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1.
VEGF及其调控因素的研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是诱导血管生成的促进因子,在创伤愈合、胚胎发育、肿瘤生长和转移过程中起着重要的作用,其表达受细胞遗传特性和肿瘤微环境中众多因素的影响,本文简要介绍VEGF基因的结构、功能与表达调控的研究进展。  相似文献   
2.
DNA甲基化与肿瘤   总被引:1,自引:0,他引:1  
摘要 DNA甲基化是肿瘤发生发展过程中较常见的表观遗传学改变,它与肿瘤的关系己成为肿瘤发病机制研究中的热点。DNA启动子区域甲基化被认为是除突变和缺失以外的抑癌基因功能失活的关键机制。抑癌基因启动子区域发生异常甲基化是在肿瘤早期就发生而且一直进行的,导致恶性肿瘤表型的表达,因而检测体液中相关基因的甲基化状态可用于肿瘤的早期诊断和预后分析。由于DNA甲基化是可逆的,如5-氮杂胞苷(5'-azacytidine), 5-氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine), zebularine等胞苷类似物正被用来治疗各种肿瘤,已展现出可喜的前景。本文对DNA甲基化概念、意义及应用的问题进行了综述。  相似文献   
3.
黄益玲  黄利鸣  尤程程 《中外医疗》2009,28(29):109-109
病理学是一门联系基础医学与临床医学的桥梁课程,病理学实验课在验证理论课知识,加深对理论知识的理解等方面发挥了十分重要的作用,根据学科发展趋势调整实验内容,改革传统的教学模式与方法,在病理学实验教学中积极进行知识、能力、素质三位一体教育,培养新型医学人才,具有十分重要的意义。  相似文献   
4.
 目的克隆天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)的cDNA, 构建原核表达TCS的质粒,从表达菌中分离纯化重组天花粉蛋白(rTCS)后,分析rTCS和nTCS(天然天花粉蛋白)对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法RT-PCR技术从新鲜栝楼叶片中扩增TCS cDNA,测序鉴定后克隆入表达载体pET-28a(+) 并转化入BL21(DE3)细胞。IPTG诱导表达后,用金属镍螯合层析法纯化rTCS蛋白, MTT法分别检测rTCS 和nTCS处理24、48和72h对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。结果1. 成功克隆获得TCS的cDNA并构建 pET-28a (+)-TCS原核表达质粒;该cDNA的碱基序列与基因库中注册的序列99.4%同源;2.在BL21(DE3)菌中,IPTG可诱导重组TCS蛋白表达,且表达的TCS主要以包含体的形式存在。在一定的时间范围内(0~8h);rTCS的表达水平与诱导时间正相关;3.用Ni-NTA树脂亲和层析法,从诱导表达菌中获得了高纯度的重组TCS蛋白;4. MTT法分析表明,rTCS和nTCS均对HeLa宫颈癌细胞的生长具有抑制作用。在0~100μg/ml的浓度范围内,随着药物浓度的增加及作用时间的延长,rTCS和nTCS对HeLa细胞的生长抑制率逐渐增大,且各组之间差异有统计学意义(P﹤0.05);rTCS的IC50小于nTCS。结论本实验克隆了TCS的cDNA,构建了表达载体pET-28a (+)-TCS,并成功地在E.coli中原核表达和纯化出重组TCS蛋白,发现纯化的rTCS和nTCS对HeLa细胞的生长都有明显抑制作用,并且rTCS的细胞毒性小于nTCS。  相似文献   
5.
病理学在医学课程设置中占有重要的位置,其教学质量的好坏影响着学生能否成为一名合格的医师。在病理教学实践中,教师必须激发学生的学习热情,通过运用联系的观点来加深理解,应用多媒体教学和传统教学相互配合来达到提高教学质量的目的。  相似文献   
6.
目的构建抑癌基因p27高表达细胞株,研究其对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法运用RT-PCR技术从HeLaRNA中扩增p27 cDNA,连接酶连接至真核表达载体pcDNA3.1(+),所得的重组质粒pcDNA3.1(+)-p27用脂质体法转染子宫颈癌HeLa细胞,使用RT-PCR以及Western blot法筛选p27基因高表达的细胞株。MTT法和流式细胞术检测p27基因高表达对细胞增殖的影响。结果成功获得p27高表达的HeLa细胞株。细胞增殖分析和流式细胞术结果显示,p27基因高表达对细胞增殖有抑制作用,并明显增加G1期的细胞数(由44.4%增加到59%,P<0.05)。结论 p27基因在HeLa细胞中高表达能通过抑制细胞G1/S转换从而抑制细胞增殖,提示p27基因可能成为子宫颈癌基因治疗的靶基因。  相似文献   
7.
目的 研究重组天花粉蛋白 (recombinant trichosanthin, rTCS) 对宫颈癌 HeLa 细胞中 p27 基因甲基化状态和基因表达的影响。方法 应用不同质量浓度的 rTCS (20、40、80 μg/mL) 处理体外培养的宫颈癌 HeLa 细胞后,MSP 法检测用药前后细胞中 p27 基因的甲基化状态,RealTime PCR 法检测用药前后细胞中 p27 和 DNA 甲基转移酶1 (DNMT1) mRNA 水平的变化,Westernblotting 法检测用药前后细胞中 p27 蛋白表达的变化。结果 HeLa 细胞中 p27 基因为低表达,基因启动子区 CpG 岛呈部分甲基 化状态。40 μg/mL rTCS 处理导致 p27 基因启动子区 CpG 岛去甲基化;在 20、40、80 μg/mL 的 rTCS 作用 48 h 后,p27 基因 mRNA 相对表达水平分别升高 2.22、4.00、6.03 倍,p27 蛋白水平表达也逐渐增加;宫颈癌 HeLa 细胞中 DNMT1 mRNA 高表达,40 μg/mL rTCS 处理 48 h 可至 DNMT1 mRNA 表达水平降低 78%。结论 rTCS 通过抑制 DNMT1,逆转 p27 基因启动子区 CpG 岛的甲基化状态,使宫颈癌 HeLa 细胞中 p27 基因表达活化。rTCS 能逆转宫颈癌 HeLa 细胞 p27 基因甲基化状态,调控 p27 基因和 DNMT1 的表达。  相似文献   
8.
目的研究重组天花粉蛋白(recombinant trichosanthin,rTCS)对宫颈癌HeLa细胞中p27基因甲基化状态和基因表达的影响。方法应用不同质量浓度的rTCS(20、40、80μg/mL)处理体外培养的宫颈癌HeLa细胞后,MSP法检测用药前后细胞中p27基因的甲基化状态,Real-Ti me PCR法检测用药前后细胞中p27和DNA甲基转移酶-1(DNMT1)mRNA水平的变化,Western-blotting法检测用药前后细胞中p27蛋白表达的变化。结果HeLa细胞中p27基因为低表达,基因启动子区CpG岛呈部分甲基化状态。40μg/mLrTCS处理导致p27基因启动子区CpG岛去甲基化;在20、40、80μg/mL的rTCS作用48 h后,p27基因mRNA相对表达水平分别升高2.22、4.00、6.03倍,p27蛋白水平表达也逐渐增加;宫颈癌HeLa细胞中DNMT1 mRNA高表达,40μg/mLrTCS处理48 h可至DNMT1 mRNA表达水平降低78%。结论rTCS通过抑制DNMT1,逆转p27基因启动子区CpG岛的甲基化状态,使宫颈癌HeLa细胞中p27基因表达活化。rTCS能逆转宫颈癌HeLa细胞p27基因甲基化状态,调控p27基因和DNMT1的表达。  相似文献   
9.
目的:研究P16、P15、Smad7和TGF-β1在宫颈癌中的表达,研究其在不同临床病理特征中的意义。方法:选取三峡大学医学院自2008年1月~2010年5月收集的76例宫颈癌标本作为实验组,以50例正常宫颈组织作为对照组,采用免疫组织化学技术,分别检测P16、P15、Smad7及TGF-β1在两组中的表达情况,以及在肿瘤不同临床病理特征之间的关系。结果:①P16及P15蛋白在宫颈癌组织中的表达率与正常宫颈组织中P16、P15的表达率比较,差异具有统计学意义(P<0.05);②P16、P15蛋白的阳性表达率与宫颈组织的病理学分级具有相关性,P16、P15在宫颈癌Ⅰ级中的阳性表达率明显高于Ⅱ级和Ⅲ级;③Smad7、TGF-β1在宫颈癌组织中表达的阳性率明显高于对照组(P<0.05),同时Smad7、TGF-β1的表达与宫颈癌的临床分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论:P16、P15、Smad7、TGF-β1的表达与宫颈癌的发生和进展有一定的相关性,其表达的降低或缺失在宫颈癌的发展过程中具有协同作用,检验P16、P15、Smad7、TGF-β1的表达可以作为判定宫颈癌危险程度的指标,为正确的评估宫颈癌患者的预后提供依据。  相似文献   
10.
尤程程  黄利鸣 《广东医学》2008,29(4):686-688
1997年,Zou首次从HeLa细胞胞浆内纯化和克隆出凋亡蛋白酶活化因子-1 (apoptotic protease activating factor-1, Apaf-1)的cDNA,并证实Apaf-1为CED-4的人类同源类似物,由于人体内一系列信号转导级联反应均以Apaf-1为靶子而调节凋亡体,因此Apaf-1可被认为是凋亡体的真正核心。Soengas MS证实Apaf-1基因是一抑癌基因,由于Apaf-1独特的组织学分布、介导细胞凋亡和控制肿瘤发展的能力,一经发现就引起科研人员的高度重视。本文就Apaf-1结构、分子生物学特征、组织分布、功能等研究进展作一综述。  相似文献   
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