人类染色体17p13.3位点新克隆基因HC56,HC71 和HC90在白血病细胞的表达

为研究人类染色体17p13．3位点新克隆的基因HC56，HC71和HC90在白血病细胞中的表达，应用同位素标记的、以βM2基因作为内参的半定量RT—PcR法，检测35例急性白血病和4株白血病细胞系的Hc56，Hc70和HC90基因的表达。结果显示，急性淋巴系白血病病人的HC90基因和T淋巴系白血病细胞系Jurkat细胞HC90基因表达水平降低。急性髓系白血病病人HC71基因表达水平降低。HC56基因表达在急性白血病和正常对照间未见显差异。结论：在人类白血病有HC70和HC90的基因表达异常。     

人胎盘间充质干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞的研究

目的：探索人胎盘间充质干细胞（MSCs）分化为胰岛素分泌细胞的诱导条件。方法从胎盘组织中获取MSCs,采用激活素A、表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等多种细胞因子诱导胎盘MSCs向胰岛素分泌细胞分化。利用免疫细胞化学染色、Western Blot及动物实验,对诱导后的细胞进行鉴定。结果经诱导后的细胞具备胰岛β细胞的部分特征,能表达胰十二指肠同源盒-1（PDX-1）、胰岛素和C肽,对糖尿病小鼠具有降糖作用。结论人胎盘MSCs经多种细胞因子诱导后可分化为胰岛素分泌细胞。     

右美托咪啶对幕上病灶切除术后患者镇静作用的临床效果观察

目的观察右美托咪啶应用于幕上病灶切除术后镇静作用的临床效果。方法选择幕上病灶切除术后患者40例(均在麻醉恢复室),年龄18～60岁,随机分为两组,每组20例。试验组:10min静脉泵注右美托咪啶0.8μg/kg后,以0.6μg.kg-1.h-1维持40min;对照组:10min静脉泵注生理盐水10ml后,20ml生理盐水静脉泵注40min。记录患者血压、心率、呼吸等变化,观察给药后患者镇静作用以及不良反应的发生情况。结果试验组给入右美托咪啶后HR、MAP均低于基础值,对比对照组差异具有统计学意义(P<0.05);RR各个时间点则无明显变化;试验组均达到Ramsay镇静分级Ⅳ级状态。结论右美托咪啶(负荷量0.8μg/kg,维持0.6μg.kg-1.h-1)应用于幕上病灶切除术后患者取得了满意的镇静效果。     

转铁蛋白受体介导的Bcl-2shRNA转移对HL-60细胞生长的抑制作用

目的 探讨Bcl一2短发夹状RNA（shRNA）表达载体对白血病细胞HL-60生长的抑制作用。方法 采用转铁蛋白-多聚乙烯亚胺介导的转染方法将携带绿色荧光蛋白基因的重组Bcl-2 shRNA1、shRNA2表达载体转入HL-60细胞。通过荧光显微镜和流式细胞仪观察绿色荧光蛋白的表达；采用台盼蓝拒染法计数活细胞；用免疫细胞化学方法检测Bcl-2蛋白表达水平。结果 Bcl-2 shRNA1、shRNA2载体分别转入HL-60细胞后，细胞中Bcl-2蛋白表达水平均显著降低（P〈0．05），转染后48、72、96h细胞生长明显受到抑制。结论 转铁蛋白受体介导的Bcl-2 shRNA可显著抑制HL-60细胞生长。     

VEGF siRNA增强白血病HL60细胞对阿糖胞苷药物的敏感性

目的 探讨VEGF siRNA是否能增强自血病细胞HL60对化疗药物阿糖胞苷的敏感性.方法 体外转录合成VEGF siRNA,转染HL60细胞,采用CCK8法检测细胞增殖的情况,RT-PCR方法检测细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA的表达水平,ELISA方法定量检测细胞培养液VEGF蛋白的表达水平,用流式细胞仪检测细胞的凋亡.结果 VEGF siRNA可以提高HL60细胞对阿糖胞苷的敏感性,VEGF siRNA与阿糖胞苷联用能显著抑制HL60细胞的存活,抑制率为82.9%(F=121.63,P<0.01).VEGF siRNA能降低VEGF mRNA121(F=17.17,P<0.01)和VEGF蛋白(F=3290.49,P<0.01)的表达水平.但是VEGF siRNA没有促进阿糖胞苷诱导的细胞凋亡水平.结论 VEGF siRNA通过抑制细胞的增殖来增强HL60细胞对阿糖胞苷的敏感性.     

脑功能区胶质瘤的现代手术策略

目的 探讨切除脑功能区胶质瘤手术新技术与方法.方法 112例胶质瘤患者在术中全麻唤醒状态下,通过术中B超或神经导航定位病灶,直接电刺激定位脑功能区结构,并在清醒状态下切除病变.术后随访时间3～84个月.结果 107例唤醒良好,术中有99例定位出运动区,61例定位出语言相关的功能区皮质,18例定位出感觉区.病变全切6...     

Pdxl与NeuroD1联合诱导LO2细胞Nkx6.1和GLUT2的表达

目的:应用分子生物学技术,构建胰腺十二指肠同源框蛋白1(Pdx1)和神经分化因子1(NeuroD1)转录因子真核表达质粒,检测其能否在真核细胞中有效表达并诱导人肝细胞转分化的能力.方法:以人胚胎胰腺组织mRNA为模板经RT-PCR扩增获得Pdxl和NeuroD1基因,分别克隆到真核双表达载体plRES质粒的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建pl/Pdxl/NeuroD1真核表达质粒,并转染LO2细胞.用RT-PCR、免疫组化、间接荧光法和Western blotting检测目的基因及NK转录因子相关的Nkx6.1(Nkx6.1)和葡萄糖运载体2(GLUT2)的表达情况.结果:目的基因克隆正确且在真核细胞中有效表达;并可诱导肝细胞表达胰腺B细胞功能相关的Nkx6.1和GLUT2因子.结论:pl/Pdxl/NeuroD1质粒成功构建和在人真核细胞表达,并诱导人肝细胞表达B细胞功能相关的Nkx6.1转录因子和GLUT2,提示Pdxl与NeuroDl可诱导肝细胞向胰腺内分泌细胞分化.     

人骨髓源干细胞向胰岛素分泌细胞分化(英文)

目的：探讨人骨髓源干细胞向具有功能的胰岛素分泌细胞分化的可能性。方法：从人骨髓分离间充质干细胞。采用表皮生长因子、β-巯基乙醇和高糖培养基诱导其向胰岛素分泌细胞分化。经诱导后,用RT-PCR检测胰岛β细胞相关基因的表达,并采用免疫细胞化学染色检测胞浆胰岛素的表达。此外,诱导后细胞分泌的胰岛素定量及胰岛素释放实验将采用化学发光法进行检测。将经诱导后的细胞移植到糖尿病小鼠的右侧肾被膜下。在移植后16 d持续检测小鼠的血糖水平,最后对右侧肾脏进行免疫组化检测。结果：经诱导后,细胞能表达胰岛β细胞相关基因;免疫细胞化学染色也能检测到胞浆有胰岛素的表达;而且这些细胞能对糖刺激有所反应。细胞被移植到糖尿病小鼠的肾被膜下,能起降血糖作用。其肾脏的免疫组化显示：肾被膜下有胰岛素阳性细胞。结论：人骨髓源干细胞具有向胰岛素分泌细胞分化的潜能,这将为糖尿病细胞治疗提供丰富的细胞来源。     

bc1-2基因siRNA-2提高急性原代白血病细胞对阿糖胞苷敏感性

目的研究以bcl-2基因为靶标有效siRNA-2(small interference RNA)能否提高急性原代白血病细胞对阿糖胞苷(Ara-C)敏感性.方法将siRNA转入原代白血病细胞并与Ara-C联合培养,于24、48、72 h,用锥虫蓝拒染法计数活细胞,用免疫细胞化学技术检测原代白血病细胞bcl-2和p53蛋白的表达.结果siRNA-2(1μmol/L)与Araa-C组(0.2 μmol/L)联合作用,在72 h内能显著降低原代白血病细胞存活,细胞数从3×108/L下降到1.2×108/L;显著抑制bcl-2和p53蛋白的表达,与对照组相比bcl-2蛋白表达率下降18.46%;p53蛋白表达率下降14.56%.结论siRNA-2能提高原代白血病细胞对阿糖胞苷敏感性.     

山西省饮水型慢性砷中毒病区环境介质中砷暴露水平调查

目的 调查山西省饮水型慢性砷中毒病区环境介质水、土壤以及自产粮食、蔬菜中的砷含量,了解该病区外环境中砷暴露水平,为病区地方性砷中毒的防治提供科学依据.方法 在山西省山阴县饮水型慢性砷中毒病区,按照《地方性砷中毒诊断标准》(WS/T 211-2001)选择126个家庭共309人作为调查对象,入户采集饮用水、土壤、当地自产粮食(小米、黍子)和蔬菜(马铃薯).水砷和粮食砷采用电感耦合等离子体质谱联用仪(ICP-MS)检测,土壤和蔬菜通过原子荧光分光光度计(AFS)定量检测砷含量.按饮水含砷量分为5组(≤10,＞ 10～50,＞50 ～ 100,＞100～200,＞200 μg/L),以≤10 μg/L组作为参考值,分析水砷暴露与皮肤病变的关系.结果 在抽取的126份饮用水样品中,水砷范围为4.04～720.00 μg/L,中位数为87.75 μg/L,超标率为63.49％(80/126);粮食砷浓度范围为0.16～4.58 mg/kg,中位数为0.66 mg/kg,超标率为98.73％(78/79);土壤和蔬菜中砷含量范围分别为5.34～13.74 mg/kg和0～ 0.30 mg/kg.用标准参考人估算通过饮水、粮食、蔬菜每天摄入的无机砷量,并与世界卫生组织(WHO)规定无机砷最大日允许摄入量(MTDI)比较,粮食中总砷含量为0.17 mg/kg时无机砷的摄入量相当于水砷浓度为10μg/L时无机砷的摄入量.同时,分析水砷暴露与皮肤病变关联强度,组间比值比(OR)分别为3.219、9.001、56.127、97.734,呈递增趋势,地方性砷中毒皮肤病变发病危险性逐渐增加,进一步对水砷暴露水平与皮肤病变严重程度进行Spearman等级相关检验,r=0.501 (P＜0.05),水砷暴露与砷中毒的皮肤病变存在关联性且水砷暴露水平越高,皮肤病变程度越严重.结论 山西省山阴县饮水型慢性砷中毒病区饮用水、自产粮食砷含量偏高,而土壤和蔬菜砷含量不高.饮用高砷井水是导致慢性砷中毒的主要危险因素,通过饮食摄入的砷也不容忽视.