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目的:观察鳖甲煎丸含药血清促进人肝癌细胞Bel-7402的凋亡作用,探讨其抑瘤作用与VEGF/Dll4-Notch信号通路之间的关系。方法:制备各浓度鳖甲煎丸大鼠含药血清,采用 AnnexinⅤ/PI双染色流式细胞术检测鳖甲煎丸对Bel-7402细胞凋亡的影响,Western blot方法检测细胞中VEGF、Dll4、NICD蛋白表达情况。结果:AnnexinⅤ/PI双染色流式细胞术结果表明鳖甲煎丸可有效促进肝癌细胞Bel-7402的凋亡;Western blot 结果显示鳖甲煎丸能降低VEGF、Dll4、NICD蛋白表达。结论:鳖甲煎丸可通过降低VEGF、Dll4、NICD蛋白表达,阻断VEGF/Dll4-Notch信号转导,抑制肿瘤血管生成,减少肿瘤血液供应,最终控制肿瘤生长。 相似文献
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目的观察高效免疫调节剂对s180小鼠肿瘤抑制作用及对IL.6、IL-10表达的影响。方法建立S180肿瘤小鼠模型,将40只小鼠随机分为正常对照组、S180肉瘤模型组、环磷酰胺组(CTX组)、高效免疫调节剂组(HIS组),治疗10d后处死小鼠,剥取脾脏、肿瘤组织称重,计算脾指数及抑瘤率;采用放射免疫分析法检测血清IL-6水平;采用Westemblot法检测肿瘤组织IL-10表达情况。结果HIS可增强S180小鼠免疫功能,对肿瘤生长有明显抑制作用(P〈0.01);放射免疫分析法结果显示HIS能明显降低外周血IL-6水平(P〈0.01);West—emblot结果表明HIS能降低肿瘤细胞中IL-10表达(P〈0.01)。结论HIS可通过降低细胞因子IL-6、IL-10表达,抑制荷瘤机体Thl/Th2细胞的平衡向Th2细胞漂移,增强免疫功能,进而发挥抑瘤作用。 相似文献
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【立题依据及设计思路】 原发性肝癌是一种常见恶性肿瘤,探索行之有效的治疗方法,是一个亟待解决的问题。鳖甲煎丸是医圣张仲景所创,研究表明具有较好的抑制肝癌生长,防止肝癌转移的作用,但其机制不明。本实验拟观察鳖甲煎丸含药血清对肝癌Bel-7402细胞生长的影响,从细胞凋亡和肿瘤血管新生角度探讨其抗癌机制,为临床应用此方治疗肝癌提供理论与实验依据。 【实验内容】 (1)大鼠含药血清的制备;(2)MTT法检测不同剂量鳖甲煎丸含药血清对Bel-7402细胞增殖的影响;(3)流式细胞术检测含药血清对Bel-7402细胞凋亡情况;(4)蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax、ERK1、p-ERK、JNK、p-JNK等相关凋亡蛋白含量的变化,探讨其影响MAPK信号通路传导,促进肿瘤细胞凋亡的作用机制;(5)蛋白质印迹法检测肿瘤细胞VEGF、Delta-4、NICD等蛋白表达变化,探讨鳖甲煎丸影响VEGF-D114-Notch信号通路传导,抑制肿瘤血管生成的作用机制。 【材料】 SD大鼠、胎牛血清、中药、5-FU、相关抗体等。 【可行性】 (1)鳖甲煎丸以活血、补益、散结为主,既有攻伐之效,亦含补益之功。课题组前期在体实验证明鳖甲煎丸具有较好的抑瘤功效。血清药理学对于中药复方制剂的复杂化学成分能更好的反映药物在体内环境中产生药理效应的真实过程,在理论上具可行性。(2)课题组成员已掌握相关实验技术。(3)科研中心仪器设备能满足实验所需。 【创新性】 中药在抑制肝癌细胞增殖、控制瘤体生长等方面具有独特的优势。目前对中药抗肿瘤的研究仍以单味药或药物单体成分及临床经验方为主,而中医经典复方对肿瘤相关信号通路影响的研究则相当少见。本课题在前期鳖甲煎丸抑制S180实体瘤研究的基础上,通过体外实验观察其对人肝癌细胞Bel-7402的影响,并运用血清药理学、形态学、流式细胞术、MTT、蛋白质印迹等方法,试图从促进肿瘤细胞凋亡及阻碍瘤体内血管生成两方面,探讨鳖甲煎丸治疗肝癌的可能机制。本研究在思路上,将传统中医药理论与现代医学分子生物学理论相结合,探讨中药复方治疗肝癌机制。为中医经典复方治疗肿瘤提供理论基础。 相似文献
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目的:观察化痰法结合补气、活血法对肝星状细胞系HSC-T6生长的抑制作用及对相关凋亡蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。方法:制备相关化痰法药物血清,采用MTT法检测各组含药血清对HSC-T6细胞增殖的影响;AnnexinⅤ/PI双染法,流式细胞技术检测细胞周期及细胞凋亡率;Western blot方法检测细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果:MTT结果表明化痰法结合补气、活血法可有效抑制肝星状细胞HSC-T6的增殖;AnnexinⅤ/PI双染色流式细胞术检测结果表明化痰法结合补气、活血法可以促进HSC-T6细胞凋亡;Western blot结果显示化痰法结合补气、活血法能降低细胞中Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,且Bcl-2/Bax明显下降。结论:化痰法结合补气、活血法可通过抑制Bcl-2蛋白表达、促进Bax蛋白表达来诱导HSC-T6细胞凋亡,进而发挥抗肝纤维化作用。 相似文献
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目的:探讨化痰活血益气方的抗心肌肥厚作用及对神经内分泌因子血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、醛固酮(aldosterone,ALD)、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)及Akt信号磷酸化水平的影响。方法:采用异丙肾上腺素(Isoproterenol,Iso)诱导的大鼠心肌肥厚模型(1mg/kg/d,s.c.,连续10d)。48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、复方低剂量组(4.88mg/kg/d)、复方中剂量组(9.77mg/kg/d)、复方高剂量组(19.53mg/kg/d)和卡托普利组(0.02mg/kg/d),每组8只。14 d相应药物干预后,测定左心室重量指数(left ventricle mass index,LVMI)、全心重量指数(heart mass index,HMI),ELISA法检测血清AngⅡ、ALD、ET-1的含量,Western blot法检测心肌组织Akt蛋白水平及其活性形式p-Akt蛋白水平的表达并计算p-Akt/Akt比率。结果:与正常组相比,模型组大鼠的LVMI、HMI、AngⅡ、ALD、ET-1和p-Akt/Akt比率均明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,复方低、中、高剂量组与卡托普利组的LVMI、HMI、AngⅡ、ALD、ET-1和p-Akt/Akt比率均有不同程度的降低,复方中剂量组的上述各项指标始终存在显著性差异(P<0.05)。结论:①化痰活血益气方可以有效改善Iso诱导的心肌肥厚并降低神经内分泌因子AngⅡ、ALD、ET-1含量;②在各剂量组中,等效于成人剂量的中剂量组疗效最好,且该组疗效优于卡托普利组;③该复方可能通过抑制Akt信号的磷酸化来发挥其抗心肌肥厚作用。 相似文献
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目的探讨贞红生发酊对小鼠触须毛囊体外培养生长速度与形态学改变的影响。方法将离体培养的小鼠触须毛囊分别置入对照组和高、中、低3种浓度的贞红生发酊溶液中,显微镜下观察各组毛囊生长速度及形态学变化。结果生发酊各组毛囊生长速度均大于对照组(P<0.05或P<0.01),而生发酊各组间以1.0g/L组生长作用最佳(P<0.05)。对照组第8天毛囊出现退行性变化,而生发酊各组毛囊仍维持生长期毛囊形态,且以1.0g/L组毛囊生长情况最佳,部分毛囊生长可达20d以上。结论贞红生发酊对体外培养的小鼠毛囊生长有明显的促进作用,并能较长时间保持毛囊的生长形态。 相似文献
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