基于OCTA的中心性浆液性脉络膜视网膜病变患者脉络膜新生血管检测

目的观察光学相干断层扫描血管成像(OCTA)在中心性浆液性脉络膜视网膜病变(CSC)患者脉络膜新生血管(CNV)检测中的应用价值。方法回顾性病例观察研究。选取2018年3月至2019年3月在云南省第二人民医院诊断为慢性中心性浆液性脉络膜视网膜病变伴脉络膜新生血管患者30例(34眼)纳入研究,总结分析其OCTA与眼底彩色照相、眼底自发荧光、荧光素眼底血管造影(FFA)和OCT等传统影像学对比运用的临床体会。结果12眼FFA存在荧光素渗漏,但形态模糊,不能确定是否伴有CNV,行OCTA则可以清晰显示新生血管影像。8眼FFA未检出CNV,但OCTA清晰显示出新生血管形态。3眼眼底彩色照相及OCT检查高度怀疑CNV的存在,但因荧光素钠皮试阳性,均无法实施FFA,而OCTA则显示出病变区域血流信号,明确了CNV的存在。6眼FFA无明显荧光素渗漏,OCT示无神经上皮层脱离、无色素上皮层脱离,但OCTA提示CNV的存在。5眼通过随访过程中的病情跟踪观察,发现给予患者单一抗VEGF或PDT治疗之后视网膜下积液无明显吸收,而联合治疗后积液明显吸收。结论OCTA在CNV的检查敏感性方面优于传统的检测手段。OCTA可以作为一项安全有效的眼底影像学检查手段对慢性CSC患者的CNV进行观察,从而指导该类患者的诊断、治疗及预后分析。     

OCT评估磁性微珠注射诱导小鼠慢性高眼压模型的建立

  目的  探索磁性微珠前房注射诱导高眼压模型的可行性及特点，OCT在模型评估中的作用。  方法  将C57BL/6小鼠分为正常组、对照组与实验组。实验组前房内注射磁性微珠诱导高眼压，对照组前房内注射等量生理盐水，正常组不做任何处理。术前及术后第1天开始隔天检测眼压波动；建模3周后行荧光金逆行标记，建模4周后使用OCT检测两组小鼠视盘旁神经纤维厚度，并行视网膜行铺片计数各组RGCs数量。  结果  小鼠前房内注射磁性荧光微珠后，微珠可均匀分布于房角处堵塞房角。实验组小鼠眼压自注射术后1 d开始升高，平均眼压为（19.37±4.38）mmHg，3周开始眼压下降；荧光金逆行标记RGCs，建立微珠诱导小鼠高眼压模型后4周，行OCT检测RNFL厚度。实验组RNFL厚度为（27.67±6.15）μm，较对照组明显变薄，两组比较差异有统计学意义（P = 0.0082）。检测OCT后收集眼球计数RGCs，实验组RGCs为（203.83±26.35）个，与对照组比较明显减少，差异有统计学意义（P = 0.009 4）。  结论  小鼠前房注射磁性微珠可以诱导持续稳定的眼压升高并引起明显RGC数量减少，可通过OCT无创、快速、重复的检测神经纤维层厚度发现RGC损伤。     

纤维蛋白原α链剪切位点IVS2＋1G〉C突变导致的遗传性低纤维蛋白原血症

目的：探讨遗传性低纤维蛋白原（Fg）血症的分子发病机制。方法：检测凝血指标以明确诊断；用DNA直接测序法对患者Fg基因FGA、FGB和FGG的所有外显子及其侧翼序列进行测序以寻找基因突变，对有突变的序列反向测序证实；通过逆转录结合巢式PCR扩增的方法，检测患者外周血中的Fg异位转录产物；构建含有突变点的突变型FGA小基因（minigene）质粒和野生型FGA小基因质粒，将2种质粒分别转染人胚肾（HEK）293T细胞，抽提RNA．逆转录PCR（RT—PCR）后TA克隆测序。结果：先证者呈FGA基因剪切位点IVS2＋1G〉C杂合突变；对于该突变，逆转录结合巢式PCR的产物经克隆后测序只检测到正常转录本，而没有发现异常转录本：突变型FGA小基因质粒转染HEK293T细胞后．抽提RNA再经RT-PCR、TA克隆、测序，揭示剪接过程中发生了FGA基因2号内含子滞留，导致终止密码的提前出现．从而使异常转录的mRNA在体内很快被降解。结论：异位转录结合体外表达证明先证者FGA基因剪切位点IVS2＋1G〉C突变导致异常转录mRNA在体内很快被降解，是先证者低Fg血症的原因之一。     

3个遗传性抗凝血酶缺陷症家系的表型和基因型关系的研究

目的探讨遗传性抗凝血酶缺陷症家系表型和和基因型的关系。方法对3个遗传性抗凝血酶缺陷症家系(家系1~3)作表型和基因型诊断:常规检测活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fg)、凝血酶时间(TT)以筛查凝血功能,发色底物法检测蛋白C、蛋白S和抗凝血酶活性(PC∶A,PS∶A及AT∶A),免疫比浊法检测抗凝血酶抗原(AT∶Ag),Western blot检测血浆中抗凝血酶的分子量和含量;PCR扩增AT基因所有外显子及侧翼序列,DNA测序并进行基因分析。针对新基因突变,在100例正常人中检测相应突变以排除多态性,用TA克隆PCR产物测序鉴定杂合碱基缺失突变。结果 3名先证者均为反复发作的静脉血栓患者,凝血指标及PC∶A和PS∶A都正常,AT∶A分别为正常人(100%)的60%、52%和60%,AT∶Ag分别为16.9、14.1和11.4 mg/dl,Western blot显示3位先证者的血浆AT蛋白分子量正常(58 kD)而含量低于正常;基因分析发现3名先证者各携带1个杂合突变,分别为g.8263 C>T(Leu340Phe)、g.5894-6 del TTC(Phe122del)和g.5898 T>G(Phe123Cys)。3个家系中与先证者表型相似的成员,则携带有相同的AT基因突变;但除家系2先证者的父亲有静脉血栓外,家系1和3中含有相应AT基因突变的家庭成员均无血栓发生。结论 3名先证者遗传性抗凝血酶缺陷症分别由Leu340Phe、Phe122del和Phe123Cys突变所致,其中Leu340Phe和Phe123Cys突变为国际上首次报道。     

四个遗传性凝血因子V缺陷症家系临床表型和基因型变化的研究

目的 研究4个遗传性凝血因子V(FV)缺陷症家系的临床表型和基因突变.方法 测定家系成员活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)及FV促凝活性(FV:C)和FV抗原(FV:Ag)含量进行表型诊断;用PCR法扩增先证者F5基因的25个外显子及其侧翼序列,PCR产物纯化后直接测序,检测其基因突变.结果 4例先证者APTT、PT明显延长,血浆FV:C和FV:Ag含量均显著降低.基因分析发现,先证者1的F5基因存在G16088C(Asp68His)杂合错义突变及4种位于同一条染色体上的杂合多态性T35788C(Met385Thr)、A47295G(Hisl299Arg)、A58668G(Metl736Val)和A74083G(Asp2194Gly);先证者2的F5基因存在CA6253T(Arg952Cys)和CA6724T (Glnl 109stop)两种纯合突变;先证者3的F5基因存在C67793G(Pr02006Ala)纯合错义突变;先证者4的F5基因存在C74022T(Arg2174Cys)纯合错义突变.结论 Asp68His、Arg952Cys、Glnl109stop、Pro2006Ala和Arg2174Cys这5种突变,及Met385Thr、Hisl299Arg、Metl736Val和Asp2194Gly这4种多态性是导致相应先证者I型遗传性FV缺陷症的原因.其中,Glnl109stop、Pro2006Ala和Arg2174Cys是国际七首次报道的新突变.     

阿司匹林抵抗的实验相关研究

目的 比较不同血小板功能检测方法对阿司匹林疗效判断及其临床应用价值.方法 采用血小板功能分析仪-100(platelet function analyzer,PFA-100)和光学法,应用不同的诱导剂(花生四烯酸、二磷腺苷酸、肾上腺素和胶原)测定血小板聚集率,分别对40例正常人、51例原发性高血压未服用阿司匹林患者及54例原发性高血压服用阿司匹林(100 mg/d)患者进行血小板功能测定,并以P-选择素水平的检测结果为对照,分析2种方法检测结果.结果 原发性高血压服用阿司匹林组(服药组)中4种诱导剂测得的光学法血小板聚集率较正常组和临床对照组均明显下降(P均＜0.05);服药组中PFA-100 CEPI测得的闭合时间(CT)值较正常组和临床对照组显著延长(P＜0.01).光学法血小板聚集检测的AR组及PFA-100测得的PFA-AR组中P-选择素的水平均显著增高.PFA-100对AR检出的敏感度较光学法血小板聚集高.PFA-100 CEPI检测盒与临床事件的一致性较光学法血小板聚集高.结论 光学法血小板聚集检测阿司匹林疗效,以AA作为诱导剂更敏感、特异;使用不同诱导剂进行监测有助于对更全面了解阿司匹林疗效;PFA-100较传统光学法血小板聚集有更好的敏感性,与临床事件的一致性高.     

年龄相关性黄斑变性中视网膜色素上皮脱离的临床观察

目的　探讨年龄相关性黄斑病变（age-related macular degeneration，AMD）中不同病变类型视网膜色素上皮脱离（pigment epithelial detachment，PED）的特征，以期为AMD不同类型的诊断及预后评估提供参考依据。方法　通过影像学检查将96例（124眼）患者分为视网膜血管瘤样增生（retinal angiomatous proliferation，RAP）、息肉样脉络膜血管病变（polypoidal choroidal vasculopathy，PCV）、脉络膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）。通过光学相干断层扫描（optical coherence tomography，OCT）结合眼底彩色照相、眼底荧光素血管造影、眼底自发荧光等检查方法对以上几类病变中PED大小、形态、病变性质、预后等重要特征进行回顾分析并对比总结。结果　96例患者中RAP-PED为10例（10.42%）、PCV-PED为32例（43.75%）、CNV-PED为54例（45.83%）。RAP-PED多为浆液性、双眼发病。PCV-PED多为多灶性、出血性，且多为单眼发病。CNV-PED的数量形态表现多样，大小不等相连，形成“波浪样”外观。结论　加深对各类型AMD中PED发生的几率、类型、合并症以及预后等的认识，有助于更为精确指导诊断治疗及预后分析。     

POCT的发展及临床应用

POCT(point of care testing，POCT)作为临床检验领域新出现的一种检验手段，正日益受到人们的重视，POCT是指在患者医疗现场对任何医疗措施所需进行的检验；不在中央实验室，而在患者身边进行的检验，其结果同样可信。由此可见POCT具有快捷、灵敏、不受场地条件等限制．在诊断、治疗及判断预后中起着越来越大的作用。     

低分子量肝素的研究进展

低分子量肝素广泛应用于血栓栓塞性疾病的预防及治疗,其有效性和安全性均优于普通肝素。本文就其基础研究、临床应用情况及实验室监测指标等作一综述。     

低分子量肝素的研究进展

低分子量肝素广泛应用于血栓栓塞性疾病的预防及治疗，其有效性和安全性均优于普通肝素。本文就其基础研究、临床应用情况及实验室监测指标等作一综述。