顶空气相色谱和气相色谱-质谱联用法检测血液中的二氯甲烷

  目的  建立血液中二氯甲烷的气相色谱-质谱（GC-MS）定性检测和顶空气相色谱（HS-GC）定量检测方法,为二氯甲烷中毒或致死案件的法医学鉴定和分析提供可靠依据。   方法  取0.5 mL血液,以氯仿为内标,加入到顶空瓶,经65 ℃加热后抽取瓶中气体用GC-MS进行定性方法学验证,用HS-GC进行定量方法学验证,并将该方法应用于案件鉴定。   结果  GC-MS定性验证:空白血液中无干扰,添加血样中二氯甲烷色谱峰特异且峰型良好,质谱特征碎片离子特异;方法检出限（LOD）为5 μg/mL。HS-GC定量验证:二氯甲烷与乙醇等常见挥发性化合物色谱峰分离良好,分离度均>1.5;方法定量限（LOQ）为20 μg/mL,在20～1000 μg/mL范围内线性关系良好,R>0.999;日内/日间精密度良好（RSD均<15%）,准确度高（相对误差δ<15%）。2例二氯甲烷致死案件死者血液中均检出二氯甲烷,质量浓度分别为470 μg/mL、915 μg/mL。   结论  该方法快速、稳定且结果可靠,可用于疑似二氯甲烷中毒或致死案件血液中二氯甲烷的法医毒物学定性定量分析。     

法医毒物分析实验教学多元化模式改革

法医毒物分析是法医学专业的主干课程之一,实践性强,应注重培养学生敏锐观察能力、实践探索能力及综合运用能力。在法医毒物分析实验教学中,引入仿真的案件现场、开放的实验平台和实验教具,营造一个立体化法医毒物分析实验教学模式,从而加深学生对毒物的认识,激发学生对案件的思考,完成理论知识到实践的转化。     

氯胺酮及其代谢物去甲氯胺酮在大鼠体液及组织中的检测及分布

目的:建立生物检材中氯胺酮及其代谢物去甲氯胺酮的检测方法,考察氯胺酮和去甲氯胺酮在大鼠体内的分布。方法:用高效液相色谱法(HPLC)检测生物检材中的氯胺酮及去甲氯胺酮;以10 mg·kg-1剂量给大鼠灌胃(ig),分别于给药后10 min,45 min,2 h和8 h处死,测定体液和组织中氯胺酮及去甲氯胺酮的含量。结果:建立起生物检材中氯胺酮及其代谢物去甲氯胺酮的HPLC法。所建方法在0.05-25.0μg.g-1浓度范围内线性关系良好,r2=0.999,萃取回收率大于75%;肝和肾中氯胺酮和去甲氯胺酮含量最高,其次为:脾、尿液、肺、脑、血液、心和肌肉。结论:所建方法准确、灵敏,适用于组织中氯胺酮及其代谢物去甲氯胺酮的分析鉴定;肝和肾可作为毒物分析的组织检材。     

HPLC同时测定生物样品中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量

 目的建立同时测定血液、肝组织中新乌头碱(mesaconitine)、乌头碱(aconitine)、次乌头碱(hypaconitine)含量的HPLC分析方法。方法采用Welchrom C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.03%四丁基氢氧化铵(用冰醋酸调至pH9.74)(58∶42)为流动相,流速为1.0mL·min^-1,检测波长为230nm。结果生物样品中新乌头碱在0.077～23mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9998),乌头碱在0.083～25mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9998),次乌头碱在0.08～24mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9996)。生物样品中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的回收率不低于83.6%。生物样品中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的日内精密度和日间精密度分别在5.1%和9.3%以内。结论本方法简便、灵敏、准确,适用于血液、肝组织中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的分析。     

高效液相色谱法检测生物样品中五氯酚

目的　建立生物检材中五氯酚的高效液相色谱检测方法。方法　将鱼内脏组织匀浆 ,用有机溶剂萃取后 ,采用高效液相色谱仪检测。对高效液相色谱条件进行反复筛选 ,同时以空白添加实验考察回收率、线性范围、检测限。结果　建立了以乙醚为提取溶剂处理样品 ,采用 Hypersil ODS柱 (4 .6 m m i.d.× 15 0 m m,5μm) ,甲醇∶2 g/ L醋酸铵水溶液 (80∶ 2 0 )为流动相的高效液相色谱分析方法。30 5 nm进行检测 ,同时收集全光谱信息。按上述方法分析生物检材中的五氯酚 ,方法平均回收率为 76 % ,检测线性范围为 0 .0 4 2μg/ g～ 1.344μg/ g,相关性良好 (r=0 .9994 ) ,检测限为 0 .0 14μg/ g。运用该方法成功地从中毒鱼体中检出五氯酚。结论　所建立方法能便捷、准确地检测生物检材中五氯酚 ,为法医学中毒鉴定提供了新方法。     

氯胺酮的薄层层析和气相色谱-质谱分析

目的:建立氯胺酮的薄层层析法(TLC)和气相色谱-质谱(GC-MS)测定方法.方法:样品在pH 13条件下用醋酸乙酯萃取,SKF525A为内标,以DB-5MS石英毛细管柱、EI源、不分流进样GC-MS法测定氯胺酮药物;斑点颜色结合比移值和光密度扫描图TLC法定性分析吗啡、海洛因和氯胺酮.结果:TLC法中氯胺酮与吗啡、海洛因分离良好.GC-MS分析中,氯胺酮药物血药浓度在0.5～20.0 mg·L-1范围内呈线性关系,r=0.998 7,最低检出限为0.2 mg·L-1(S/N=3).结论:建立的TLC和GC-MS法可用于毒品中氯胺酮的检验和氯胺酮中毒的法医学鉴定.     

冠状动脉粥样硬化性心脏病患者脂蛋白酯酶基因的单核苷酸多态性的初步研究

目的　探讨脂蛋白酯酶基因 (lipoprotein lipase,L PL)单核苷酸多态性 (single nucleotidepolymorphisms,SNP)与冠状动脉粥样硬化性心脏病 (简称冠心病 )的关系。方法　利用聚合酶链反应扩增110名健康人和 10 2例冠心病患者 L PL 基因第 6外显子和第 6内含子的片段 ,采用温度调控高效液相色谱技术对扩增的片段进行了筛查 ,对筛查到的杂合片段进行序列测定 ,并与正常序列进行对照分析。结果　在L PL 基因第 6内含子中发现了 3个尚未报道的 SNP(42 12 t/ c、45 0 9t/ c、45 76 a/ c)。它们的频率在被检测的冠心病患者和健康人群中存在差异 ,其中 42 12 t/ c、45 76 a/ c两组间差异显著 (P<0 .0 5 )。结论　补充了 L PL基因 SNPs的数据库信息。L PL基因 SNPs的研究可能对冠心病等复杂疾病机理的认识有重要价值     

氯胺酮多次给药对大鼠肝微粒体内细胞色素P450_2B酶的诱导作用

目的考察氯胺酮对大鼠肝微粒体内细胞色素P450_2B酶活性的影响。方法以10mg.kg-1.d-1氯胺酮灌胃给予大鼠,连续给药10d。在第11d处死大鼠,以钙离子沉淀法制备肝微粒体。采用Omura和Sato方法测定细胞色素P450含量,采用7-戊氧基试卤灵-O-去烷基反应测定细胞色素P450_2B酶的活性。结果给药组和对照组细胞色素P450的总含量分别是（0.679±0.216）nmol·mg-1和（0.398±0.109）nmol·mg-1,细胞色素P450_2B酶的活性分别是（13.40±3.15）pmol·min-1.mg-1和（7.04±2.09）pmol·min-1.mg-1。结论氯胺酮能够增加大鼠肝微粒中细胞色素P450含量,并能显著诱导细胞色素P450_2B酶的活性。     

GC/MS法同时检测生物样品中苯丙胺、甲基苯丙胺及MDMA

目的:建立体液和组织中苯丙胺、甲基苯丙胺和3,4 -亚甲基二氧基甲基苯丙胺(MDMA)的简便快速、灵敏可靠的GC/MS检测方法。方法:样品经碱化,乙醚提取,TFA衍生化后,GC/MS全扫描定性检测,选择离子扫描(SIM)定量分析。结果:几种药物在血浆中的线性范围为0 .0 2 - 2 . 0 μg·ml-1,最低检出浓度为0 . 0 0 5 μg·ml-1(S/N≥3) ;肝脏中线性范围为0 . 0 5 - 5. 0 μg·g-1,最低检出浓度0. 0 .10 μg·g-1(S/N≥3)。相关系数大于或等于0 9980 ;回收率在92. 1% - 10 5. 2 %之间。结论:GC/MS方法适用于生物样品中苯丙胺、甲基苯丙胺和MDMA浓度的检测。     

中国人群9号染色体10个STR基因座的遗传多态性及其在法医学中的应用

目的：了解９号染色体１０个ＳＴＲ基因座在中国汉族群体的遗传多态性及其法医学应用价值。方法：无血缘关系的８３份个体样本采自甘肃省白银地区汉族群体。１８个无关汉族家系共１３１份血样采自同一地区。ＰＣＲ扩增９号染色体１０个ＳＴＲ基因座。ＰＣＲ产物由非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果：１０个ＳＴＲ基因座在中国汉族群体均具有遗传多态性。家系调查结果表明,１０个ＳＴＲ基因座在世代传递中遵循孟德尔常染色体共显性遗传规律。结论：为人类群体遗传研究提供了９号染色体１０个ＳＴＲ基因座的中国汉族群体数据。