胸苷磷酸化酶在浸润性乳腺癌中的表达及其临床病理学意义

目的：研究胸苷磷酸化酶（thymidine phosphorylase,TP）在浸润性乳腺癌中的表达及其临床病理学意义。方法：应用免疫组化法检测103例浸润性乳腺癌及24例乳腺良性病变中TP的表达情况。分析其在乳腺良恶性病变中的表达差异及其临床病理学意义。结果：浸润性乳腺癌组织中TP的表达明显高于正常组织,TP高表达组中淋巴结转移率明显高于TP低表达组。TP的表达与TNM临床分期、组织学分级呈正相关,而与患者年龄无关。结论：TP可作为浸润性乳腺癌判断预后的一个指标。     

放射诱导HSV-TK基因在肺癌细胞中靶向、高效性表达的研究

目的 构建放射诱导的同步放大基因电路,通过基因电路调控HSV-TK基因在肺癌细胞中靶向、高效性表达,以提高放射-基因治疗的有效性和靶向性.方法 利用分子克隆的方法将HSV-TK基因插入到同步放大基因电路载体的下游,并采用脂质体介导重组载体和对照载体转染肺癌细胞A549;G418筛选阳性克隆,转染细胞给予2Gy X线照射后,检测照射前后不同时相点细胞内TK表达情况,及不同浓度前药GCV对转染重组载体和对照载体的肺癌细胞的生长抑制率.结果 照射后转染同步放大重组载体的细胞内TK的表达明显强于对照组,且随时间的推移而逐渐增强,以照射后16h最为明显.同一浓度的GCV对转染同步放大载体的A549细胞的抑制率明显高于对照组和未转染组,IC50也明显低于对照组和未转染组.结论 同步放大基因电路明显增强了靶细胞内HSV-TK基因的表达,进一步完善了放射-基因治疗这一新的肿瘤治疗模式.     

高效表达的NO对肺腺癌细胞A549放射敏感性的影响

目的 研究同步、高效表达的一氧化氮（NO）对肺腺癌细胞A549放射敏感性的影响,探寻增强肿瘤放射敏感性的新途径.方法 利用前期构建的可调控目的 基因高效表达的载体pfos-iNOS/GFP转染肺腺癌细胞A549,将阳性转染细胞和未转染细胞给予2 Gy X线照射后,检测细胞照射前后不同时相点NO的产量;给予不同剂量的X线照射后,检测照射后各组细胞的存活率,根据细胞存活率分别绘制各组细胞的辐射剂量-存活曲线,并进一步通过计算Do值及放射增敏比（SER）分析各组细胞放疗敏感性的变化.结果 转染载体pfos-iNOS/GFP的细胞照射后,NO浓度较照射前明显增高,其中照射后16 h较照射前增强10倍.转染治疗载体组Do值（1.16 Gy）明显低于未转染组（3.93 Gy）,治疗载体组的放疗敏感性是对照组的3.5倍.结论 高效表达的NO使体外肺腺癌细胞的放射敏感性明显增强,为肿瘤放疗增敏提供了新的模式.     

放射诱导的一氧化氮同步放大基因电路的构建及鉴定

背景与目的 正反馈基因电路（genecircuits）对基因表达有放大作用，目的 基因在细胞内的同步化表达可进一步增强基因治疗效果。本研究旨在构建由放射诱导的一氧化氮（nitric oxide，NO）同步放大基因电路，以探索提高目的基因表达水平、延长表达时间的新途径，从而进一步完善肿瘤放射基因治疗模式。方法 将具有放射诱导性的c-fos启动子与诱导性一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）串联，构建c-fos启动子驱动的iNOS和绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）双顺反子表达载体pros-iNOS／GFP；用脂质体介导该载体转染肺腺癌A549细胞，予以一定剂量照射，观察照射后不同时相点细胞荧光强度，检测iNOS蛋白表达水平。结果转染载体pros-iNOS／GFP的细胞照射后细胞荧光强度、iNOS表达水平均较对照组明显增加，其中以照射后16h增加最为明显。结论成功构建了放射诱导的NO同步放大基因电路，大大提高了放射诱导的目的基因的表达水平，为进一步提高肿瘤放射基因治疗的疗效奠定了理论基础。     

应用果冻壳制作雾化机盛药杯

目前在临床上较为常见的两款雾化机分别为：粤华牌超声波雾化器（广东粤华医疗器械有限公司生产）和402AI型超声雾化器（江苏鱼跃医疗设备有限公司生产）。由于超声雾化机盛药杯底部的塑料过于单薄，质地较脆，临床使用中极易出现药杯底部塑料破损，厂家配备的盛药杯仅4个，较为有限，在医疗市场上又较难找到配套产品和替代产品，     

尼莫地平HPMC骨架片的药物释放影响因素研究

选用HPMC为骨架材料，将难溶于水的尼莫地平制成缓释骨架片，考察HPMC的粘度、羟丙基和甲氧基含量、用量、粒径、辅料和释放介质的pH对尼莫地平缓释片的体外释药速率的影响。结果表明：尼莫地平缓释骨架片的体外释放行为近似零级释放。HPMC用量、粘度、粒径和释放介质的pH均对体外释放行为有明显影响；同一粘度HPMC甲氧基不同对释放速率影响不明显；辅料乳糖的加入能使释药速率加快，而微晶纤维素和十二烷基硫酸钠的加入在本实验范围内影响不明显。     

放疗联合TK/GCV自杀基因系统对肺腺癌细胞凋亡活性的影响

目的研究放疗联合高效表达的胸苷激酶/丙氧鸟苷(TK/GCV)自杀基因系统对人肺腺癌细胞株A549细胞凋亡活性的影响,探寻肺腺癌放化疗联合治疗的新途径。方法利用前期研究成功构建的可调控自杀基因TK高效表达的pfos-iNOS/TK治疗载体转染A549细胞筛选阳性克隆。将阳性转染细胞(转染治疗载体组)和未转染的对照细胞(未转染组)分别给予2 Gy的X射线照射和10μmol/L、1000μmol/L的GCV。荧光显微镜观察细胞凋亡情况,检测各组细胞的凋亡率。结果给予10μmol/L、1000μmol/L的GCV作用后,治疗载体组凋亡率高于未转染(P<0.05);X射线照射联合GCV作用后,转染治疗载体组大量细胞发生凋亡,而未转染组仅有少量细胞发生凋亡(P<0.01)。结论放疗联合高效表达的TK/GCV自杀基因系统显著提高了对肺腺癌细胞的杀伤作用,为肺癌治疗带来了新的希望。     

盐腌药材的贮存保管

盐腌药材是经过盐腌或盐水煮加工的药材,如全蝎、盐附子、盐苁蓉等。这类药材往往含较多的盐分,空气干燥时,药材内部水分散失,其外部易结晶起盐霜;而空气潮湿时,药材则易吸收过多的水分,使盐霜溶化,若长期受潮吸湿,则易变软、发霉,甚至腐烂。贮存时必须放于阴凉于煤通风处。霉雨季节,先将药材放在阴凉通风干燥处,使充分晾干,然后用缸或坛密封保存。有条件的可在容器底部放适量吸潮剂(如石灰、草木灰等)。大宗药材最好单库存放,以免相互影响。贮存过程中应经常检查,注意库房通风,发现药材受潮变软,应立即晾晒。     

放射诱导同步放大基因电路调控HSV-TK表达对肺癌移植瘤的抑制作用

目的构建由放射诱导的一氧化氮(NO)同步放大基因电路,并利用该基因电路调控单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)表达,以研究该基因电路对肺癌细胞体内的治疗作用。方法利用分子克隆的方法构建重组治疗载体pfos-iNOS/TK和对照载体pfos-TK/GFP,并采用脂质体介导重组治疗载体和对照载体转染肺癌细胞A549;G418筛选阳性克隆;建立BALB/c裸鼠移植瘤模型,检测接受照射和未接受照射的瘤组织内TK表达情况,分析给予照射和更昔洛韦(GCV)后肿瘤体积的变化。结果接受照射的瘤组织内TK表达明显强于未接受照射组,接受照射的转染治疗载体组强于接受照射的转染对照载体组,放射合并GCV可明显抑制转染治疗载体的移植瘤,且抑瘤率明显高于单纯照射、GCV治疗和转染对照载体的对照组。结论放射诱导的同步放大基因电路可明显提高体内转染细胞TK的表达,对肺癌移植瘤有显著的抑制作用,明显地提高了HSV-TK/GCV系统对肺癌细胞的敏感性,进一步完善了肿瘤的放射—基因治疗模式。