某些中药成分对豚鼠补体及经CVF处理的豚鼠补体活性的影响

该文研究人参茎叶多糖、田七多糖、绞股兰皂甙、白花蛇舌草煎液对补体及经CVF处理的豚鼠补体活性的影响,发现上述中药成分对正常豚鼠补体水平无明显影响,但对经CVF处理后的豚鼠低补体状态在连续给药5～8天后有一定促进恢复作用。给豚鼠腹腔注射50μg/kg的CVF,CH_(50)下降94％～97％,12天后才恢复正常。此时再次给予同样剂量的CVF,几乎不能再产生降补体作用,可能是由于已产生CVF抗体的缘故。用CVF造成动物低补体状态以研究某些中药成分的药理作用是一新的尝试。     

黄芪、党参、人参多糖对豚鼠免疫功能的影响*

 黄芪多糖(CVF)、党参多糖(CPS)、人参多糖（GPS），对正常豚鼠及经过眼键蛇蛇毒因子（CVF）处理后的低补体豚鼠免疫功能的影响，实验表明：3种多糖对正常豚鼠无影响，而对经过CVF处理后的补体下降、吞噬率下降的豚鼠有促进补体恢复的功能，促进中性白细胞吞噬率提高和恢复。电镜观察可见经注射CVF后豚鼠血液中性白细胞颗粒状物增多，吞噬率下降，再给3种多糖后颗粒减少，吞噬功能恢复。     

广西眼镜王蛇蛇毒磷脂酶A_2的分离纯化及电镜观察

广西眼镜王蛇(Ophiophagus hannah)蛇毒,经羧甲基纤维素离子交换层析,可得20个蛋白峰,磷脂酶A_2活性以第一峰活性最强,第二和第十二峰也有部分活性.取第一峰观察其对红细胞电泳速度的影响及对红细胞膜影响的电镜观察,发现磷脂酶A_2对红细胞电泳速度有明显的延缓作用,并对人的红细胞膜有明显的作用,但对山羊红细胞膜未见明显改变.研究还表明眼镜王蛇毒中磷脂酶A_2也具有很好的热稳定性.     

广西眼镜王蛇毒一种碱性蛋白的分离纯化及性质研究

目的:广西眼镜王蛇毒一种碱性蛋白的分离纯化和性质研究.方法:分离纯化采用DEAE-Sepharose CL-6B离子交换柱层析,Sephadex G-75凝胶过滤和CM-Sepharose CL-6B离子交换柱层析;通过电泳,磷脂酶A2(PLA2)酶活力测定,氨基酸组成分析,N端序列测定及药理实验进行性质研究.结果:从广西眼镜王蛇毒中分离到一种电泳纯的碱性蛋白(命名为CM-IV),相对分子质量约为14 000,等电点约为8.65;PLA2的比活力为23 μmol·mg-1/min.氨基酸组成分析表明,其分子中Cys的含量占6.85%;利用蛋白质直接测序N端序列为TKCYVTPDVK.药理实验表明它对实验用小白鼠有致死性(LD50约为0.2 mg/kg),并具有心脏毒性,但无血小板抑制活性.根据Genebank Blast 分析软件,它的N端序列与神经毒素具有高度的同源性.结论:这种碱性蛋白可能为神经毒素,但却拥有PLA2的活力.     

自制CM-C对眼镜王蛇蛇毒的柱层析及其中五种酶的分布

眼镜王蛇(Ophiophagus hannah)广泛分布于我国北回归线以南各省区,我区以河池、柳州、百色、南宁和玉林等专区为多.Joubert用柱层析分离出眼镜王蛇蛇毒两种神经毒素,并测定其氨基酸序列.Mebs测定了眼镜王蛇原蛇毒某些酶的活性.1979年我院     

广西眼镜王蛇毒杂合性酸性磷脂酶A2的基因克隆与序列分析

目的研究广西眼镜王蛇毒杂合性酸性磷脂酶A2(APLA2)的基因克隆与序列分析.方法从广西眼镜王蛇毒腺中提取总RNA,根据种属关系接近的台湾眼镜蛇毒APLA2两端非翻译区的保守序列设计引物,利用RT-PCR进行体外扩增,获得磷脂酶A2基因,克隆至pMD18-T载体,经测序筛选出APLA2-1,APLA2-2及一个新的酸性磷脂酶A2(命名为APLA2-3).根据测序结果确定了APLA2-3基因的全序列,并由此推导编码的氨基酸序列. 结果利用Antheprot 4.3c蛋白质序列分析软件包计算它的等电点为4.885,相对分子质量为16.543kD,并预测了它的二级结构和部分理化性质.同源性比较表明,APLA2-3的1～39位氨基酸残基序列与APLA2-2相同,其同源性为64%,而40～108位氨基酸残基序列与APLA2-1相同,其同源性为69%,109位氨基酸残基序列皆不同于这两种APLA2.结论 揭示了APLA2具有基因多样性,可能与物种进化和生物活性有关,并为进一步研究PLA2的结构与功能的关系提供更多的信息.     

广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1的表达

将广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1(APLA2-1)基因克隆至表达载体pET28a(+),转化入大肠杆菌BL21,经过诱导,SDS-PAGE检测,重组质粒pET28a-APLA2-1在18KD有一明显的表达条带,表达产物APLA2-1约占细菌总量30%,并以包涵体的形式存在,将产物变复性后用Sephadex G-75 纯化,产物经过SDS-PAGE检测只有单一条带,通过Western-blot检测,证实纯化产物是酸性磷脂酶A2.对表达的APLA2进行酶活性和药理活性的测定.至此我们在大肠杆菌中表达了广西眼镜王蛇毒APLA2,这将为以后对PLA2的结构与功能的研究打下了良好的基础.     

动物脏器止血成份提取与应用(摘要)

外用止血药的研究颇多,利用中草药止血国内报道更多。止血药的研制,应考虑它们在机体的吸收、无害和符合止血机理。一般说来,有效的止血,除大的动脉、静脉破损切断,非用压迫、结扎或缝合的处理不可外,中等或小的血管出血的止血,要求能形成一种不可透过的、能对抗压力的凝块起堵塞作用。目前,止血的生化及分子生物     

广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2—1的表达

将广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2—1(APLA2—1)基因克隆至表达载体pET28a( )，转化入大肠杆菌BL21，经过诱导，SDS—PAGE检测，重组质粒pET28a—APLA2—1在18 KD有一明显的表达条带，表达产物APLA2—1约占细菌总量30％，并以包涵体的形式存在，将产物变复性后用Sephadex G—75纯化，产物经过SDS—PAGE检测只有单一条带，通过Western—blot检测，证实纯化产物是酸性磷脂酶A2、对表达的APLA2进行酶活性和药理活性的测定、至此我们在大肠杆菌中表达了广西眼镜王蛇毒APLA2，这将为以后对PLA2的结构与功能的研究打下了良好的基础。     

广西眼镜王蛇毒一种新的酸性磷脂酶A_2的基因克隆和性质

通过SephadexG 75 ,CM SepharoseCL 6B和DEAE SephadexA 5 0连续的柱层析 ,从广西眼镜王蛇 (Ophiophagushannah)蛇毒中分离到一种新的酸性磷脂酶A2 (pI 4 .0 ) ,命名为APLA2 2 .它的分子量约为 14 0 0 0 ,具有较高的磷脂酶活力 (4 2 9mol·g- 1·min- 1) .它对小鼠没有致死性 (LD50 >2 0mg·kg- 1) ,但具有抗血小板聚集功能及诱导水肿形成能力 .通过cDNA测序解决了它的完全的一级结构 .由cDNA推导的APLA2 2蛋白质全序列与福建眼镜王蛇和台湾眼镜王蛇蛇毒酸性磷脂酶A2 的同源性分别为73.9% ,64.7% ,它不存在 62～ 66位的“胰腺环” ,因而它可能是一种新的眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2 .APLA2 2基因克隆及其生化药理性质的研究 ,为探讨蛇毒活性蛋白结构与功能关系及蛇伤中毒机理创造了良好的条件 .