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1.
目的 建立表达PiggyBac转座酶转基因小鼠模型,为研究PiggyBac转座子介导基因修饰在小鼠中的应用提供工具。方法利用Cytomegalovirus (CMV) 启动子驱动PiggyBac转座酶基因的表达,经显微注射法建立C57BL/6J表达PiggyBac转座酶的转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,RT-PCR检测PiggyBac转座酶在小鼠生殖系睾丸中的表达情况。PiggyBac转座酶转基因小鼠活性的检测,是通过与转座子供体转基因小鼠杂交检测供体位置变化来确定的。结果显微注射产生7只转基因小鼠并能传代,经RT-PCR筛选出一株在睾丸中相对高表达PiggyBac转座酶的转基因小鼠。随后与转座子供体转基因小鼠杂交,子代双阳小鼠与野生型小鼠杂交基因型分离,产生的子代转座子供体单阳性小鼠中具有转座子供体片段的转座反应。结论成功建立了表达PiggyBac转座酶转基因小鼠动物模型,该模型为PiggyBac转座子技术在小鼠中的应用提供了有价值的工具动物。  相似文献   
2.
目的建立白介素34转基因小鼠,研究该基因在小鼠中表达对小鼠免疫系统的作用。方法把人的IL34基因插入CMV启动子下,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立IL34转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定IL34转基因小鼠的基因表型,Western blotting检测IL34蛋白的表达水平,组织化学染色观察IL34转基因小鼠重要器官的病理改变。结果建立了2个品系的IL34转基因小鼠。转入的人IL34基因在脾脏中的表达水平高于内源性IL34。组织学分析显示IL34转基因小鼠各重要器官如脑,心,肝,肾,肠等的形态结构均正常,但脾脏的生发中心比较活跃,白髓的范围比野生型小鼠大。结论成功建立了IL34转基因小鼠,IL34基因的过度表达对免疫系统作用需要进一步探讨。  相似文献   
3.
巨噬细胞具有很强的异质性与可塑性,能够在不同的刺激条件下发生相应的功能与表型变化,在损伤刺激后的组织修复中发挥关键作用。目前,大量研究表明巨噬细胞代谢能通过调控巨噬细胞表型与功能影响组织修复过程。文章综述了巨噬细胞代谢与组织修复的关系,总结了M1和M2两种巨噬细胞在糖酵解、三羧酸循环、脂肪酸氧化、精氨酸代谢等过程中的特点,以及靶向作用于巨噬细胞代谢过程中关键底物和激酶对调控组织修复的相关研究进展。  相似文献   
4.
目的 主动脉缩窄小鼠是常用的心肌病模型,但是很多研究者在使用该模型时会遇到判定模型成功与否的问题。本文结合国内外该模型的建立与评价技术,利用显微手术建立主动脉缩窄小鼠模型,并利用超声多普勒技术分析建立该模型早期评价的方法。方法 C57BL/6J小鼠经开胸手术结扎主动脉弓,获得理论直径为0.4mm的无名动脉远端主动脉弓重建血管;超声多普勒分析重建小鼠主动脉弓及其分支内血流流速,分析小鼠主动脉重建情况;记录小鼠生存情况,Spss16.0软件Kaplan-Meier curves分析小鼠存活率;将术后1周多普勒血流分析数据与术后4周左室壁厚度做相关性分析;生物信息学总结分析国内外立该模型的技术与评价,综合分析建立主动脉缩窄小鼠模型的超声多普勒早期评价方法,为相关研究者提供参考。 结果 术后8周时重建组(TAC)小鼠存活率为85.0%(n=40),而假手术组(Sham)小鼠存活率为96.4%(n=28);小鼠术后1周超声多普勒检测无名动脉血流/左颈总动脉血流比值(IA/LCCA)大于5.9时,术后4周舒张期左室后壁厚度(LVPWD)显著增厚占比达100%;IA/LCCA于5.9~10.7之间时与LVPWD成线性相关,当IA/LCCA大于10.7时线性关系下降,LVPWD增大趋势变缓。结论 TAC小鼠术后1周时使用多普勒血流分析,IA/LCCA比值大于5.9时,术后4周小鼠LVPWD即发生显著增厚,超声多普勒血流分析可以作为模型是否成功的早期评价方法。  相似文献   
5.
目的 探讨二尖瓣手术同期修复中度及以下三尖瓣关闭不全对患者三尖瓣及右心功能早中期预后的影响。方法 回顾性分析2011—2014年于阜外医院因二尖瓣疾病需要接受心脏外科手术合并中度及以下三尖瓣反流461例患者的临床资料,其中男309例、女152例,中位年龄53.00(44.00,60.00)岁。根据是否同期行三尖瓣手术修复(包括DeVega术和Kay’s术的缝线成形和成形环植入)分为单独二尖瓣手术组(nTAP组,289例)和同期三尖瓣手术组(TAP组,172例),记录两组患者手术前后左心室舒张末期内径、室间隔厚度、左心室后壁厚度、右心室内径的变化。同时对43例三尖瓣环直径<40 mm的TAP组患者术前、术后右心室内径变化进行亚组分析,探讨三尖瓣手术对改善患者右心功能的影响。结果 中位随访时间为3.00(0.10~9.30)年。围术期无患者死亡。术后3个月,TAP组患者右心室前后径较nTAP组显著改善[右心室前后径变化分别为–1.00(–3.00,1.00)mm vs. 0.00(–0.20,2.00)mm,P=0.048]。术后3年,TAP组右心室前后径的改善仍然较nTAP组患者显...  相似文献   
6.
目的探讨大鼠出生后不同时间点心脏组织中miR-23a的表达变化,为阐明哺乳动物出生后心脏发育的调节机制提供线索。方法分离不同年龄(胚胎19 d、出生后1 d、7 d、2周、3周、4周、8周)大鼠心脏组织,利用TaqMan qPCR检测microRNA(miRNA)表达水平;比较不同年龄心脏组织中miR-23a等miRNA的表达变化。结果胚胎19 d、出生后1 d和7 d,miR-23a表达稳定;出生后2周miR-23a表达水平显著上调,达到胚胎19 d的3.6倍,并且在出生后3周(7.7倍)、4周(4.6倍)、8周(5.1倍)都维持高水平表达状态。结论出生后心脏组织生长方式由心肌细胞增殖为主向心肌细胞肥大的过程中,miR-23a很可能发挥了重要作用。  相似文献   
7.
目的 建立心脏特异表达(p)RR的转基因小鼠,研究(p)RR在心肌病发病过程中的调节作用.方法 将(p) RR基因插入到心脏特异表达启动子α-MHC下游,构建转基因表达载体,通过显微注射的方法建立(p)RR转基因小鼠,PCR法鉴定转基因小鼠的基因型:Western blot和免疫组化的方法检测(p)RR在心脏组织中的表达;利用小动物超声仪检测转基因小鼠的心脏结构和功能;双色免疫荧光共聚焦进行(p)RR蛋白在转基因小鼠中的亚细胞定位,Western blot方法检测了钙泵(ATP2A2)、钠-钙交换体1(NCX 1)以及肌钙蛋白T(cTnT)在转基因小鼠心脏组织中表达量的变化情况.结果 建立了心脏高表达(p)RR的转基因小鼠品系;内源性和转基因高表达的(p)RR蛋白均定位在细胞内高尔基体和内质网上;心脏特异高表达(p)RR蛋白使小鼠心脏收缩功能增强,主要表现在与同窝阴性对照小鼠相比,转基因小鼠收缩期左室内径( LVID,systolic)降低9% (P<0.05,n=18),收缩期容积( LVESV,systolic)减少了23% (P <0.05,n=18),射血分数EF( ejection fraction)升高14% (P<0.01,n=18),短轴缩短率FS( fraction shortening)升高20% (P <0.01,n=18);和心脏收缩功能和钙离子相关的ATP2A2和NCX 1表达均下调,而cTnT表达量上调.结论 在心脏中过表达(p)RR能够引起心脏收缩功能明显增强,同时直接或间接调节ATP2A2、NCX 1和cTnT表达.提示(p)RR可能是调节心脏中的钙离子而参与影响心肌功能.  相似文献   
8.
目的建立系统表达肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)的转基因动物模型,利用转基因动物模型研究HB-EGF与组织纤维化的关系。方法RT-PCR法克隆小鼠HB-EGF基因,将其插入Chickenβ-actin启动子下游,构建Chickenβ-actin-HB-EGF表达载体,利用显微注射的技术把表达载体注射到受精卵的雄原核中,建立HB-EGF转基因小鼠。利用特异引物PCR的方法鉴定转基因的基因型,采用Western Blot方法鉴定HB-EGF基因在全身组织的表达。分别取HB-EGF转基因鼠与同窝阴性小鼠的肝、肾、肺及膀胱组织进行Massion染色。结果建立了系统表达HB-EGF转基因小鼠,Western Blot发现其HB-EGF在肝、肺、肾及膀胱的表达与同窝阴性对照小鼠相比明显增加。Massion染色结果表明转基因鼠肝、肺、肾及膀胱组织纤维化程度明显高于同窝阴性对照小鼠。结论成功建立了系统表达HB-EGF转基因小鼠,HB-EGF的过度表可显著加重组织纤维化程度。  相似文献   
9.
含胱冬肽酶富集功能域的凋亡抑制因子(apoptosis repressor with CARD,ARC)蛋白是20世纪末发现的在心肌、骨骼肌和大脑等终末分化组织中大量表达的抗凋亡蛋白。ARC的主要功能是抗凋亡作用。由于其在心脏中表达的特异性和抗凋亡的多层次性,使ARC在心脏中的作用成为近年来研究的热点。本文主要对其抗凋亡途径以及近年来在心肌病中的研究进展两方面进行综述。  相似文献   
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