柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马组织PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)/β-链环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:健康SD大鼠120只,随机取20只作为正常组,另100只大鼠用于制备慢性不可预见性温和应激(CUMS)抑郁模型。再将CUMS抑郁大鼠随机分为模型组,柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组,氟西汀组,每组20只。柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组分别灌胃3.25,6.5,13 g·kg~(-1);氟西汀组灌胃盐酸氟西汀10 mg·kg~(-1);正常组和模型组灌胃等量生理盐水;1次/d,共干预21 d。应用糖水偏好和强迫游泳实验评估抑郁行为,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠大脑海马组织中PI3K,Akt,GSK3β以及β-catenin蛋白水平及其磷酸化水平。结果:给药21 d后,与正常组比较,模型组糖水偏好显著下降(P0.01);强迫游泳不动时间显著延长(P0.01);PI3K,p-PI3K p110,p-PI3K p85蛋白水平均显著降低(P0.01);Akt,p-Akt Thr308,p-Akt Ser473,p-GSK3βSer9,β-catenin水平均显著降低(P0.01);GSK3β,p-GSK3β Tyr216水平明显升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,柴胡加龙骨牡蛎汤中、高组大鼠糖水偏好显著增加(P0.01);强迫游泳不动时间显著缩短(P0.01);PI3K总蛋白,PI3K p110和PI3K p85亚基蛋白磷酸化水平均显著增高(P0.01);p-Akt Thr308和p-Akt Ser473水平均显著升高(P0.01);p-GSK3β Ser9,β-catenin水平显著增高(P0.01),而GSK3β,p-GSK3β Tyr216水平却明显降低(P0.05)。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤通过提高大鼠海马组织PI3K蛋白水平及活性,激活Akt,抑制GSK3β活性,阻止β-catenin降解,即提高大鼠海马组织PI3K/Akt信号通路活性,保护海马神经元。     

酸枣仁汤加味对抑郁大鼠海马谷氨酸受体表达的影响

目的:观察酸枣仁汤加味对慢性束缚应激抑郁大鼠海马谷氨酸受体表达的影响,探讨其基于谷氨酸受体的抗抑郁机制。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、酸枣仁汤加味低、中、高剂量组、氯胺酮组,每组10只。除正常组外,其余各组采用慢性束缚应激(CRS)制备大鼠抑郁模型,酸枣仁汤加味低、中、高剂量组分别灌胃酸枣仁汤加味6,12,24 g·kg~(-1),氯胺酮组腹腔注射氯胺酮15 mg·kg~(-1),正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,给药干预21 d。采用Morris水迷宫和新奇摄食实验评价大鼠的抑郁行为;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织NMDAR1,NMDAR2A,NMDAR2B,GluR1,mGluR1,CaMKⅡα和CaMKⅡβ蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组新奇摄食时间及逃避潜伏期显著延长(P0.01),空间探索时间显著缩短(P0.01);模型组大鼠海马组织NMDAR1,NMDAR2A,NMDAR2B,mGluR1和CaMKⅡβ表达水平均显著升高(P0.01);而GluR1,CaMKⅡα水平均显著降低(P0.01)。与模型组比较,酸枣仁汤加味中、高剂量组新奇摄食时间、逃避潜伏期显著缩短(P0.01),空间探索时间显著延长(P0.01);酸枣仁汤加味中、高剂量组NMDAR1,NMDAR2A,NMDAR2B,mGluR1和CaMKⅡβ蛋白表达水平均显著降低(P0.01);而GluR1,CaMKⅡα蛋白表达显著增高(P0.01)。结论:酸枣仁汤加味可显著改善慢性抑郁大鼠行为学,其机制可能与下调NMDAR2A,NMDAR2B,mGluR1和CaMKⅡβ表达水平,上调GluR1和CaMKⅡα表达有关。     

甘麦大枣汤及其合方治疗抑郁症研究新进展

抑郁症是一类情感障碍和心境障碍性疾病,多表现为显著持久的情绪低落,兴趣减退或快感缺失,常伴有疲乏、头痛、背痛、失眠等躯体症状。其发病机制不清,目前认为抑郁症与下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴,神经元损伤与神经营养因子（BDNF）,单胺类神经递质和细胞因子等有关。中医认为抑郁症属于“郁证”范畴,其发病多与情志失调,气机郁滞导致的五脏六腑气机失和有关。甘麦大枣汤为安神剂,出自张仲景的《金匮要略》,具有养心安神、和中缓急的作用,临床上常用于治疗抑郁症。目前应用甘麦大枣汤治疗抑郁症的临床类型主要有产后抑郁症、更年期抑郁症、乳腺癌合并抑郁症和中风后抑郁症等,这些病的中医发病病机大多与肝脾郁结、心脾两虚、肾气不足、情志郁滞有关。该方治疗抑郁症的作用机制主要与其能够增加抑郁症患者单胺类神经递质含量、调节单胺系统功能;降低中枢及外周促炎因子,调节中枢和外周炎症;降低血清促肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质类固醇（CORT）,抑制HPA轴亢进;增加脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA及蛋白表达等有关。本文结合抑郁症的发病机制,对甘麦大枣汤的临床应用、实验研究等方面的最新进展进行综述,总结其抗抑郁的作用机制,为临床治疗抑郁症提供新思路和新依据。     

柴胡疏肝散对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的:探讨柴胡疏肝散对肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的作用机制。方法:60只Wistar大鼠被随机均分为6组:正常组、模型组、柴胡疏肝散高、中、低剂量组、柴胡疏肝散预防组。除正常组外,其余各组均采用猪血清ip诱发HF,0.5 m L/只,2次/周,连续10周,5周后即可形成HF。预防组于造模同时给药(以柴胡疏肝散6.3 g·kg-1),柴胡疏肝散高、中、低剂量组[(12.6,6.3,3.15)g·kg-1]于造模第6周给药,连续10周。采用RT-PCR法检测各组肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1),Smad2,Smad3,Smad4和Smad7的mRNA表达,免疫组化法分别检测肝组织TGF-β1,磷酸化Smad 2/3(p-Smad 2/3)和Smad7蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组TGF-β1,Smad2,Smad3的mRNA和TGF-β1,p-Smad 2/3蛋白表达均显著增加(均P0.01),Smad7基因表达显著降低(均P0.01);与模型组比较,柴胡疏肝散中剂量组TGF-β1和Smad3 mRNA表达均显著降低,p-Smad 2/3和TGF-β1蛋白表达显著减弱(P0.05,P0.01),Smad7基因表达显著增加(P0.01)。结论:柴胡疏肝散有明显的抗HF作用,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。     

二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病细支气管壁细胞外基质重塑的影响

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠细支气管结构重塑的作用及其机制。方法:50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量组(5,10,20 g·kg-1),共5组,每组10只。以香烟烟熏加内毒素脂多糖(LPS)制备大鼠COPD模型。造模成功后,各观察组灌胃给药,检测肺功能,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织中基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinases,MMP-1),MMP-9及金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissueinhibitor of metalloproteinase,TIMP-1)mRNA表达,免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测MMP-1,MMP-9,TIMP-1以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原在细支气管中的表达。结果:与正常组比较,模型组肺组织匀浆MMP-1,MMP-9,TIMP-1 mRNA表达均显著增强(P0.01),细支气管壁MMP-1,MMP-9,TIMP-1,Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的表达均显著增强(P0.05)。与模型组比较,中、高剂量组肺组织匀浆MMP-1,MMP-9,TIMP-1 mRNA表达显著减弱(P0.01),细支气管壁中、高剂量组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达明显减弱(P0.05)。结论:二陈汤加味对细支气管管壁细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中的胶原有抑制作用。其机制可能与抑制MMP-1,MMP-9,并协调性抑制TIMP-1的表达,阻止细支气管ECM胶原的沉积有关。     

CD26、Ki67和表皮生长因子受体在甲状腺肿瘤中的表达及其诊断意义

目的 观察CD26、Ki67和表皮生长因子受体(EGFR)在甲状腺良恶性肿瘤中的表达,探讨其鉴别诊断意义,并寻找分化型甲状腺癌标志物.方法 用免疫组化S-P法检测分化型甲状腺癌、腺瘤各50例中CD26、Ki67和EGFR蛋白的表达,并分析它们的相关性.结果 CD26、Ki67和EGFR的阳性表达率、表达强度在腺癌组显著高于腺瘤组、尤其滤泡性腺癌显著高于滤泡性腺瘤组.结论 CD26、Ki67和EGFR的异常表达尤其CD26可能对滤泡上皮起源的甲状腺癌与腺瘤的鉴别诊断、预后判断有参考意义.     

阿尔茨海默病的免疫治疗问题

阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是与年龄相关的神经退行性疾病。对其免疫治疗研究取得了可喜的成果,但是也存在着一些困难有待克服。本文对AD的免疫治疗现状、丞待解决的问题和相应的研究对策做一全面分析。     

课堂讨论教学法在组织胚胎学教学中的应用

组织胚胎学是重要的基础医学课程,与许多相关课程都有着密切的联系。结合我们中医院校的实际教学条件以及学生的整体水平等情况,选择适合我校现状的教学模式--课堂讨论教学法,即在教授学生基础知识前提下将讨论案例引入课堂,让同学带着问题去思考,去主动探索,提高他们分析问题解决问题的能力。实行课堂讨论教学法是培养医学生独立思考问题、分析解决问题、理论联系实际等思维能力的好方法,亦是检查和衡量教学质量的好指标,我们采取此方法的教学目标是紧密围绕教学大纲,培养医学生综合能力。     

TBL教学法在生理学实验教学中的应用

目的探讨TBL教学法在生理学实验教学中的应用可行性。方法将应用班级的学生分为观察组和对照组,对照组采用传统讲授法,观察组用TBL教学模式。对两组实验报告进行评分以及理论考试成绩进行比较。结果观察组实验总成绩和理论总成绩均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论在生理学实验教学中引入TBL教学法具有可行性,TBL教学在生理学实验中能够调动学生学习的积极性,提高学生的综合能力,教学效果优于传统教学法。     

中医院校医学机能学综合实验的重新设计

同步观察家兔动脉血压、尿生成影响因素及药物作用的结果，本文对该综合实验重新设计并对其实验结果及实验设计的利弊进行分析。