方法已很成熟 ,但是我们在分析化学或物理因素对细胞周期的影响时 ,发现在 DNA直方图上出现 DNA含量较低的细胞峰 ,为确定该细胞峰的性质 ,鉴定细胞的活性 ,我们用 FCM法和台盼蓝染色法进行对比实验 ,建立了 FCM同时检测细胞周期和细胞活性的新方法 .1　材料和方法1.1　材料　所用设备包括 :EL ITE ESP型流式细胞仪 (美国Coulter公司 ) ,XD- 10 1型倒置显微…     

HPLC法测定大豆提取物中染料木黄酮的含量

目的　建立高效液相色谱法测定大豆提取物中染料木黄酮含量的方法。方法　 BECKMAN ODS柱 ,流动相为水 (0 .0 1%三氟乙酸 )∶甲醇 =2 0∶ 80 ,流速 1m L· min-1,检测波长为 2 6 0 nm。结果　线性范围为 0 .195～ 5 0 mg· L-1,日内精密度为 0 .4 5 % ,日间精密度为 1.2 % ,平均回收率为 99.5 %。结论　本实验方法快速、简便 ,灵敏度高 ,值得推广和应用     

多肽转移电泳时间探讨

转移电泳是将凝胶电泳分离的结果 ,通过电泳装置转移到固相支持物 (如硝酸纤维素膜 )上的一种电泳技术 ,可用于ＤＮＡ片断的分析 (Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ)、ＲＮＡ的分析 (Ｎｏｒｔｈ ｅｒｎｂｌｏｔ)和蛋白质的研究 (Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ)。由于转移到固相支持物上的样品可进行多种分析 ,且操作简便、灵敏度高和特异性强 ,目前广泛应用于生物化学、分子生物学和免疫学等研究领域。对低分子量蛋白质的转移电泳条件已趋成熟 ,且应用很多 ,而小分子多肽 (Ｍｒ在 2 5 0 0～ 16 0 0 0 )的转移电泳报道较少。又因在一定凝胶孔径下 ,Ｍｒ小…     

有机磷中毒患者彻底洗胃法的探讨

为使有机磷中毒患者彻底洗胃 ,减少毒物吸收和并发症 ,早日康复 ,2 0 0 0年 6月至 2 0 0 1年 12月我院ＩＣＵ室对有机磷中毒 4 0例采用新的洗胃法 ,效果满意 ,现报告如下。1　资料与方法1 1　临床资料　中、重度有机磷中毒患者 80例 ,均带有气管插管并用呼吸机辅助通气 ,随机分     

长期腹泻及大便失禁患者用一次性气管插管导便

长期腹泻及大便失禁患者 ,肛门周围的皮肤常因粪便刺激发生红肿、疼痛 ,患者十分痛苦。为减轻患者痛苦 ,我们用一次性气管插管代替肛管 ,为患者导便 ,效果满意 ,现介绍如下。方法　成人用 7～ 8号气管插管 ,小儿用 3～ 5号气管插管 ,检查气囊不漏气后 ,管末端系住一次性齐口不漏气塑料袋。润滑管前端 ,凹面向上 ,经肛门缓慢插入 ,见粪便自插管内排出 ,再继续插入3～ 5cm后向气囊内充入 9～ 12ml气体或更多 ,并向外牵拉至有抵抗感止。优点　 ( 1)稀薄的粪便经插管导入袋中后 ,可根据需要随时更换塑料袋 ,并可取样化验 ,减少了尿液对大便的污…