YTHDF1通过增强肝癌细胞肿瘤干性及激活Wnt/β-catenin信号通路促进肝癌进展

目的：探讨m6A甲基化修饰识别蛋白YTHDF1促进肝癌细胞肿瘤干性及激活Wnt/β-catenin信号通路促进肝癌进展的机制。方法：1.采用Western-Blot对六组肝癌组织和癌旁肝组织检测YTHDF1蛋白的表达情况。2.采用Western-Blot、RIP-PCR、qRT-PCR等检测β-catenin及其下游分子的表达。3.qRT-PCR、成球实验、克隆形成实验、CCK8等实验检测YTHDF1对肝癌细胞干性的影响。4.利用Kaplan-Meier生存曲线分析YTHDF1与肝癌患者临床预后的关系。结果：肝癌组织中YTHDF1的表达水平明显高于癌旁组织（p<0.001）；过表达YTHDF1后，β-catenin及其下游分子的表达增加；过表达YTHDF1后，肝癌细胞的干性标志物明显上调、增殖能力明显增强；Kaplan-Meier生存曲线表明高表达YTHDF1的患者预后更差。结论：YTHDF1在肝癌组织中高表达，促进了β-catenin及其下游分子的表达，增强了肝癌细胞的干性，对肝癌患者的预后产生了不良影响。     

维拉帕米通过下调硫氧还蛋白互作蛋白的表达抑制丙型肝炎病毒感染

目的 探讨抗高血压药维拉帕米是否可通过下调宿主硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的表达而抑制丙型肝炎病毒(HCV)的感染.方法 用不同浓度梯度的维拉帕米处理人肝癌细胞系Huh7.5.1,用qPCR和蛋白质印迹法检测TXNIP的表达.用维拉帕米处理Huh7.5.1细胞,同时加入细胞培养产生的HCV (HCVcc),48 h后检测HCVcc感染情况.用TXNIP siRNA转染Huh7.5.1细胞,检测下调TXNIP表达后,维拉帕米对HCVcc感染的影响;用TXNIP启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因表达质粒(pTXNIP-EGFP)转染Huh7.5.1细胞,分析维拉帕米对TXNIP启动子转录活性的影响.结果 与对照孔相比,维拉帕米(100、200、400 μmol/L)可下调Huh7.5.1细胞中TXNIP的表达,并呈现浓度依赖性(P＜0.05);并可抑制HCVcc对Huh7.5.1细胞的感染,且浓度越高抑制作用越明显(P＜0.05).进一步研究结果显示,与对照组相比,维拉帕米能够抑制pTXNIP-EGFP转染细胞中EGFP的表达水平(P＜0.05).结论 维拉帕米可下调TXNIP的表达从而抑制HCV感染,这可能是通过抑制TXNIP启动子的转录活性来实现的.     

肿瘤细胞核旁斑的生物学结构及功能研究进展

核旁斑是细胞核内一类重要的亚核体。核旁斑可通过拘留RNA或蛋白以及与miRNA相互作用等方式调控基因的表达，从而在肿瘤发生、发展过程中发挥重要作用,因此研究核旁斑在肿瘤细胞中的生物学结构及作用对肿瘤的诊疗具有重要意义。目前关于核旁斑在肿瘤细胞中的结构、功能及临床意义尚未完全明确。本文综述肿瘤细胞核旁斑的组成、结构、装配及其在肿瘤发生、发展过程的作用机制和临床意义，旨在为肿瘤的诊断、治疗和预后提供新的研究方向和线索。