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1.
姬宏莉  姬宏娟  宋卫兵  马永全  杜芳  王辉  肖冰 《广东医学》2011,32(10):1230-1232
目的 观察突变的大肠癌细胞线粒体DNA(mtDNA)转染 NIH3T3 细胞后转染细胞mtDNA D-环突变特性.方法 通过脂质体法(Lipofection 2000TM) 将大肠癌细胞突变的 mtDNA 真核表达载体转染 NIH3T3细胞,利用 G418 抗性筛选克隆细胞;用PCR法检测转染细胞线粒体突变情况.结果 ...  相似文献   
2.
目的 初步研究突变的大肠癌mtDNA与肿瘤发病机制的关系.方法 将已构建的重组表达载体转染NIH3T3细胞,通过MTT法及流式细胞仪(FCM)分别观察其增殖和凋亡的影响.结果 各组间NIH3T3细胞的凋亡率不同,差异有显著性(P<0.001),各组间NIH3T3细胞的增殖差异有显著性.结论 突变的大肠癌mtDNA可通过影响NIH3T3细胞的生物学行为,致其有恶性转化倾向,但具体的机制和过程有待于进一步研究.  相似文献   
3.
目的了解大肠癌细胞株(SW480,LOVO,HT29)线粒体DNA的突变,克隆突变的大肠癌线粒体DNA(mtDNA)基因,构建peDNA3.1(+)-mtDNA真核表达重组体,并导入NIH3T3及LST细胞,以探讨线粒体基因突变与肿瘤发生的关系。方法提取大肠癌细胞株(SW480,LOVO,HT29)mtDNA,扩增D—LOOP区,产物用DNA自动测序法进行序列分析。利用DNA重组技术将其定向插入真核表达质粒peDNA3.1(+),并用脂质体法导人NIH3T3及LST细胞。用MitoCa.ptureMitochondrialApoptosisDetectionKit试剂盒染色后用流式细胞仪及荧光显微镜检测转染细胞的凋亡情况。扩增并测序分析转染细胞的D—LOOP区突变特点。结果检测出大肠癌细胞株SW480,LOVO,HT29细胞mtDNAD—LOOP分别有10,9,8个突变位点。转染前后,各组间细胞凋亡无明显变化。转染细胞的核基因组可扩增出目的基因及Neo基因。4株NIH3T3转染细胞mtDNAD-环区分别检测到9,11,8,4个突变点,并相应有3,4,3,2个多态性变化。结论(1)转染突变的大肠癌细胞mtDNA后转染细胞的mtDNA均可发生多处的突变位点。(2)通过转染后突变的外源性的mtDNA可以整合到核基因组内。(3)突变的mtDNA转染LST细胞及NIH3T3细胞后,不影响转染细胞的凋亡改变。(4)mtDNA的突变可能通过影响体细胞mtDNA的突变和通过外源性mtDNA在核内的整合从而影响癌基因或抑癌基因的表达异常,从而参与肿瘤的发生发展。  相似文献   
4.
目的:观察大肠癌细胞突变的线粒体DNA(mtDNA)转染小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3后,mtDNA与转染细胞核内基因组的整合情况.方法:将携带大肠癌细胞突变mtDNA的重组质粒pcDNA3.1( )-Sw480 mtDNA、pcDNA3.1( )-NHWBC mtDNA及空质粒pcDNA3.1( )通过脂质体法转染NIH3T3细胞.同时用PCR法制备3条相应的绿色荧光蛋白标记的mtDNA探针.分离转染的NIH3T3细胞核内染色体,用荧光原位杂交(FISH)法检测mtDNA探针与核内基因组的整合情况.结果与结论:瞬时转染的NIH3T3细胞核基因组上存在mtDNA的同源序列.外源肿瘤细胞mtDNA与NIH3T3细胞核内基因组发生整合.  相似文献   
5.
宋卫兵  李道力  万虎 《人民军医》2001,44(8):479-479
为探讨肺炎支原体感染对心肌的损害 ,我们于1997~ 1999年对小儿支原体肺炎的心肌酶谱和心肌炎的冷凝集试验值进行测定 ,以探讨肺炎支原体对心肌损害的程度。1 对象和方法1 1 对象 支原体肺炎组 30例 ,男 15例 ,女 15例 ;年龄 1~ 13岁 ,平均 7 3岁。诊断根据临床表现、X线和冷凝集试验 >1∶32 [1] 。心肌炎组 34例 ,男 13例 ,女 2 1例 ;年龄 1~ 13岁 ,平均 8 5岁。诊断符合心肌炎诊断标准[2 ] 。1 2 方法 两组均检测心肌酶谱和冷凝集试验。抽血时间 :支原体肺炎组在发病 4~ 10d(平均 7 5d) ;心肌炎组在发病 3~ 15d(平均 8 1d)…  相似文献   
6.
目的观察活血利水法治疗慢性心力衰竭急性加重期患者的临床效果。方法将慢性心力衰竭急性加重期的80例患者按随机数字表法分为对照组与治疗组各40例。对照组使用常规的西医抗心衰治疗,治疗组在对照组基础上联合中药活血利水法治疗,两组患者均治疗2周。治疗后观察两组患者心功能、生活质量及中医证候改善情况,比较两组临床疗效。结果治疗组总有效率为87.50%,高于对照组的75.00%(P<0.05);治疗后两组患者的心功能均较前改善,治疗组改善优于对照组(P<0.05);治疗后两组患者的生活质量各项评分均较前升高,治疗组高于对照组(P<0.05);治疗后两组患者的NT-proBNP、Ghrelin水平均较治疗前降低,治疗组低于对照组(P<0.05);治疗后两组患者的中医证候评分均较前降低(P<0.05),治疗组改善优于对照组(P<0.05)。结论在常规西医抗心衰治疗的基础上,联合中医活血利水法能提高慢性心力衰竭急性加重期患者的生活质量和临床疗效,改善心功能。  相似文献   
7.
目的比较长春瑞滨、顺铂、氟尿嘧啶三联治疗方案与顺铂联合氟尿嘧啶治疗方案应用于老年晚期食管癌患者的临床疗效。方法选择2010年6月至2013年6月我院收治的老年晚期食管癌患者68例,随机分为A组和B组,每组各34例。A组采用顺铂联合氟尿嘧啶治疗方案,B组采用长春瑞滨、顺铂、氟尿嘧啶三联方案。每3周为1个周期,连续使用2周后评定患者的临床效果。对两组患者治疗后的近期疗效及毒副反应进行比较。结果 B组患者的有效率(61.8%)高于A组(38.2%),差异有统计学意义(P〈0.05)。B组患者的中位生存期为10.2个月,A组患者的中位生存期为8.7个月,差异有统计学意义(P〈0.05)。B组患者的骨髓抑制及消化道反应与A组患者比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论长春瑞滨、顺铂、氟尿嘧啶三联方案治疗老年晚期食管癌,可提高疗效及患者的生活质量,值得临床推广与应用。  相似文献   
8.
目的 观察突变的大肠癌细胞线粒体DNA(mtDNA)转染 NIH3T3 细胞后转染细胞mtDNA D-环突变特性。方法 通过脂质体法( Lipofection2000TM) 将大肠癌细胞突变的 mtDNA 真核表达载体转染 NIH3T3细胞,利用 G418 抗性筛选克隆细胞;用PCR法检测转染细胞线粒体突变情况。结果 突变mtDNA 导致转染细胞 mtDNA 的突变和多态性变化。 结论 突变的大肠癌 mtDNA可致NIH3T3细胞mtDNA位点变化,但具体的机制和过程有待于进一步研究。  相似文献   
9.
肠炎清通过抑制NF-κB活性对大鼠肠黏膜起抗炎作用   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 检测大鼠小肠炎模型肠黏膜通透性的改变,探讨肠炎清对大鼠小肠炎模型肠黏膜通透性的作用的机制.方法 应用氨甲碟呤制备大鼠小肠炎模型,实验设正常对照组、模型对照组、N-乙酰半胱氨酸(NAC,100 mg/kg)组及肠炎清组(CYQ,100mg/kg),每天灌胃给药1次,共6d.每天观察大鼠疾病活动指数(DAI)和肠黏膜损伤指数(CMDI),光镜下观察组织学改变并评分(HS).ELISA测定大鼠IL-10,RT-PCR方法检测大鼠肠黏膜内TNF-α、IL-β的表达,应用Western blotting测定各处理组细胞内磷酸化胞质IκB蛋白表达水平.结果 与正常组相比,小肠炎模型组DAI、CMDI、HS评分明显升高(P<0.01).肠炎清组DAI,CMDI,HS评分较模型组有明显下降(P<0.01).MTX组TNF-α、IL-1βmRNA达水平均较正常对照组明显增高,肠炎清组与NAC治疗组TNF-α、IL-1β表达水平低于MTX组,但IL-10的表达高于MTX组.肠炎清能抑制IκB的降解.结论 姜黄素对肠黏膜起保护作用的机制可能是抑制NF-κB活性,进而减少致炎细胞因子TNF-α、IL-1βmRNA表达,增强抑炎因子IL-10的表达来实现的
Abstract:
Objective To detect the changes in intestinal mucosal permeation in rats with methotrexate-induced small intestinal damage and investigate the protective effects of Changyanqing decoction. Methods Rat enteritis model was established by methotrexate (MTX) and sodium chloride.The rats were randomly divided into normal control group,model group,N-acetylcysteine(NAC) group and Changyanqing decoction group,and Changyanqing decoction(100 mg/kg)or saline was administered daily in the corresponding groups by gastric irrigation for 6 days.The disease activity index(DAI),colonic mucosal damage index(CMDI)and histological score(HS) of the rats were observed and evaluated.The levels of mRNA expressions of TNF-α and IL-1β were detected by semi-quantitative RT-PCR.The expression of IL-10 was detected by enzyme linked immunosorbent assay,and IκB expression was determined with Western blotting.Results Compared with the normal control group,the model group showed significantly increased DAI,CMDI and HS.The DAI,CMDI,and HS in rats treated with Changyanqing decoction were significantly decreased in comparison with those in the model group (P<0.01).The expressions of TNF-α and IL-1β were significantly higher in MTX-treated group than in the control group.The expression of TNF-α and IL-1β mRNA in the Changyanqing group and NAC group were significantly lower,but IL-10 significantly higher than those of the MTX group.In MTX group,obvious NF-κB activation was observed,whose expression was significantly stronger in the cell nuclei,and the IκB in the cytoplasm was markedly degraded.Conclusion Changyanqing decoction offers protection on intestinal mucosa by inhibiting NF-κB activation to reduce TNF-α and IL-1β mRNA expressions and increase IL-10 expression.  相似文献   
10.
目的:了解大肠侧向发育型肿瘤(laterally spreading tumor, LST)线粒体DNA的突变,探讨其与肿瘤发生的关系. 方法:提取LST线粒体DNA(mtDNA),扩增D-环区,产物用DNA自动测序法进行序列分析. 结果:共检测到4个碱基突变.第16223位C突变为T,第16298位C突变为T,第16362位T突变为C,第16519 位T突变为C. 结论:线粒体DNA D-环区是—个具有高度多态性和突变性的区域,在LST中突变率较高.  相似文献   
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