建立夹心ELISA检测RANTES方法及在小肠移植中的应用

背景：RANTES及其受体介导的细胞免疫是同种异体小肠移植急性排斥反应发生的重要组成部分,小肠移植后血清中RANTES水平有可能作为早期检测急性排斥反应发生的较敏感的免疫指标。目的：建立夹心ELISA检测RANTES的方法,并将其应用于大鼠小肠移植模型,探讨其作为检测早期急性排斥反应指标的可能性。方法：以辣根过氧化物酶标记RANTES mAbs,通过竞争ELISA检测抗RANTES mAb识别的表位,建立双夹心ELISA试剂盒并检测其敏感性,然后将其应用于大鼠小肠移植模型中RANTES的检测。结果与结论：以anti-RNATES mAb No.2（5mg/L）为包被抗体,HRP-anti-RNATES mAb No.4（1∶800）为酶标抗体建立了双抗体夹心ELISA法,其敏感性达到0.5μg/L。异基因大鼠小肠移植模型术后血清RANTES明显增高。提示成功建立了特异性强、灵敏度良好的检测RANTES的双抗体夹心ELISA法,为早期诊断小肠移植排斥反应提供了一种新的方法。     

刍议直肠癌的鉴别诊断与治疗

目的浅析直肠癌的早期鉴别诊断与治疗的意义。方法通过总结临床治疗中医生对直肠癌的诱发因素、早期症状与临床表现的记录,探索直肠癌的鉴别诊断和治疗方法。结果直肠癌的诊断可通过大便常规＋潜血、肿瘤标志物检查、气钡灌肠对比造影、胸透或胸片、CT检查、肛门控便功能检测等检测,应与痔疮、直肠息肉、肛裂等相鉴别,早期鉴别诊断,及时治疗,主要采取手术治疗,配合化疗和放疗辅助治疗,中医药治疗也是值得考虑的方法。结论直肠癌是是一种常见疾病,随着发病率的日益增高,越来越值得关注,由于其症状不明显,必须早期鉴别诊断,及时采取治疗措施,给患者创造生存率,提高患者的生活质量。     

临床感染常见病原菌及耐药性分析

抗生素的广泛使用及不合理应用,造成耐药的细菌越来越多,细菌耐药性已成为医药界共同关注的问题.目前最关注的是耐甲氧西林的葡萄球菌,耐万古霉素的肠球菌和产β-内酰胺酶的革兰氏阴性菌等.因此药敏试验及合理正确的使用抗生素对减少耐药菌株的产生,控制感染的发生是至关重要的.我们将2002年3月至2003年3月我院所分离533株病原菌氏及对12种抗生素的耐药性报告如下.     

建立夹心ELISA检测RANTES方法及在小肠移植中的应用

背景:RANTES 及其受体介导的细胞免疫是同种异体小肠移植急性排斥反应发生的重要组成部分,小肠移植后血清中RANTES 水平有可能作为早期检测急性排斥反应发生的较敏感的免疫指标.目的:建立夹心ELISA检测RANTES的方法,并将其应用于大鼠小肠移植模型,探讨其作为检测早期急性排斥反应指标的可能性.方法:以辣根过氧化物酶标记RANTES mAbs,通过竞争ELISA检测抗RANTES mAb 识别的表位,建立双夹心ELISA试剂盒并检测其敏感性,然后将其应用于大鼠小肠移植模型中RANTES的检测.结果与结论:以anti-RNATES mAb No.2 (5 mg/L) 为包被抗体,HRP-anti-RNATES mAb No.4(1:800)为酶标抗体建立了双抗体夹心ELISA法,其敏感性达到0.5 μg/L.异基因大鼠小肠移植模型术后血清RANTES明显增高.提示成功建立了特异性强、灵敏度良好的检测RANTES的双抗体夹心ELISA法,为早期诊断小肠移植排斥反应提供了一种新的方法.     

建立夹心ELISA检测RANTES方法及在小肠移植中的应用

背景：RANTES 及其受体介导的细胞免疫是同种异体小肠移植急性排斥反应发生的重要组成部分,小肠移植后血清中RANTES 水平有可能作为早期检测急性排斥反应发生的较敏感的免疫指标。 目的：建立夹心ELISA检测RANTES的方法,并将其应用于大鼠小肠移植模型,探讨其作为检测早期急性排斥反应指标的可能性。 方法：以辣根过氧化物酶标记RANTES mAbs,通过竞争ELISA检测抗RANTES mAb 识别的表位,建立双夹心ELISA试剂盒并检测其敏感性,然后将其应用于大鼠小肠移植模型中RANTES的检测。 结果与结论：以anti-RNATES mAb No.2 (5 mg/L) 为包被抗体,HRP-anti-RNATES mAb No.4(1∶800)为酶标抗体建立了双抗体夹心ELISA法,其敏感性达到0.5 μg/L。异基因大鼠小肠移植模型术后血清RANTES明显增高。提示成功建立了特异性强、灵敏度良好的检测RANTES的双抗体夹心ELISA法,为早期诊断小肠移植排斥反应提供了一种新的方法。     

白细胞相关免疫球蛋白样受体2(CD306)真核表达载体构建及蛋白的纯化与鉴定

背景:目前国内外对白细胞相关免疫球蛋白样受体(leukocyte-associated immunoglobulin like-receptor,LAIR)家族中LAIR1 的生物学功能研究已较清晰,而关于LAIR-2分子在机体内的生物学功能尚缺乏相关报道.目的:为进一步研究LAlR-2的体内生物学功能,构建其真核表达载体,纯化并鉴定蛋白.设计、时间及地点:单一样本观察实验,于2007-06/2008-06在解放军第四军医大学完成.材料:载体pig/3c由英国牛津大学徐小宁博士惠赠.载体pcDNA3.1由荷兰Meyaard博士惠赠.中国仓鼠卵巢细胞系CHO由解放军第四军医大学免疫学教研室冻存.方法:构建plg/3c-LAIR-2及pcDNA3.1-LAIR-2两个真核表达载体,电转染法转染CHO细胞建立稳定表达LAIR-2-Fc融合蛋白及LAIR-2全长蛋白分子的细胞株,通过Western blot、细胞免疫化学、流式细胞术分析实验鉴定真核表达LAIR-2蛋白分子与抗原核表达LAIR-2 mAbs的结合活性.主要观察指标:稳定转染细胞系的建立及真核表达蛋白的纯化和鉴定.LAIR-2蛋白与相应单克隆抗体的结合活性.结果:构建真核表达载体并成功转染CHO细胞,建立稳定分泌LAIR-2-Fc融合蛋白的转染细胞系及稳定分泌LAIR-2蛋白的转染细胞系,分别命名为CHO/LAIR-2-Fc以及CHO/LAIR-2.Western blot实验表明真核表达的LAIR-2全长蛋白分子均可与三株抗LAIR-2 mAb 1A7、3H12及4A9发生特异性结合反应.免疫细胞化学、流式细胞术分析实验结果表明抗原核细胞表达蛋白的三株LAIR-2单克隆抗体中,1A7不能结合pcDNA3.1-LAIR-2转染的CHO细胞内的LAIR-2,面3H12和4A9均可以很好结合细胞内的LAIR-2.结论:实验成功构建了plg/3c-LAIR-2及pcDNA3.1-LAIR-2两个真核表达载体,成功转染CHO细胞并建立稳定表达LAIR-2-Fc融合蛋白及LAIR-2全长蛋白分子的细胞株.真核表达的LAIR-2蛋白分子与抗原核表达的LAIR-2 mAbs有良好的结合活性.     

低位直肠癌保肛术后吻合口漏9例的原因及治疗

目的:探讨低位直肠癌保肛术后吻合口漏的原因及合理有效的防治方法.方法:对低位直肠癌全系膜切除低位吻合手术后吻合口漏的发生及治疗情况进行回顾性分析.对吻合口漏的患者采用手术及保守治疗(骶前双腔管冲洗引流加肛管引流).结果:共行低位保肛手术412例,术后发生吻合口漏9例(2.2%).患者的年龄、吻合技术和肿瘤组织学分型与吻合口漏的发生无关.而患者的性别、肿瘤的大小与吻合口漏的发生密切相关(P＜0.05).行手术治疗(HA手术)2例,采用保守治疗7例均痊愈出院,吻合口漏发生至出院时间10～15 d.结论:充分的术前准备和良好的吻合技术是防止吻合口漏发生的关键.正确的判断吻合口漏发生及采用正确的处理方法是治疗的前提,双腔引流管加肛管引流是保守治疗吻合口漏的有效方法.     

谷氨酰胺双肽对全胃切除患者结局的影响

目的观察丙胺酰．谷氨酰胺双肽（Ala—Gln）对全胃切除患者结局的影响。方法选取符合研究方案、需要接受6天肠外营养的择期全胃切除患者40例，随机分为研究组和对照组，每组20例。两组均行全胃切除，并经外周静脉穿刺中心静脉置管途径给予等氮、等热量的肠外营养支持，其中研究组添加Ala—Gln0．5g·kg^-1·d^-1，对照组接受的营养液只含有平衡氨基酸。两组分别于术前1天，术后3小时，1、4和7天采血2．5ml，测定终点指标及替代有效性指标。结果与对照组相比，研究组感染相关并发症（P〈0．05）和住院时间（P〈0．01）显著降低，CD4和CD4／CD8比值显著升高（P〈0．01），肿瘤坏死因子α、可溶性白细胞介素-2受体和C反应蛋白显著降低（P〈0．01）。结论Ala-Gln可明显增强全胃切除患者的免疫力，对临床近期预后有较好的影响。     

带状疱疹与气温变化关系的研究

为探讨带状疱疹（ＨＺ）与气温变化的关系。我们回顾分析了１０２８例ＨＺ与其气温的相关情况。八年中发病以季、月、天对比。在日接诊多者的天数中每年取样４天分析。结果ＨＺ发生在三季度的比例（３２０５％）比一季度（１８８５％）大;八月份（１１２９％）比一月份（０５１％）大;日温差大的天数八月份（１９４）恰比一月份（１０１）多,有显著差异（Ｐ＜００１）。但病人免疫学检查的异常数,三季度并不比一季度多。ＨＺ发生与接诊日前１０天内的日最高气温的前后温差有关。当温差大于７℃时,日接诊多者的天数（５２）明显多于日接诊少者的天数（３５）。同样,ＨＺ发生与接诊日前１０天内的最高最低的前后温差有关。日接疹多者,其气温变化幅度都大（平均上升的前后温差为１５６６℃,平均下降的前后温差为１３９２℃）;接诊ＨＺ的天数,气温变化下降时（１８）比上升时（１４）多,说明气温下降时诱发ＨＺ多。在ＨＺ病史的诱因中,气候变化占首位为３９８１％。以上说明,ＨＺ的发生与气温变化有密切关系,气温变化是ＨＺ发生的重要诱因。此为预防提供了新的理论依据