ZEB1通过上调ATM表达调控胃癌细胞AGS的放射敏感性

目的 探究锌指结构E-box结合蛋白1（ZEB1）对胃癌细胞AGS放射敏感性的影响并探究其可能的作用机制。方法 通过不同剂量（0、2、4、6、8 Gy）X射线照射AGS细胞,蛋白质印迹法（Western blot）实验观测细胞中ZEB1的表达量;取对数生长期AGS细胞,将过表达ZEB1、ZEB1干扰表达质粒以及相应的对照质粒（pcDNA3.1）和阴性对照干扰质粒转染至AGS细胞中,分别记为过表达ZEB1组、沉默ZEB1组、对照组和阴性对照组,细胞克隆实验检测过表达和沉默ZEB1对AGS细胞存活率的影响;流式细胞术实验检测细胞的凋亡率;Western blot检测细胞损伤相关组蛋白H2A（H2AX）、磷酸化H2AX（γ-H2AX）以及毛细血管扩张突变基因（ATM）表达量。结果 ZEB1在AGS细胞中的表达对放射剂量具有依赖性（F=58.57,P<0.05）;过表达ZEB1能够提高AGS细胞的存活,抑制γ-H2AX表达（t=12.18,P<0.05）,并阻碍细胞的凋亡（t=7.27,P<0.05）,并随时间上调ATM表达量（F=165.70,P<0.05）;沉默ZEB1降低AGS细胞的存活,增加γ-H2AX表达（t=12.88,P<0.05）和细胞的凋亡（t=8.36,P<0.05）,随时间下调ATM表达量（F=44.80,P<0.05）。结论 ZEB1通过上调ATM表达调控胃癌AGS细胞放射敏感性。     

结直肠癌术后患者应用奥沙利铂联合卡培他滨方案化疗对外周血淋巴细胞亚群的影响

目的观察ⅡB期~ⅢC期结直肠癌术后患者应用奥沙利铂联合卡培他滨方案化疗前后外周血淋巴细胞亚群水平变化,探讨奥沙利铂联合卡培他滨方案化疗对外周血淋巴细胞亚群的影响。方法ⅡB~ⅢC期结直肠癌术后患者62例为结直肠癌组,体检健康者84例为对照组。结直肠癌患者术后给予奥沙利铂130mg/m2,静脉滴注,2h滴注完毕,第1天;卡培他滨1000mg/m2,口服,2次/d,第1~14天;21d为1个周期,至发生严重不良发应或疾病进展停药。结直肠癌组于第1、3、5个周期化疗前1d,对照组于体检日采集外周血标本,应用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群百分比。比较结直肠癌组与对照组第1个周期化疗前1d淋巴细胞亚群百分比,结直肠癌患者第1、3、5个周期化疗前1d淋巴细胞亚群百分比。结果结直肠癌组第1个周期化疗前1dCD3⁺CD4⁺T淋巴细胞百分比[(41.12±8.07)%]、CD3⁺CD4⁺/CD3⁺CD8⁺T淋巴细胞比值[(1.57±0.61)%]、CD19⁺B淋巴细胞百分比[(9.10±3.32)%]、CD3^-CD16⁺/56⁺自然杀伤(natural killer,NK)细胞百分比[(17.56±9.28)%]均低于对照组[(44.96±6.34)%、(1.97±0.64)%、(13.93±5.16)%、(20.70±7.55)%](P<0.05),CD3⁺CD8⁺T淋巴细胞百分比[(26.58±8.29)%]高于对照组[(21.94±7.88)%](P<0.05),CD3⁺T淋巴细胞百分比[(71.79±9.17)%]与对照组[(70.90±8.37)%]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结直肠癌术后患者第3、5个周期化疗前1dCD3⁺CD4⁺T淋巴细胞百分比[(42.31±8.13)%、(43.31±8.13)%]、CD3⁺CD4⁺/CD3⁺CD8⁺T淋巴细胞比值[(1.67±0.69)、(1.76±0.64)]高于第1个周期化疗前1d(P<0.05),CD19⁺B淋巴细胞百分比[(8.36±3.58)%、(8.18±2.29)%]低于第1个周期化疗前1d(P<0.05),CD3⁺T淋巴细胞百分比[(71.86±10.71)%、(72.56±11.45)%]、CD3⁺CD8⁺T淋巴细胞百分比[(28.22±11.82)%、(27.46±10.57)%]、CD3^-CD16⁺/56⁺NK细胞百分比[(19.05±10.13)%、(18.63±11.66)%]与第1个周期化疗前1d比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论结直肠癌术后患者免疫功能降低,应用奥沙利铂联合卡培他滨方案辅助化疗可增强CD3⁺CD4⁺T淋巴细胞参与的细胞免疫功能,抑制CD19⁺B淋巴细胞相关的体液免疫,对CD3^-CD16⁺/56⁺NK细胞参与的固有免疫无影响。     

乳腺癌患者血清NTx和BSP表达水平与骨转移及预后的关系

目的 研究乳腺癌患者血清Ⅰ型胶原交联氨基末端肽(NTx)和骨唾液酸蛋白(BSP)表达水平与骨转移及预后的关系.方法 选取2013年10月至2015年10月河南省人民医院肿瘤中心71例女性乳腺癌骨转移患者和79例乳腺癌未见骨转移者分别纳入转移组和对照组,采用ELISA法检测血清NTx和BSP水平,然后根据患者具体情况进行治疗并随访预后,每3个月随访1次,时间为5年,比较两组患者血清NTx和BSP水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析NTx和BSP对乳腺癌骨转移诊断和预后预测的价值.结果 转移组血清NTx和BSP水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),NTx、BSP及二者联合诊断乳腺癌骨转移的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.789(95％CI:0.714～0.851)、0.710(95％CI:0.630～0.781)和0.838(95％CI:0.769～0.893);转移组和对照组5年死亡率分别为73.24％(52例)和59.48％(47例),中位生存时间分别为45个月(95％CI:37.9～52.1)和57个月(95％CI:53.7～60.3),两组生存时间比较差异有统计学意义(P<0.05);死亡组血清NTx和BSP水平高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05),NTx、BSP及二者联合预测乳腺癌患者预后的AUC分别为0.606(95％CI:0.523～0.684)、0.754(95％CI:0.677～0.821)和0.764(95％CI:0.688～0.829).结论 乳腺癌骨转移或死亡患者血清NTx和BSP水平均明显升高,NTx和BSP对骨转移诊断具有良好参考价值,但对患者预后预测的准确率较低.     

免疫组化技术在肿瘤学中的应用

免疫组织化学（immunohistochemistry）又称免疫细胞化学（immunocytochemistry），是利用抗原与抗体特异性结合的原理和特殊的标记技术，对组织和细胞内的特定抗原或抗体进行定位、定性或定量检测的一门技术。它是免疫学和传统的组织化学（histochemistry）互相结合而发展起来的，也可以称为原位免疫学（in situ immunology）。免疫组化技术以其特异性强、敏感度高、操作简便并且将形态学改变与功能和代谢结合起来等优点得到了最为广泛的推广和应用。尤其是在肿瘤病理学中已经成为常规的诊断方法，它不仅提高了肿瘤的诊断和鉴别诊断的准确性，而且在探讨肿瘤病因和发病机制、组织起源、功能分类、指导治疗、判断预后等各方面起到了不可估量的作用。     

索拉非尼治疗晚期原发性肝癌18例疗效及不良反应分析

目的评价索拉非尼治疗晚期肝细胞性肝癌的疗效及安全性。方法总结2009年10月~2011年6月本科应用索拉非尼治疗的18例晚期原发性肝癌患者的临床资料。观察其临床疗效、平均病情进展时间、6个月及1年生存率、生存质量和不良反应。结果服药8周后,18例患者均为稳定(100.00%);服药后16周后,1例患者腹水消失,为部分缓解(5.56%),13例为稳定(72.22%),4例为进展(22.22%)。平均服用索拉非尼时间11.9月,平均病情进展时间5.8个月。6个月生存率94.44%(17/18),1年生存率50.00%(9/18)。生存质量改善6例(33.33%),稳定8例(44.44%),下降4例(22.22%)。大多数患者为1~2级毒副反应。结论索拉非尼可提高晚期肝细胞性肝癌患者的6个月及1年生存率,且耐受性良好。     

转移性人肝癌裸小鼠原位种植合并姑息性射频消融模型的建立

目的 建立稳定有效的转移性人肝癌裸小鼠原位种植合并姑息性射频消融模型.方法 采用60只BALB/c-nu/nu裸小鼠,建立转移性人肝癌裸小鼠原位种植模型;随机分为两组,移植瘤术后30 d进行姑息性射频消融术和仅开腹(假手术组).两组中各随机抽出7只裸鼠,在2次手术后4周处死裸鼠,观察肝脏移植瘤大小、坏死范围并行免疫组织化学染色检测血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白的表达.结果 人肝癌裸小鼠原位种植成瘤率为100.0％ (60/60);姑息性射频消融成功率为96.7％ (29/30);与假手术组比较,姑息性射频消融组移植瘤组织VEGF和MMP-2蛋白表达降低(P＜0.01).结论 转移性人肝癌裸小鼠原位种植合并姑息性射频消融模型手术成功率高,移植瘤组织VEGF和MMP-2蛋白表达降低.     

伊立替康联合替吉奥或5-氟尿嘧啶方案二线治疗晚期胃癌的疗效观察

目的 比较伊立替康联合替吉奥与伊立替康联合5-氟尿嘧啶二线治疗晚期胃癌的临床疗效及 不良反应。方法 77例既往应用含铂方案治疗失败的晚期胃癌患者随机分为两组,A组: 36例患者接 受伊立替康联合替吉奥胶囊的化疗方案,B组: 41例患者接受伊立替康联合5-氟尿嘧啶的化疗方案,按 照WHO标准评价客观疗效和不良反应。结果 患者经治疗后, A组总有效率为 41.7％, 最主要的不良反 应为血液学毒性, 表现为白细胞和血小板降低、贫血及腹泻等, 机体可以耐受这些不良反应。B组总有 效率为39.2% , 主要的不良反应为静脉炎、腹泻等。A组和B组中位疾病进展时间（TTP）分别为4.8月 和3.1月（P=0.001）。结论 两种联合化疗方案都具有较好的疗效, 相对来说,A组具有中位疾病进展 时间长和不良反应相对小的优点, 且住院时间短, 可作为既往应用含铂方案治疗失败的晚期胃癌患者的 二线化疗方案之一。     

重组人干扰素α8在大肠杆菌中高可溶性表达及纯化

目的:在大肠杆菌表达体系中获得产量较高且有活性的重组人干扰素α8蛋白.方法:重组人干扰素α8的cDNA通过基因合成和PCR获得,构建重组人干扰素α8表达菌株.结果:表达的目的蛋白多以可溶性形式存在,占总上清液的52%,表达蛋白带有组氨酸标签经SDS-PAGE及Western Blot分析证实为重组人干扰素α8,通过Ni2+螯合柱及Q Sepharose FF柱层析纯化,纯度可达95.6%.结论:通过对重组人干扰素α8的cDNA序列进行适优化组合及选择合适的载体,在大肠杆菌表达体系中可获得产量较高且有活性的重组人干扰素α8蛋白.     

胸腔灌注重组人p53腺病毒联合顺铂等治疗肺癌胸腔积液

目的评价胸腔置管灌注重组人p53腺病毒（rAd／p53）联合顺铂等治疗肺癌恶性胸腔积液的疗效和安全性。方法38例肺癌恶性胸腔积液患者,胸腔置管灌注1×10^12VP,每周1次,48～72h内则序贯应用顺铂注射液80mg或5-氟尿嘧啶1．5g或表柔比星60mg,每周1种／1次。结果38例患者中完全缓解16例（42．1％）,部分缓解18例（47．4％）,无效4例（10．5％）,总有效率89．5％。主要不良反应为寒战发热76．3％（29／38）、胸痛55．3％（21／38）、恶心呕吐68．4％（26／38）,均可耐受。生活质量karnofsky评分,提高20分以上者23例（60．5％）,提高10-20分7例（18．4％）。结论rAd／p53注射液联合顺铂等治疗肺癌恶性胸腔积液疗效较好,无明显不良反应,对患者的生活质量有较好改善。     

重组人生长激素对败血症大鼠肠粘膜屏障功能保护作用的机制研究

目的观察重组人生长激素(RHGH)对败血症大鼠肠粘膜屏障功能的保护作用并探讨其可能的作用机制。方法采用腹腔注射E.COLI复制大鼠败血症模型。42只健康雌性SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、败血症组(S组)及RHGH治疗组(T组),S组及T组又依观察时点再分为1D、3D两个亚组(T1D,T3D,S1D,S3D)。应用RT-PCR、免疫组化、放射免疫等方法,动态观测肝组织IGF-1MRNA表达情况、肠粘膜BCL-2蛋白表达水平及细菌移位、血浆生长激素(GH)及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平及肠道形态等指标的变化情况。结果1RHGH能明显减轻败血症大鼠肠粘膜结构损伤,减轻肠道细菌移位。2T组大鼠肠粘膜BCL-2表达水平(T1D:2441±117;T3D:3628±235)明显高于S组水平(S1D:321±36;S3D:1873±57)(P<0.01)。3T组大鼠血浆GH水平〔T1D:(1.28±0.24)ΜG/L;T3D:(2.14±0.48)ΜG/L〕显著高于S组水平〔S1D:(0.74±0.12)ΜG/L;S3D:(0.60±0.18)ΜG/L〕(P<0.01)。4T组大鼠血浆IGF-1水平〔T1D:(168.94±65.67)ΜG/L;T3D:(201.56±64.98)ΜG/L〕明显高于S组水平〔S1D:(116.72±13.96)ΜG/L;S3D:(107.50±23.53)ΜG/L〕(P<0.05)。5T组大鼠肝IGF-1MRNA表达水平〔T1D:(0.98±0.20);T3D:(1.76±0.17)〕显著高于S组水平〔S1D:(0.38±0.09);S3D:(0.46±0.10)〕(P<0.01)。结论RHGH可能通过抑制肠粘膜上皮细胞凋亡及GH/IGF-1的作用来维护败血症大鼠肠粘膜屏障功能。